紅臉頰草莓組培快繁技術(shù)研究

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1、“紅臉頰”草莓組培快繁技術(shù)研究李彩華劉玲艷）摘要：以“紅臉頰”草莓為試材，對(duì)草莓匍匐莖莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)進(jìn)行組織培養(yǎng)，篩選出適合“紅臉頰”草莓誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基為MS+BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L、繼代增殖培養(yǎng)基為MS+BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L、生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA0.5mg/L+白砂糖15g/L。關(guān)鍵詞：草莓；紅臉頰；莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)；組培快繁SpeedReproductionofStraalstyle="MARGIN:0cm0cm0pt;TEXT-INDENT:12.05pt;TEXT-ALIGN:center;mso-char-indent-count:1.0"

2、align=center>LiCaihua，LiuLingyan（TissueCultureCenterofHeilongjiangXiangfangFarmHaerbin，150038）Abstract：Thispaperisareportofspeedreproductionofstraentedaterialof“Honglianjia”straalstyle="MARGIN:0cm0cm0pt;TEXT-INDENT:12.05pt;mso-char-indent-count:1.0">Key;speedreproductionoftissueculture草莓(（Fragaria

3、ananassaDuchesen）是薔薇科、草莓屬多年生的漿果植物，其果實(shí)鮮美，營(yíng)養(yǎng)豐富。目前，草莓種苗的繁殖方法主要有葡萄莖繁殖和分株繁殖[1]，草莓葡萄莖繁殖系數(shù)較低且多帶病毒苗，導(dǎo)致草莓品種退化、產(chǎn)量、質(zhì)量下降。利用草莓微莖尖（0.2-0.5mm）脫毒結(jié)合組織培養(yǎng)快繁技術(shù)培育出的草莓組培苗，可部分或全部脫除病毒,使品種的優(yōu)良性狀得以保持,產(chǎn)量提高[2]?！凹t臉頰”是日本靜岡縣農(nóng)業(yè)試驗(yàn)場(chǎng)以章姬和幸香雜交獲得的草莓品種,1999年命名,之后引入我國(guó)。該品種具有生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)、果大、果面及果肉鮮紅色、甜酸適口、品質(zhì)優(yōu)、產(chǎn)量高、耐貯運(yùn)、中等抗病性等特點(diǎn)[3]，深受廣大栽培者的喜愛(ài)。為使“紅臉頰”草

4、莓得到進(jìn)一步的推廣應(yīng)用，我們對(duì)這一品種進(jìn)行了組培研究，為逐步建立穩(wěn)定的高頻再生系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)脫毒草莓工廠化育苗、規(guī)?；a(chǎn)提供技術(shù)支持。1材料和方法1.1材料材料于2006年選自黑龍江省香坊實(shí)驗(yàn)農(nóng)場(chǎng)草莓繁育基地,為7、8月份的匍匐莖莖尖。1．2方法取1-1.5cm長(zhǎng)的匍匐莖莖尖,用流水沖洗30-90min,先用75%酒精消毒30ｓ,再用無(wú)菌水沖洗3-5次,然后用0.1%的升汞處理８-10min,最后用無(wú)菌水沖洗5-6次。在超凈工作臺(tái)上剝?nèi)?.5mm的草莓莖尖生長(zhǎng)點(diǎn),接入誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基中。以ＭＳ為基本培養(yǎng)基,加蔗糖30g/L,瓊脂6g/L,PH5.8。培養(yǎng)室溫度為(25±1)℃,光照強(qiáng)度1500

5、-2000lux,光照時(shí)間每天12h。誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+BA0.5-1.5mg/L+NAA0.01-0.1mg/L;繼代增殖培養(yǎng)基為MS+BA1.0mg/L+IBA0.01-0.15mg/L;生根培養(yǎng)基為MS、1/4MS、1/2MS+NAA0.5mg/L、1/2MS+NAA0.1mg/L。2．結(jié)果和討論2．1莖尖的誘導(dǎo)分化培養(yǎng)在如表1所示的試驗(yàn)中，每處理接種40瓶材料（1瓶接1個(gè)芽生長(zhǎng)點(diǎn)），重復(fù)實(shí)驗(yàn)3次。在接種45d后統(tǒng)計(jì)萌芽率（不計(jì)污染瓶數(shù)）。計(jì)算公式為：萌芽率（%）=發(fā)生萌芽的外植體數(shù)/接種的外植體數(shù)×100%從表1中分析得出：各處理組對(duì)“紅臉頰”草莓莖尖都能誘導(dǎo)出芽，從NAA的濃度影

6、響來(lái)看，最適濃度為0.05,當(dāng)濃度過(guò)高時(shí),萌芽率減少,當(dāng)NAA濃度為0.05時(shí),添加BA的濃度為1.0mg/L時(shí),芽的誘導(dǎo)率最高,為78.3%。但從誘導(dǎo)的試管苗來(lái)看,后一組的試管苗葉片出現(xiàn)了畸形,葉柄變脆,芽叢呈蓮座狀,是由于激素濃度過(guò)高所致[4]。由此可見(jiàn)，“紅臉頰”草莓莖尖誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為MS+BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L。在誘導(dǎo)分化培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)現(xiàn),接入培養(yǎng)基的莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)太細(xì)小或剝?nèi)〔僮鲿r(shí)間過(guò)長(zhǎng),都易死亡,接材較大易成活,但脫毒草效果差。故剝接莖尖時(shí),需經(jīng)多次試驗(yàn),接入的莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)在可以成活的前提下越小越好。表1BA與NAA對(duì)“紅臉頰”草莓莖尖誘導(dǎo)分化的影響處理外植體數(shù)（個(gè)

7、）萌芽率（%）BA（mg/L）NAA（mg/L）0.500.015322.60.500.055853.40.500.105630.41.000.015427.81.000.056078.31.000.105832.21.500.015228.81.500.055961.91.500.105722.82．2繼代培養(yǎng)將誘導(dǎo)出的健壯試管苗轉(zhuǎn)接到繼代培養(yǎng)基上,每組培養(yǎng)基轉(zhuǎn)接10瓶,每瓶接苗３株,培養(yǎng)25天后調(diào)查芽的增殖情況，結(jié)果