發(fā)酵工程發(fā)酵工程實(shí)驗(yàn)考題

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1、1.決定搖瓶溶氧量的因素有哪些?它們?nèi)绾斡绊憮u瓶溶氧量?因素?fù)u瓶的透氣性搖床的轉(zhuǎn)速培養(yǎng)基的粘稠度影響搖瓶中的氧氣主要是通過(guò)封瓶的8層紗布進(jìn)入,紗布的透氣性越好,搖瓶的溶氧量就越大搖床通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng),帶動(dòng)培養(yǎng)基翻滾流動(dòng),轉(zhuǎn)速越大,培養(yǎng)基的流動(dòng)越劇烈,越增大了氣體與培養(yǎng)基的接觸面積,從而增大溶氧量培養(yǎng)基的粘稠度越大,氧氣越難以進(jìn)入,溶氧量越低2.采用磷鉬藍(lán)法測(cè)定發(fā)酵液中的植酸酶活性實(shí)驗(yàn)中,空白對(duì)照中并未發(fā)生酶和底物的水解反應(yīng),但經(jīng)過(guò)顯示后,顏色卻呈較深的藍(lán)色,試解釋其原因。答:磷鉬藍(lán)作為顯色液,是需要現(xiàn)配現(xiàn)用的,因?yàn)榱足f藍(lán)比較容易被氧化,產(chǎn)生藍(lán)色還原物。當(dāng)對(duì)樣品和空

2、白對(duì)照進(jìn)行水浴顯色時(shí),空白對(duì)照因?yàn)槭軣?,被氧化的程度深,所以空白?duì)照中并未發(fā)生酶和底物的水解反應(yīng),但經(jīng)過(guò)顯示后,顏色卻呈較深的藍(lán)色。3.紅曲米發(fā)酵實(shí)驗(yàn)中,為何要添加酸水?無(wú)菌酸水如何制得?答:此題課堂上未講4.產(chǎn)植酸酶黑曲霉的分離實(shí)驗(yàn)中,為何選用植酸鈣而不選用植酸鈉?因?yàn)樵谥菜猁}為產(chǎn)植酸酶黑曲霉的唯一磷來(lái)源,將植酸鈣加入培養(yǎng)基中,可以使培養(yǎng)基變得混濁,待植酸鈣被利用后會(huì)產(chǎn)生較明顯的透明圈,以便從透明圈中分離出產(chǎn)植酸酶黑曲霉,而用植酸鈉則不會(huì)產(chǎn)生透明圈5.產(chǎn)植酸酶黑曲霉的分離實(shí)驗(yàn)中,為什么不將脫氧膽酸鈉溶液和氯霉素眼藥水加入到篩選培養(yǎng)基中一起滅菌?答:氯霉素

3、眼藥水是由特定的廠家生產(chǎn)的,在生產(chǎn)過(guò)程中就已經(jīng)進(jìn)行了滅菌,另外氯霉素本身就具有殺菌作用,所以在試驗(yàn)中不需要滅菌;脫氧膽酸鈉會(huì)與培養(yǎng)基中的鐵鹽成分在高溫時(shí)發(fā)生反應(yīng)。6.請(qǐng)?jiān)敿?xì)說(shuō)明產(chǎn)植酸酶黑曲霉的分離實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)原理。答:利用透明圈法,提供唯一磷源,設(shè)計(jì)篩選培養(yǎng)基從樣品中分離目標(biāo)微生物—產(chǎn)植酸酶黑曲霉7.產(chǎn)植酸酶黑曲霉的搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn)中,搖瓶的作用有哪些?答:1、氣體和營(yíng)養(yǎng)分布均勻2、溫度保持恒定,不會(huì)出現(xiàn)局部高低溫3、代謝產(chǎn)物分散4、避免影響其他菌絲生長(zhǎng)8.植酸酶酶活力測(cè)定實(shí)驗(yàn)中,若顯色后的反應(yīng)體系測(cè)定吸光度值為2.23,說(shuō)明什么問(wèn)題?該如何調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案?答:這

