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1、2015年9月化學(xué)研究534第26卷第5期CHEMICALRESEARCHhttp：／／hxya．cbpt．cnki．net巰基功能化磁性微球的構(gòu)建及其對蛋白質(zhì)的親和分離劉珊珊，鄒雪艷，郭靜玉，劉錦，陳丹云(1．河南大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院，河南開封475004；2．河南大學(xué)特種功能材料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河南開封475004)摘要：通過水熱法一步合成了納米Fe。0微球，并在甲苯中用巰基丙基三甲氧基硅烷(MPS)對其進(jìn)行表面修飾得到了Fe。0SH微球，通過DTNB法測得微球表面巰基含量為333．54g／mg．該納米微球可以吸附溶液中的N，從而形成Fe。0—SH—Ni復(fù)合材
2、料．以此復(fù)合材料為載體，可以將以組氨酸為標(biāo)簽的(Histagged)融合蛋白直接從細(xì)胞裂解液中進(jìn)行提純，并在外加磁場的作用下實(shí)現(xiàn)對目標(biāo)蛋白的快速分離，其對His—taggedTRX蛋白的分離能力為20．6／~g／mg，特別適合于對以組氨酸為標(biāo)簽蛋白的分離純化．關(guān)鍵詞：四氧化三鐵；巰基；組氨酸；蛋白質(zhì)分離；親和中圖分類號(hào)：061文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1008—1011(2O15)05—0534—06Constructionofthiol—functionalmagneticmicrospheresandaffinityseparationofprotein
3、IIUShanshan，Z0UXueyan，GUOJingyu，L1UJin，CHENDanyun(1．CollegeofChemistryandChemicalEngineering，HenanUniversity，Kaifeng475004，Henan，China2．KeyLaboratoryforSpecialFunctionalMaterials，HenanUniversity，Kaireng475004，Henan，China)Abstract：Ferriferrousoxidemagneticmicrospheres(MSs)wereprepa
4、redviasolvothermalroute．TheSO—obtainedMSsweremodifiedby(3-mereapto—propy1)trimethoxysilane(MPS)inmythylbenzenetogivebirthoftheferriferrousoxidewiththiolgroup(Fe304一SH)micro—spheres，whichcanabsorbNitoformFe3O4一SH—Ni．TheamountofthiolgroupofFe3O4一SHwastestedtobe333．54／,g／mgbymeansofD
5、TNBmethod．AfterchelatingNiions，F(xiàn)e3SH—NiMSswereusedtoenrichandpurifyhistidine—tagged(His—tagged)proteinsdirectlyfromthemixtureoflysedceilswithoutpretreatment．Moreover，thepreparedMSscansepa—ratethetargetproteinquicklyinthemagneticfield．IthasbeenfoundthatFe3O4一SH—Ni。MSspresentnegligi
6、blenonspecificproteinadsorptionandhighproteinbindingactivitywiththesat—urationcapacitybeing2O．6／~g／mgandtheyareespeciallysuitableforrapidpurificationofHis—taggedproteins．Keywords：Fe304；thiolgroup；His—tagged；proteinseparation；affinity蛋白質(zhì)的分離純化，特別是微量蛋白的純化，在淀、透析、超過濾和層析等，處理工藝比較復(fù)雜、費(fèi)時(shí)蛋白組
7、學(xué)領(lǐng)域是一個(gè)重要課題．傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)且成本較高．隨著生物學(xué)的發(fā)展，蛋白質(zhì)可以帶上的分離純化通常對目標(biāo)蛋白都具有較高的選擇某一標(biāo)簽進(jìn)行表達(dá)，從而使蛋白質(zhì)可以通過此標(biāo)簽性，然而這些方法都需要采用多步處理，如沉被特異性的分離純化]．在這些親和標(biāo)簽中，以六聚組氨酸為標(biāo)簽的(His—tagged)蛋白使用最為廣泛．收稿日期：2015一l一24．這些His—tagged蛋白很容易通過微生物細(xì)胞進(jìn)行基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金(21271062)，河南省教育廳科學(xué)技術(shù)重表達(dá)，從而使這些標(biāo)簽蛋白在其體內(nèi)大量產(chǎn)生．點(diǎn)研究項(xiàng)目(14B150003)．作者簡介：劉珊珊(1991一)
8、，女，碩士生，研究方向?yàn)閺?fù)合納米材料在這些His—tagged的蛋
