松果菊苷對(duì)TNFα誘導(dǎo)的SH2SY5Y細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用.pdf

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1、中國藥理學(xué)通報(bào)ChinesePharmacologicalBulletin2005Feb;21(2):169~74·169·松果菊苷對(duì)TNFα誘導(dǎo)的SH2SY5Y細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用11221鄧敏,趙金垣,屠鵬飛,姜永,陳靜(1.北京大學(xué)第三醫(yī)院職業(yè)病研究中心,北京100083;2.北京大學(xué)中藥現(xiàn)代化研究中心,北京100083)[2]中國圖書分類號(hào):R282171;R28411;R329125;R7301264常重要的作用,從而把減輕氧化應(yīng)激作為藥物作文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1001-1978(2005)02-

2、0169-06用的靶點(diǎn)之一,用于神經(jīng)保護(hù)藥物的篩選。摘要目的探討肉蓯蓉提取物松果菊苷對(duì)TNFα誘導(dǎo)的肉蓯蓉HerbaCistanches為肉蓯蓉屬植物干燥SH2SY5Y細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用。方法用MTT法檢測(cè)細(xì)胞帶鱗葉的肉質(zhì)莖,具有補(bǔ)腎陽、益精血、潤(rùn)腸通便之存活率,DNA瓊脂糖凝膠電泳和流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡功效,主治男子陽痿、女子不孕、血枯便秘等證,有的發(fā)生,以激光共聚焦顯微鏡熒光染色法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧[3,4]“沙漠人參”之美譽(yù)。一系列研究表明肉蓯蓉可的產(chǎn)生和線粒體膜電位的變化,并用熒光酶標(biāo)儀測(cè)定以提高多種

3、中樞神經(jīng)遞質(zhì)的含量,具有很強(qiáng)的抗氧-1caspase23的活性。結(jié)果100μg·LTNFα處理細(xì)胞36h化作用,還可延長(zhǎng)動(dòng)物壽命和抗衰老作用。苯乙醇顯著降低細(xì)胞的存活率;誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡,凋亡率達(dá)[5,6]苷類化合物被認(rèn)為是肉蓯蓉的主要活性成分。37%;細(xì)胞內(nèi)活性氧水平及caspase23的活性升高;而線粒體管花肉蓯蓉與肉蓯蓉比較,不但所含的苯乙醇苷等膜電位卻明顯降低,紅/綠熒光強(qiáng)度的比值由正常的5197降低為0135左右。而預(yù)先給予1,10或者100mg·L-1濃度化學(xué)成分相似,還有某些藥理作用在某種程度上

4、優(yōu)的松果菊苷處理細(xì)胞2h,可提高細(xì)胞存活率;并可有效抑制于肉蓯蓉,因此管花肉蓯蓉可作肉蓯蓉使用或兩者DNAladder的發(fā)生;流式細(xì)胞儀檢測(cè)凋亡率分別降低到混用。松果菊苷(echinacoside)是從管花肉蓯蓉2519%,1813%和812%;激光共聚焦顯微鏡結(jié)果顯示松果(Cistanchetubulosa)中分離、純化的一種苯乙醇苷類[7]菊苷可明顯抑制細(xì)胞內(nèi)活性氧產(chǎn)生;并可逐漸恢復(fù)線粒體的化合物(Fig1),為探討該成分是否可以抑制神經(jīng)高能量狀態(tài);caspase23的活性不斷降低,并呈現(xiàn)了一定的劑退行性

5、疾病的氧化應(yīng)激反應(yīng),拮抗神經(jīng)細(xì)胞的凋亡,量依賴性。結(jié)論松果菊苷能抑制TNFα誘導(dǎo)的SH2SY5Y本文以腫瘤壞死因子alpha(TNFα)誘導(dǎo)的細(xì)胞凋細(xì)胞凋亡,其神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用可能與降低細(xì)胞內(nèi)活性氧水亡為模型,研究松果菊苷對(duì)培養(yǎng)的SH2SY5Y神經(jīng)細(xì)平,抑制caspase23的活性和維持線粒體膜電位的高能狀態(tài)胞的保護(hù)作用及其可能機(jī)制。有關(guān)。關(guān)鍵詞:松果菊苷;細(xì)胞凋亡;TNFα;SH2SY5Y細(xì)胞;線粒體膜電位;活性氧;caspase23細(xì)胞凋亡是一種遺傳決定的自主性程序性細(xì)胞死亡,在維持體內(nèi)細(xì)胞穩(wěn)態(tài)和神經(jīng)系統(tǒng)

6、的發(fā)育過程Fig1Chemicalstructureofechinacoside中起重要作用。很多證據(jù)表明神經(jīng)元的凋亡涉及癲1材料與方法癇、腦血管病和一些神經(jīng)退行性疾病如阿爾采末病、1.1材料1.1.1試劑腫瘤壞死因子alpha(TNFα)、胰蛋帕金森病、肌萎縮性側(cè)索硬化癥及一氧化碳中毒遲白酶(trypsin)、42甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)為Sigma公發(fā)腦病等的發(fā)病機(jī)制,被認(rèn)為是這些疾病中神經(jīng)細(xì)[1]司產(chǎn)品;MEM培養(yǎng)基和胎牛血清為GIBCO公司產(chǎn)胞死亡的共同機(jī)制。近來研究發(fā)現(xiàn)氧化應(yīng)激和品;熒光標(biāo)記的鈣結(jié)合蛋

7、白(AnnexinV2FITC)和碘線粒體膜電位下降在神經(jīng)元的死亡過程中發(fā)揮了非化丙啶(propidumiodid,PI)為BoehringerMannheim收稿日期:2004-03-21,修回日期:2004-06-09產(chǎn)品;檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)自由基的熒光探針2′7′-二氯熒基金項(xiàng)目:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No30070651)光素乙酰乙酸鹽(2,72dichlorodihydrofluoresceindi2作者簡(jiǎn)介:鄧敏(1974-),女,博士生,E2mail:dengmindoctor@sina.aceta

8、te,H2DCFDA)和線粒體膜電位的熒光探針com;JC1為MolecularProbes公司產(chǎn)品;DNA提取和趙金垣(1942-),男,教授,博士生導(dǎo)師,研究方向:一氧化碳中毒遲發(fā)腦病的分子機(jī)制及肉蓯蓉的干預(yù)作用,Tel:caspase23檢測(cè)試劑盒為Promega公司產(chǎn)品;松果菊01026201769122651,Fax:010262017700,E2mail:drzhao2苷由北京大學(xué)藥學(xué)院

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