4、種現(xiàn)象說(shuō)明了待測(cè)物的濃度過(guò)大,調(diào)整方案是稀釋待測(cè)物9.植酸酶酶活力測(cè)定實(shí)驗(yàn)中,做標(biāo)線的目的是什么?答:標(biāo)線是反應(yīng)吸光度與無(wú)機(jī)磷濃度之間的關(guān)系,從而使得我們測(cè)了樣品的吸光度后即可在標(biāo)線上讀出無(wú)機(jī)磷濃度,進(jìn)行酶活力的計(jì)算1.簡(jiǎn)述滅菌鍋的使用方法及步驟。答使用方法:1、向滅菌鍋內(nèi)注水至三腳架上邊緣2、打開滅菌鍋進(jìn)行預(yù)熱3、放入內(nèi)鍋,再待滅菌物整齊排放在鍋內(nèi)4、把排氣管捋直,放入排氣槽內(nèi),蓋上蓋子5、螺栓對(duì)應(yīng)擰緊,打開開關(guān),加熱6、待壓力達(dá)到0.05Mpa,進(jìn)行排冷空氣,壓力歸零時(shí),在加熱,反復(fù)兩次后維持溫度在指定的溫度指定時(shí)間7、自然降溫或排氣降溫,2.試述試管

5、棉塞的詳細(xì)制作步驟。答:1.試述錐形瓶棉塞的詳細(xì)制作步驟。與11一樣2.試述發(fā)酵瓶棉塞的詳細(xì)制作步驟。取8層紗布——直接塞在瓶口內(nèi)——整理紗布,使得紗布與瓶壁的接觸處無(wú)折痕即可3.試述平板接種試管斜面的詳細(xì)步驟。工具的滅菌及手、試管斜面、平板和工作臺(tái)等的消毒——點(diǎn)燃酒精燈,再把手消毒,在酒精燈旁打開平板和試管塞,——用接種環(huán)在平板上取一環(huán)菌絲接種到斜面上,蓋上平板,塞上試管塞——適宜條件培養(yǎng)4.試述搖瓶種子接種發(fā)酵瓶的詳細(xì)步驟。工具的滅菌及手、搖瓶種子、接種發(fā)酵瓶、工作臺(tái)等的消毒——點(diǎn)燃酒精燈,再把手消毒,在酒精燈旁打開瓶塞,——用移液管從種子瓶量取適量的

6、菌液接種到發(fā)酵瓶中——蓋上瓶塞——適宜條件培養(yǎng)5.試述斜面孢子接種搖瓶的詳細(xì)步驟。工具的滅菌及手、斜面、搖瓶、工作臺(tái)等的消毒——點(diǎn)燃酒精燈,再把手消毒,在酒精燈旁打開無(wú)菌水試管塞和斜面試管塞——把無(wú)菌水加入斜面中,蓋上塞子,震蕩——在酒精燈旁,打開搖瓶塞和斜面塞——用移液管從斜面中吸取適量的孢子液,注入搖瓶中,——蓋上塞子——適宜條件培養(yǎng)6.植酸酶酶活力測(cè)定實(shí)驗(yàn)中,樣品罐與空白罐的加樣順序有何不同?為什么不同?答:樣品管和空白管加樣主要是TCA和植酸納的順序相反;因?yàn)?、保證空白管和樣品管加樣相同2、避免空白管中的酶液與底物反應(yīng)7.植酸酶酶活力測(cè)定實(shí)驗(yàn)中,

7、Vc、植酸鈉和TCA的作用各是什么?Vc:顯色液的主要成分之一,作為還原劑;植酸納:作為酶反應(yīng)的底物;TCA:終止反應(yīng)8.所培養(yǎng)的平板有沒(méi)有可能得不到菌落?如果沒(méi)有得到菌落,怎么辦?答:有可能解決方法:1、對(duì)樣品進(jìn)行富集2、取稀釋倍數(shù)低的稀釋液9.產(chǎn)植酸酶黑曲霉的分離實(shí)驗(yàn)中,平板中為什么要加入1%脫氧膽酸鈉溶液?答:抑制黑曲霉菌絲的瘋長(zhǎng),使黑曲霉菌落分明10.產(chǎn)植酸酶黑曲霉的分離實(shí)驗(yàn)中,氯霉素注射液或氯霉素眼藥水為何不需要滅菌,加入有何作用?氯霉素眼藥水是由特定的廠家生產(chǎn)的,在生產(chǎn)過(guò)程中就已經(jīng)進(jìn)行了滅菌,另外氯霉素本身就具有殺菌作用,所以在試驗(yàn)中不需要滅菌

8、作用:抑制雜菌的生長(zhǎng)11.產(chǎn)植酸酶黑曲霉的分離實(shí)驗(yàn)中,經(jīng)過(guò)一次分離

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