尿素測(cè)定方法.doc

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1、實(shí)驗(yàn)十七實(shí)驗(yàn)名稱：尿素的測(cè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求：掌握測(cè)定血清尿素的基本原理實(shí)驗(yàn)儀器、試劑：半自動(dòng)生化分析儀、尿素測(cè)定試劑盒實(shí)驗(yàn)原理：尿素經(jīng)脲酶水解生成NH3與CO2,在谷氨酸脫氫酶（GLDH）的作用下，氨與α-酮戊二酸及還原型輔酶Ⅰ（NADH）反應(yīng)生成谷氨酸和NAD+，NADH在340nm處的吸光度下降速率與待測(cè)樣品中尿素的含量成正比。操作方法：1、將試劑R1：R2=4：1混合，即為工作液2、按下列順序加入各試劑單位ml空白標(biāo)準(zhǔn)樣本蒸餾水0.01——樣本－－0.01標(biāo)準(zhǔn)液－0.01－工作液1.01.0

2、1.03、混勻各管，340nm,空白管調(diào)零，延時(shí)30秒，讀取初始吸光度A1，60秒后讀取A2，計(jì)算ΔA實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象與數(shù)據(jù)：記錄ΔA結(jié)果分析與結(jié)論：尿素＝ΔA樣/ΔA標(biāo)×C標(biāo)（8.32mmol/l）參考范圍：1.7-8.3mmol/l臨床意義：實(shí)驗(yàn)十八實(shí)驗(yàn)名稱：血清尿酸的測(cè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求：掌握尿酸酶-過氧化物酶耦聯(lián)法測(cè)定尿酸的基本原理實(shí)驗(yàn)儀器、試劑：尿酸測(cè)定試劑盒，722E/723分光光度計(jì)實(shí)驗(yàn)原理：尿酸酶氧化尿酸，生成尿囊素和過氧化氫，在過氧化物酶催化下，過氧化氫使ESBmT和4－氨基安替比林縮合成

3、有色化合物，其在546nm吸光度與尿酸濃度成正比。操作方法：按以下步驟操作單位ml標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定空白樣本－0.025－標(biāo)準(zhǔn)液0.025－－蒸餾水－－0.025酶試劑1.01.01.0混勻37℃溫浴5min，以空白管調(diào)零。546nm，0.5cm比色杯，測(cè)定各管的A實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象與數(shù)據(jù)：記錄各管的A結(jié)果分析與結(jié)論：血清尿酸濃度＝A樣/A標(biāo)×C標(biāo)（357μmol/l）參考值：男202－416μmol/L，女142-339μmol/L臨床意義：思考題：P223第2題