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《細胞培養(yǎng)常用緩沖液配置及保存.doc》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、細胞培養(yǎng)常用緩沖配制及保存（所需水全用合格的去離子水）1）Hank's液用途：用于保存標(biāo)木產(chǎn)品編號：HA2004丫產(chǎn)品規(guī)格：500ml價格：120.00配制：500ml(ddH2O)稱戢:NaCI??■?_?■????■?_????■?_?_????■?4gMgSO4.7H2OgNa2HPO4.12H2O...0.067gKH0P040.03qCaCL0.07g葡萄糖0.5g注意:A：在300-400ml水中依次溶解NaCKKCkMgSO4.7H2OxNa2HPO4.12H2O.KH2PO4s葡萄糖為A液。B：在約50
2、ml水中溶解CaCI_2為B液。C：將B液緩緩倒入A液屮，同時攪拌，為C液。D：在C液中加入1%酚紅1ml,混均,加水至500ml,該液即為Hank's液,此液偏酸。消毒：10磅10分種高壓消毒（消毒時壓力波動不能大，否則葡萄糖會沉淀出來，消毒完畢，須等冷卻方打開高壓鍋，以免液體沖出。）保存：4度。使用：在使用時加入5.6%NaHCO3調(diào)PH至7.2左右，然后加入10%（體枳/體積）青鏈霉素液。2）5.6%NaHCO3液；用途：調(diào)節(jié)溶液的PH值。配制：50ml稱最：NaHCO32.8g注意：在約40ml水中溶解NaHC
3、O3,再加水至50ml即可,NaHCO3溶解緩慢,故可適當(dāng)加熱。消毒：10磅10分鐘高壓消毒。保存：4度。3）1%酚紅液；用途：作溶液的指示劑。配制:100ml稱最：酚紅..19注意：A）在于1NNaOH2ml溶液中溶解酚紅；酚紅較為困難，所以在硏缽屮進行，不斷研磨至溶。B）待溶解后片刻，再加入1ml1NNaOHC）加水至100ml,配制完畢。消毒：加入其它溶液屮一起高壓滅菌。保存：4度。4）青/鏈霉索原液；產(chǎn)品編號：PS2004HY產(chǎn)品規(guī)格：100ml價格：130.00濃度：1萬單位青霉索、1萬單位鏈霉素或1Mg鏈霉
4、素/ml。配制："無菌操作*A）80ml水10磅10分鐘高壓滅菌。B）溶解80力單位的青鏈零索于80ml水屮。分裝：1?2mI小分裝。保存：-20度使用：按1%（體積/體積）加入溶液屮，終濃度1力單位青鏈霉素/ml5）L-谷氨酰胺液;產(chǎn)品編號：L2004HY產(chǎn)品規(guī)格：10ml價格：100.00濃度：30mg/ml配fliO：10ml稱量：L?■谷氨酰胺10ml消毒：100nm過濾除菌。保存：小分裝存于一20度使用：A）用時終濃度為0.3mg/mlB）具體用法：培養(yǎng)基《含血清》/L-谷氨酰胺=100ml/1ml注意：化凍
5、后混均。6）無CaMg離子PBS：產(chǎn)品編號：PB2004丫產(chǎn)品規(guī)格:500ml價格：120.00用途:A）配制EDTA、胰酶、膠原酶;B）沖洗組織和細胞;配制:500ml（ddH2O）、Ji；「:NI*4L*0?1gNa2HPO4.12H2O....1.445gKH2PO40.1g注意:在400ml水中依次溶解上述試劑；加入1%酚紅1ml,然后加水至500ml。消毒：10分鐘10磅高壓滅菌；保存：4度。7）胰蛋DiW/EDTA：使用：用時以5.6%NaCO3調(diào)pH至7.2左右，但用于配制胰酶、EDTA、膠原酶時，不調(diào)p
6、H。產(chǎn)品編號：TE2004Y產(chǎn)品規(guī)格：100ml價格：150.00用途：原代消化傳代消化消化丟棄細胞濃度：0.25%配制：100ml稱量：胰酹0.25g注意：用90ml無Ca、Mg離子PBS、溶解胰除再加該PBS至100ml（丿庚爾溶解較難，必要時在4度過夜以便溶解）。消毒：100nm過濾除菌。保存：小分裝于-20度保存。使用：用時調(diào)PH7.2左右，用5.6%NaCO3調(diào)。原代消化用0.25%濃度；傳代用0.25%胰陋與0.04%EDTA對半混合。8）EDTANa4鹽；產(chǎn)品編號：ED2004丫產(chǎn)品規(guī)格:100ml價格:
7、90.00濃度：0.1%配制：100ml；稱量：EDTANa—”0.04g注意：用90ml無Ca、Mg離子PBS溶解EDTAN%后加該PBS至100ml消毒：10磅10分鐘高壓滅菌。保存：小分裝于-20度保存。9）膠原酶;用途：用于原代消化細胞；濃度：0.1%；配制：100ml；稱最：膠原酶0.1g;注意：用90ml無Ca、Mg離子PBS（或HankS無血淸RPM1640）溶解膠原旃，后加液至100ml.消毒：100nm過濾除菌:保存：小分裝于度保存。10）干粉培養(yǎng)基配制；配制:500ml；（ddH2O）稱最：培養(yǎng)基粉
8、5g;注意：以水400ml溶解培養(yǎng)基粉，以NaHC03（粉劑）調(diào)PH至7左右，再加水至500ml。消毒：過濾除菌；保存：4度或-20度保存；（4度保存不超過30天：?20度保存不超過100天。）11）0.25%檸檬酸胰酹；產(chǎn)品編號：T2005HY產(chǎn)品規(guī)格：100ml價格：150.00用途：用于細胞傳代培養(yǎng)：配制:1000ml；不"
