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《通過基因槍和農(nóng)桿菌介導(dǎo)用badh基因轉(zhuǎn)化小麥》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、nCT●ilglGUUUHAEBD咖LI-SIHIGli華北農(nóng)學(xué)報(bào)·2005，20(5)：1．9通過基因槍和農(nóng)桿菌介導(dǎo)用BADH基因轉(zhuǎn)化小麥RAZZAQAbdull’2，張艷敏1，趙和1，馬峙英2，郭北海1，王海波1(1．河北省農(nóng)林科學(xué)院遺傳生理研究所，河北石家莊050051；2．河北農(nóng)業(yè)大學(xué)，河北保定071001)摘要：土壤鹽堿是一種嚴(yán)重障礙作物生產(chǎn)的環(huán)境因子，甜菜堿醛脫氫酶BADH基因是一種重要的可賦予植物滲透調(diào)節(jié)抗性的基因。本研究用基因槍法及農(nóng)桿菌介導(dǎo)法向小麥幼胚和成熟胚愈傷組織導(dǎo)入了BADH基因。用PDS一1000／HE基因槍轟擊2933塊幼胚愈傷組織，
2、分化出了45株再生植株，分化率為1．53％。PCR分析表明，其中的5株為BADH基因轉(zhuǎn)化植株。用PFY涂抹其葉片，進(jìn)一步證實(shí)了PCR的結(jié)果。以小麥成熟胚愈傷組織為受體，用農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化1968塊愈傷，僅再生出了5株綠苗，PCR檢測結(jié)果均為陰性。但對其轉(zhuǎn)化愈傷組織的PCR檢測表明，外源基因已在受體細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)了整合。以幼胚愈傷組織為受體，用農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化2933塊愈傷，共再生出了21株綠苗。對其進(jìn)行PCR檢測，僅有5株為BADH基因轉(zhuǎn)化植株。轉(zhuǎn)化處理過的幼胚愈傷組織的綠苗再生率(0．72％)高于成熟胚愈傷(0．25％)。與對照相比，所有的轉(zhuǎn)化植株均能夠在0．5％Na
3、Cl(w／w)條件下正常生長，表明外源BADH基因已經(jīng)整合并表達(dá)。關(guān)鍵詞：遺傳轉(zhuǎn)化；小麥；農(nóng)桿菌；基因槍；BADH基因中圖分類號(hào)：$512．0l文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1000—7091(2005)05—0001—09TransformationofWheat耐thBADHThroughGeneGunandAgrobacteriumRAZZAQAbdull一，ZHANGYan．rainl，ZHAOHel，MAZhi—yin92，GUOBei—hail，WANGHai—b01(1．InstituteofGeneticsandPhysiology，HebeiAcad
4、emyofAgricultureandForestrySciences，Shijiazhuang050051，China；2．AgriculturalUniversityofHebei，Baoding071001，China)Abstract：Salinityisverysevereenvironmentalproblemhamperingcropproduction．BADHisanimportantgeneforconferringosmoticstresstolerancetoplants．InthisstudygenegunandAgrobacteriu
5、mwereemployedforthedeliveryofBADHintocallusofwheat．Bombardmentof2933ealliderivedfromimmatureembryosresultedinregenerationof45plant-letsafterselectiononphosphinothricin(P胛)withnetregenerationrateof1．53％．PCRanalysisconfirmedthepresenceofBADHgeneinfiveplants．ResultsofPPT-leafpaintingcon
6、formedtoPCRtest．IncaseofAgrobacteriumme—diatedtransformationfiveplant—letsregeneratedfrominoculationof1968calliderivedfrommatureembryosbutnonewasPCRpositive．PCRtestofcallifrommatureembryosexhibitedthesuccessfuldeliveryandintegrationoftransgene．Inocu—lationof2933eallifromimmatureembry
7、osresultedinregenerationof21plant-lets．PCRevaluationofregeneratedplant—letsindicatedthepresenceofBADHin5plantsonly．Netregenerationrateforimmatureembryos(0．72％)washi．gllerthanthatofmatureembryos(0．25％)．TransformedplantsobtainedthroughAgrobacteriumandgenegunwereabletothrivein0．5％NaCl(w
8、／w)withoutst
