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1、TheplantimmunesystemMAMPSorPAMPs:microbial-orpathogen-associatedmolecularpatternsPTI:PAMP-triggeredimmunityPRRs:patternrecognitionreceptorsETS:effector-triggeredsusceptibilityETI:effector-triggeredimmunityHR:hypersensitivecelldeathresponseAzigzagmodelillustratesthequantitativeoutputo
2、ftheplantimmunesystem.MAMPSorPAMPs:microbial-orpathogen-associatedmolecularpatternsPTI:PAMP-triggeredimmunityPRRs:patternrecognitionreceptorsETS:effector-triggeredsusceptibilityETI:effector-triggeredimmunityHR:hypersensitivecelldeathresponseAzigzagmodelillustratesthequantitativeoutpu
3、toftheplantimmunesystem.MAMPSorPAMPs:microbial-orpathogen-associatedmolecularpatternsPTI:PAMP-triggeredimmunityPRRs:patternrecognitionreceptorsETS:effector-triggeredsusceptibilityETI:effector-triggeredimmunityHR:hypersensitivecelldeathresponseAzigzagmodelillustratesthequantitativeout
4、putoftheplantimmunesystem.PlantimmunesystemactivationbypathogeneffectorsthatgeneratemodifiedselfmolecularpatternsCo-evolutionofhostRgenesandthepathogeneffectorcomplement1.圖位克隆法2.轉(zhuǎn)座子標(biāo)簽法3.同源序列法轉(zhuǎn)座子標(biāo)簽法技術(shù)克隆基因的主要步驟是:①采取農(nóng)桿菌介導(dǎo)等方法把轉(zhuǎn)座子導(dǎo)人目標(biāo)生物體;②轉(zhuǎn)座子在目標(biāo)生物體內(nèi)的初步定位;③轉(zhuǎn)座子插入突變的鑒定和分離;④利用一些帶轉(zhuǎn)座子及報(bào)告基因的重組質(zhì)粒
5、來檢測轉(zhuǎn)座子在目標(biāo)生物體內(nèi)的活動(dòng)性;⑤對(duì)轉(zhuǎn)座子插入引起的突變體,利用轉(zhuǎn)座子序列作探針,分離克隆目的基因。定位克隆技術(shù)是根據(jù)目標(biāo)基因在染色體上的位置進(jìn)行基因克隆的一種方法,目標(biāo)基因精確定位在染色體特定位置之后,用目標(biāo)基因兩側(cè)緊密連鎖的標(biāo)記篩選含有大的插入片段的基因組文庫(如BCA和YA)C,通過染色體步行(ChormosomeWalkign)篩選到含有目標(biāo)基因的克隆,最后通過遺傳轉(zhuǎn)化和功能互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。其核心任務(wù)是染色體步行,如果能找到與目標(biāo)基因很近的標(biāo)記,以至于二者之間的距離小于基因組文庫中克隆的平均插入片段大小,就可以直接篩選到含有目標(biāo)基因的克隆,最終得到
6、候選基因,這種策略稱為染色體登陸(ChromosomeLandign)。該方法的關(guān)鍵是需要高密度的分子標(biāo)記圖譜和找到與目標(biāo)基因緊密連鎖的分子標(biāo)記。