Id1基因表達(dá)與垂體腺瘤的侵襲性研究.pdf

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1、分類號(hào)：?jiǎn)挝淮a：安工夂論文題目：基因表達(dá)與垂體腺瘤的侵襲性研究作者姓名馬勃專業(yè)名稱免疫學(xué)導(dǎo)師姓名李志強(qiáng)教授完成時(shí)間：二—五年六月中圖分類號(hào)：論文編號(hào)：學(xué)科分類號(hào)：密級(jí)：—公一安徽理工大學(xué)碩士學(xué)位論文基因表達(dá)與垂體腺瘤的侵襲性研宂作者姓名：馬勃專業(yè)名稱：免疫學(xué)研究方向：神經(jīng)免疫和顱腦創(chuàng)傷導(dǎo)師姓名：李志強(qiáng)教授導(dǎo)師單位：安徽理工大學(xué)答辯委員會(huì)主席：楊立新論文答辯日期：年月曰安徽理工大學(xué)研究生處年月日ADissertationinImmunologyStudyoftheexpressionofIdlgenetoinvasionofthepituitaryade

2、nomaCandidate:MaBoSupervisor:LiZhiqiangMedicalSchoolAnHuiUniversityofScienceandTechnologyNo.168，獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方以外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得安徽理工大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名：另基曰期少年月曰學(xué)位論文版

3、權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解安徽理工大學(xué)有保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：研究生在校攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬于安徽理工大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向囯家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)安徽理工大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以釆用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。（保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書）學(xué)位論文作者簽名簽字曰期力年彡月日導(dǎo)師簽名簽字日期年月日摘要摘要【目的】初步研宄蛋白在侵襲性垂體腺瘤組織中的表達(dá)及意義，構(gòu)建代號(hào)為的原代侵襲性垂體腺瘤細(xì)胞株，探討轉(zhuǎn)染后細(xì)胞侵

4、襲性的改變，從而為臨床診斷和治療侵襲性垂體腺瘤提供新的理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。【方法】分別檢測(cè)蛋白在侵襲性和非侵襲性垂體腺瘤中的表達(dá)我們從本院收集的例術(shù)中新鮮冰凍垂體腺瘤中隨機(jī)選取例侵襲性垂體瘤和例非侵襲性垂體瘤提取全蛋白，提取的總蛋白，加入蛋白上樣緩沖液按比例，于°煮沸。方法檢測(cè)后觀察凝膠圖像，應(yīng)用圖像軟件掃描凝膠圖片，得到相應(yīng)灰度值，分析蛋白在侵襲性和非侵襲性垂體腺瘤中的表達(dá)是否有顯著差異。構(gòu)建代號(hào)為的原代侵襲性垂體腺瘤細(xì)胞株術(shù)中取出垂體腺瘤組織后，在無菌條件下放入溶液中，封口膜封口，置于冰桶中轉(zhuǎn)移至實(shí)驗(yàn)室。通過機(jī)械消化和酶消化結(jié)合方法分離細(xì)胞。本課題組利用

5、侵性垂體腺瘤新鮮組織樣本原代培養(yǎng)成代號(hào)為的細(xì)胞。轉(zhuǎn)染細(xì)胞用無酶稀釋成，分裝儲(chǔ)存于°。轉(zhuǎn)染時(shí)用細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋，按照比例和混勻，室溫靜置，然后按照不同終濃度加入不含血清的培養(yǎng)液中，繼續(xù)培養(yǎng)后換成含血清的培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。檢測(cè)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞中的蛋白表達(dá)，檢驗(yàn)基因沉默效率。移行小室侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)轉(zhuǎn)染細(xì)胞后對(duì)其侵襲能力的影響，倍光鏡下隨機(jī)取個(gè)視野計(jì)數(shù)膜背面的穿膜細(xì)胞，取平均數(shù)。實(shí)驗(yàn)重復(fù)次。【結(jié)果】基因在侵襲性垂體瘤中的表達(dá)明顯高于在非侵襲性垂體瘤中的表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（，，，，也同樣進(jìn)一步提示基因在侵襲性垂體瘤中具有調(diào)節(jié)作用。蛋白在轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞中表達(dá)顯著減低。摘要在倍

6、隨機(jī)選取的個(gè)視野下計(jì)數(shù)對(duì)照組與干擾組細(xì)胞數(shù)發(fā)現(xiàn)被轉(zhuǎn)染的細(xì)胞組為（±，未被轉(zhuǎn)染的細(xì)胞組為土，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，。表明轉(zhuǎn)染靶向干擾后，細(xì)胞的遷移能力明顯降低。蛋白在轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞中表達(dá)顯著減低?！窘Y(jié)論】蛋白在侵襲性垂體腺瘤中表達(dá)上調(diào)，與非侵襲性垂體腺瘤相比具有顯著性差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。蛋白可促進(jìn)垂體腺瘤細(xì)胞的侵襲、遷移等生物學(xué)行為，基因靶向治療可能成為治療侵襲性垂體腺瘤的新的策略之一。圖表參關(guān)鍵詞：基因；垂體腺瘤；侵襲性分類號(hào)：Abstract【】【】，°，。摘要，，±土，：目錄目錄插圖或附表清單注釋說明清單弓丨第一部分在侵襲性垂體腺瘤和非侵襲性垂體腺瘤中的表

7、達(dá)弓言材料與方法結(jié)果艦第二部分蛋白在垂體腺瘤細(xì)胞的表達(dá)與其侵襲性的相關(guān)性研宄弓胃材料與方法練討論參考文獻(xiàn)波‘后記或致謝作者簡(jiǎn)介及讀研期間主要成果目錄插圖或附附表清單插圖或附表清單表對(duì)細(xì)胞侵襲能力的影響（±圖在侵襲性和非侵襲性垂體腺瘤中的表達(dá)圖和分別在被干擾后的細(xì)胞和未被干擾的細(xì)胞（對(duì)照組）中的表達(dá)圖未轉(zhuǎn)染細(xì)胞圖轉(zhuǎn)染的細(xì)胞插圖或附附表清單注釋說明清單縮寫英文全稱中文名稱分化抑制因子螺旋環(huán)螺旋結(jié)構(gòu)小干擾干擾血管內(nèi)皮生長因子牛血清白蛋白緩沖液磷酸鹽緩沖液二甲基亞砜社會(huì)科學(xué)統(tǒng)計(jì)包十二烷基磺酸鈉甲基乙二胺增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光法垂體腫瘤轉(zhuǎn)化基因人單絲氨酸蛋白激酶引言弓丨言侵

8、襲性垂體腺瘤，類似于惡性腫瘤，具有向周圍組織呈侵襲性生長的生物學(xué)特性，常常侵犯鞍