血紅蛋白測(cè)定的實(shí)驗(yàn)

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1、血紅蛋白測(cè)定【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹空莆昭t蛋白測(cè)定的臨床意義熟悉毛細(xì)管采血過(guò)程，分光光度計(jì)的操作了解血紅蛋白測(cè)定的注意事項(xiàng)【實(shí)驗(yàn)原理】血液在血紅蛋白轉(zhuǎn)化液中表面活性劑的作用下溶血后，血紅蛋白（除SHb外）被高鐵氰化鉀（K3Fe（CN）6）氧化為高鐵血紅蛋白（Hi），Hi再與氰化鉀（KCN）中的氰離子（CN-）結(jié)合生成穩(wěn)定的棕紅色氰化高鐵血紅蛋白（HiCN）。HiCN最大吸收波峰在540nm,最小吸收谷為504nm?？捎梅止夤舛扔?jì)直接測(cè)定或用HiCN標(biāo)準(zhǔn)液比色法測(cè)定。即可求出待測(cè)血紅蛋白濃度。此法稱(chēng)HiCN法。【試劑】血紅蛋白轉(zhuǎn)化液（文齊氏液，Vankampen

2、-Zijlstra’液）：氰化鉀50mg，提供氰離子（CN-）高鐵氰化鉀200mg，氧化劑無(wú)水磷酸二氫鉀140mg，緩沖液成分，維持溶液的pH值，【實(shí)驗(yàn)操作】????（1）取一支試管加入5.0mlHiCN試劑，取全血20μl，加入到5.0mlHiCN試劑中，混勻后靜置5min，使血紅蛋白轉(zhuǎn)化完全。????（2）分光光度計(jì)，波長(zhǎng)540nm，比色杯光徑1.0cm，杯溫20-300C，以蒸餾水或空白轉(zhuǎn)化液調(diào)零，測(cè)定樣品吸光度值（A）?！居?jì)算】根據(jù)比爾定律，濃度與吸光度成正比，所以實(shí)際操作中我們還可以直接用待測(cè)液的吸光度A測(cè)/標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度A標(biāo)＝待測(cè)液的濃度

3、C測(cè)/標(biāo)準(zhǔn)液的濃度C標(biāo)來(lái)直接計(jì)算待測(cè)液的濃度。【參考值】男性：120~160g／L，女性：110~150g／L，新生兒：170~200g／L?！九R床意義】照書(shū)上寫(xiě)圖1紅細(xì)胞和血紅蛋白的生理變化曲線(xiàn)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)醫(yī)學(xué)決定水平：高于6.8×1012/L，應(yīng)采取相應(yīng)治療措施；低于3.5×1012/L可診斷貧血；低于1.5×1012/L應(yīng)考慮輸血。