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《羧甲基茯苓多糖的制備及生物活性研究.pdf》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內容在學術論文-天天文庫。
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3、calacivitiesoftudonPrearationandBiltSgypmtmaranCarboxehlachyypy論文何麗雨者作指導教師何靜仁教授業(yè)食品工程專學科_〇?。崳姡迸c〇><?如<日論文提日期>7論文答辯期交兔評t答辯委會主席考祠人員倦譯21605月年摘要茯苓屬我國衛(wèi)生部頒布的食藥兩用資源,茯苓重要的活性成分—茯苓多糖能提高機體免疫力,具有防治腫瘤、抗炎、抗衰老等多種生物活性,具有極高的食用和藥用價值。茯苓多糖主要為堿溶性多糖,因不溶于水而影響其活性的發(fā)揮。本研究以茯苓菌核為原
4、料,提取堿溶性茯苓多糖,并對其進行羧甲基化結構修飾,制備水溶性羧甲基茯苓多糖;經醇沉、脫蛋白和柱層析分離純化得高純度均一多糖,通過光譜、色譜等技術分析鑒定其理化性質和結構特性;通過細胞試驗和自由基清除試驗評價其抗腫瘤、抗氧化活性,主要研究結論如下:(1)采用溶媒法制備了水溶性羧甲基茯苓多糖,得羧甲基取代度0.851;乙醇沉淀工藝研究試驗表明,羧甲基茯苓多糖的最佳醇沉濃度為80%,多糖沉淀率可達80.43%;通過綜合考察Sevag法、鹽酸法和三氯乙酸法的脫蛋白率和多糖損失率,確定了以Sevag法作為羧甲基茯苓多糖的脫蛋白方法;粗多糖再經離子交換柱層析(DEAE-
5、52Cellulose)和凝膠柱層析(ToyopearlHW-65S)進一步分離純化得到均一多糖,多糖含量97.81%。(2)通過高效體積排阻色譜-示差折光檢測器-多角激光光散射儀(HPSEC-RI-4MALLS)聯(lián)用法測定羧甲基茯苓多糖的重均分子量為6.453×10g/mol,并采用紫外光譜、紅外光譜、熱重分析、粒度分析等檢測手段對其基本理化性質和結構初步分析。紫外光譜分析結果表明羧甲基茯苓多糖在280nm、400nm兩處均無明顯吸收峰,表明多糖樣品不含有蛋白質和色素類物質。紅外光譜分析結果表明,羧甲基茯苓多-1-1糖是β-D-吡喃糖,1630cm和1424
6、cm處出現新的強吸收峰可證明羧甲基化成功。(3)采用MTS法對羧甲基茯苓多糖在體外抑制人肝癌細胞HepG2、人胃癌細胞MGC-803和人乳腺癌細胞株MCF7的增殖作用進行了研究,結果顯示,20、100和500ug/mL的羧甲基茯苓多糖對三種腫瘤細胞的生長均有一定的抑制作用,且隨多糖作用劑量的增大,其對腫瘤細胞生長的抑制作用增強。500ug/mL的羧甲基茯苓多糖對HepG2、MCF7和MGC-803細胞的抑制率分別可達36.09%、48.70%和63.04%,其中MGC-803細胞生長抑制效果最明顯。(4)采用微弱化學發(fā)光法研究羧甲基茯苓多糖的抗氧化活性,研究結
7、果表明羧甲基茯苓多糖具有較強的體外抗氧化活性,其對3種自由基的清除能力依次為超-氧陰離子自由基(O2·)>過氧化氫(H2O2)>羥基自由基(·OH),IC50值分別為2.94、5.21、8.10mg/mL。關鍵詞:羧甲基茯苓多糖;分離純化;理化性質;抗腫瘤;抗氧化IABSTRACTPoriacocosisadual-purposeplantofherbandfood,whichhasbeenissuedbyMinistryofPublicHealth.Pachymaranwasnotedasthemostimportantbioactivecompounds,
8、whichhashighlyedibl