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《基因槍法介導(dǎo)的OsNACl、GAFP和ThpI基因轉(zhuǎn)化小麥的研究.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、目錄摘要??????????????????????????????????．iAbstract．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．??．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．iii符號(hào)說明?????????????????????????????v第一章文獻(xiàn)綜述?????????????????????????．：．1l小麥轉(zhuǎn)基因技術(shù)的研究進(jìn)展?????????????????????????一11
2、．1基因槍法?????????????????????????????21．1．1影響基因槍法轉(zhuǎn)化率的因素??????????????????31．1．2基因槍法的優(yōu)缺點(diǎn)??????????????????????．．41．2農(nóng)桿菌介導(dǎo)法???????????????????????????41．3花粉管通道法???????????????????????????．51．3．1花粉管通道法的機(jī)理??????????????????????51．3．2花粉管通道法的研究進(jìn)展???????????????????．．51．3．3花粉管通道法的優(yōu)
3、缺點(diǎn)????????????????????。62轉(zhuǎn)化的相關(guān)基因概況????????????????????????????．．62．1OsNACl的研究進(jìn)展?????????????????????????62．1．1植物轉(zhuǎn)錄因子概述??????????????????????。62．1．2NAC轉(zhuǎn)錄因子研究進(jìn)展????????????????????。72．1．3OsNACl轉(zhuǎn)錄因子的研究進(jìn)展??????????????????72．2GAFP的研究進(jìn)展??????????????????????????72．2．1GAFP概述????
4、??????????????????????????????．．72．2．2GAFP基因的克隆和應(yīng)用????????????????????82．3ThpI的研究進(jìn)展??????????????????????????．93轉(zhuǎn)基因小麥鑒定和基因表達(dá)?????????????????????????．93．1選擇標(biāo)記基因和報(bào)告基因?????????????????????．．1O3．2PCR檢測(cè)?????????????????????????????????????．103．3實(shí)時(shí)熒光定量PCR???????????????????????
5、?．103．4Southern雜交檢測(cè)?????????????????????????114本研究的目的與意義????????????????????????????．1l第二章基因槍法介導(dǎo)仇MCJ『、GAFP和ThpI基因轉(zhuǎn)化小麥??????121材料與方法????????????????．：???????????????．121．1供試材料????????????????????????????．．121．2培養(yǎng)基?????????????????????????????。121．3質(zhì)粒的制備和純化??????????????????
6、???????131．3．1大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備??????????????????．131．3．2質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌???????????????????????131．3．3質(zhì)粒小量提取????????????????????????131．3．4質(zhì)粒大量提取????????????????????????．141．3．5質(zhì)粒EINA的純化??????????????????????．141．4剝?nèi)∮着????????????????????????????．．151．5基因槍轟擊及前期準(zhǔn)備??????????????????????
7、?151．5．1轟擊前幼胚的準(zhǔn)備??????????????????????151．5．2微彈(金粒)制備????????????????????????151．5．3微彈包被??????????????????????????．151．5．4基因槍轟擊?????????????????????????151．6植株再生?????????????????????????????161．7轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性植株的檢測(cè)???????????????????????161．7．1植物總DNA提取??????????????????????。161．7．2
8、PCR擴(kuò)增??????????????????????????????????。l61．7．2．1轉(zhuǎn)OsNACl基因To代PCR檢測(cè)陽(yáng)性植株?????????．．161．7．2．
