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《側(cè)柏古樹抗衰老分子機理研究.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、側(cè)柏古樹抗衰老分子機理研究常二梅2012屆博士中國林業(yè)科學(xué)研究院萬方數(shù)據(jù)分類號S791密級公開UDC學(xué)位論文側(cè)柏古樹抗衰老分子機理研究StudyonMolecularMechanismsofResistingSenescenceinOldPlatycladusorientalis常二梅指導(dǎo)教師姓名江澤平研究員申請學(xué)位級別博士專業(yè)名稱生態(tài)學(xué)研究方向樹木地理論文提交日期2012年5月論文答辯日期2012年6月學(xué)位授予日期2012年7月答辯委員會主席評閱人北京·中國林業(yè)科學(xué)研究院萬方數(shù)據(jù)學(xué)位論文側(cè)柏古樹抗衰老分子機理研究學(xué)位論文作者常二梅指
2、導(dǎo)教師姓名江澤平研究員申請學(xué)位級別博士專業(yè)名稱生態(tài)學(xué)研究方向樹木地理論文答辯日期2012年6月中國·北京萬方數(shù)據(jù)萬方數(shù)據(jù)DissertationfortheDegreeStudyonMolecularMechanismsofResistingSenescenceinOldPlatycladusorientalisCandidate:ChangErmeiSupervisor:JiangZepingAcademicDegreeAppliedfor:Ph.DSpeciality:EcologyDateofDefence:June2012De
3、gree-Conferring-Institution:ChineseAcademyofForestry萬方數(shù)據(jù)萬方數(shù)據(jù)獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得本研究生培養(yǎng)單位或其它教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名：日期：年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解中國林業(yè)科學(xué)研究院
4、有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，中國林業(yè)科學(xué)研究院有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)中國林業(yè)科學(xué)研究院可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。（保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書）學(xué)位論文作者簽名：導(dǎo)師簽名：年月日年月日學(xué)位論文作者畢業(yè)聯(lián)系方式工作單位：聯(lián)系電話：電子郵件：通訊地址、郵編：萬方數(shù)據(jù).萬方數(shù)據(jù)摘要古樹壽命長達幾千年仍不見衰老，其生理與分子調(diào)控機制如何？成為近年來植物抗衰老研究領(lǐng)域的熱點之一；而活性氧（ROS
5、）的動態(tài)平衡被認為是影響植物衰老的主要因素之一。本文2010年以陜西黃帝陵樹齡為20yr和3000yr側(cè)柏（Platycladusorientalis）葉片為研究材料，在對ROS生成與清除機制研究的基礎(chǔ)上，通過Solexa高通量測序技術(shù)進行轉(zhuǎn)錄組和表達譜測序分析，發(fā)掘與樹齡相關(guān)的差異表達功能基因；并應(yīng)用實時定量qRT-PCR技術(shù)，集中研究ROS動態(tài)平衡相關(guān)基因在側(cè)柏幼苗受到NaCl、ABA脅迫時基因表達模式的變化情況，從而探討ROS清除機制在側(cè)柏抗衰老機制中的貢獻。主要結(jié)論如下：（1）通過對20yr和3000yr側(cè)柏H2O2和相關(guān)清除
6、系統(tǒng)研究表明，3000yr側(cè)柏葉片H2O2含量在生長季中高于20yr，而季末低于20yr；但3000yr側(cè)柏谷胱氨酸還原酶（GR）活性及谷胱甘肽（GSH）含量在季中明顯高于20yr側(cè)柏，而超氧化物歧化酶（SOD）活性及抗壞血酸（AsA）含量基本沒有變化；同樣，3000yr側(cè)柏在季末的ROS清除能力高于20yr。另外，研究還發(fā)現(xiàn)3000yr側(cè)柏種子萌發(fā)過程中仍具有較高的ROS清除能力。結(jié)果說明，3000yr側(cè)柏可通過較高水平的H2O2清除能力使細胞免受或減輕傷害，這可能是其抗衰老的主要生理機制之一。（2）采用Solexa測序技術(shù)對20y
7、r和3000yr側(cè)柏葉片進行轉(zhuǎn)錄組測序，總共進行了13,600,516次讀數(shù)，經(jīng)組裝得到363,885個Contig，68,219個獨立的Scaffold；進一步拼接后共獲得51,664個Unigene，平均長度為475bp。另外，通過對側(cè)柏葉片轉(zhuǎn)錄組中進行SSR位點的發(fā)掘，發(fā)現(xiàn)了含SSRs的序列703條，共742個SSRs，SSRs出現(xiàn)的頻率為1.36%。這些Unigene對側(cè)柏進行抗衰老研究提供了重要基因資源。（3）選擇10個側(cè)柏候選內(nèi)參基因，通過qRT-PCR分析其在不同樹齡、不同組織、不同脅迫（ABA、NaCl、PEG、冷、熱
8、脅迫）時基因表達變化，利用Ct值通過geNorm、NormFiner和BestKeeper軟件分析這些內(nèi)參基因的表達穩(wěn)定性。結(jié)果表明：UBC和aTUB在不同樹齡、不同組織、不同處理表達穩(wěn)定。I萬方數(shù)據(jù)（4）在轉(zhuǎn)錄組序列的
