elisa法檢測丙型肝炎抗體的假陽性原因分析

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1、司眶

2、園啊

3、日2013年12月第11卷第36期·臨床研究·383ELISA法檢測丙型肝炎抗體的假陽性原因分析伊新奎(漯河市第三人民醫(yī)院檢驗科，河南漯河462000)【摘要】目的分析酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)在檢測丙型肝炎抗體(HCV-Ab)的過程中出現(xiàn)假陽性的原因，并找出一些解決辦法。方法對ELISA法檢出的HCV-Ab弱陽性血清標本做確證試驗，用核酸擴增熒光基因分析法測定其HVC—RNA，確定其假陽性率，分析引起假陽性的因素和尋找解決方法。結果80例ELISA法檢出的HcV-Ab弱陽性血清標本，經核酸擴增熒光基因分析法測定后有陽性64例，以核

4、酸擴增熒光基因分析法為準，ELISA法丙型肝炎抗體檢測假陽性率為2O％。存在】6例假陽性，假陽性率為2O％(16／8O)。兩種方法比較，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0．05)。結論ELISA檢測HCV抗體出現(xiàn)假陽性有許多影響因素，除了要盡量消除這些因素外，對于懷疑其為假陽性的血清標本要檢測丙型肝炎病毒RNA確診?！娟P鍵詞】酶聯(lián)免疫吸附試驗；核酸擴增熒光基因分析法；丙型肝炎抗體；假陽性中圖分類號：R446；R512．6+3文獻標識碼：B文章編號：1671—8194(2013)36-0383-01丙型肝炎是由HCV引起的傳染性疾病，目前診斷丙型肝炎的主要問

5、題，在檢驗過程中有很多因素可能導致檢測結果為假陽性。依據是檢測患者血清丙型肝炎抗體(HCV-Ab)。酶聯(lián)免疫吸附試驗ELISA法的原理是抗體與抗原的特異反應結合底物與酶的顏色反由于操作簡單且具有高特異性，被廣泛地應用在臨床檢~HCV-Ab。應來判斷結果的J。類風濕因子干擾、SOD的干擾、抗原不純、標本溶但是在應用ELISA法檢測丙型肝炎抗體時存在很多可能導致檢測結果血、被污染、貯存時間太長、凝固不全以及試劑盒抗原不純、洗板不徹是假陽性的影響因素。本次研究對ELISA法檢測出的HCV-Ab弱陽性底等諸多因素都有可能導致檢測結果呈假陽性。如果血清中有類

6、風濕因血清標本，用核酸擴增熒光基因分析法檢測其HCV-RNA，確證ELISA子那么它可能與固相IGG、酶標IGG結合，在檢測時出現(xiàn)假陽性。如果血法試驗復檢的結果，并分析了出現(xiàn)假陽性檢驗結果的影響因素并提供清標本中的SOD升高也可能會導致HCV-Ab檢測結果出現(xiàn)假陽性。而HCV了一些解決方法?；蚬こ炭乖患円踩菀壮霈F(xiàn)假陽性結果，尤其易出現(xiàn)弱陽性。1資料與方法在日常檢驗工作中檢驗人員～定要嚴格按照操作規(guī)程進行檢驗，1．1一般資料對懷疑其存在假陽性的血清標本要測定其HCV-RNA，確保檢驗的準8O例ELISA法檢出的HCV-Ab弱陽性血清標本均采1~2

7、010年3月至確度，避免出現(xiàn)假陽性結果。為避免假陽性的出現(xiàn)，檢驗人員應注2012年3月我院肝病科收治的患者。意：如果血清標本是凝固血，應現(xiàn)將標本自然放置1h，再離心分離1．2儀器和試劑15rain，如果血清標本是抗凝血，在采血后必須立即顛倒5次以上，存ELISA法試劑盒由上?？迫A提供，酶免儀和洗板機由北京普朗提放一段時間后，離心分離I5min【4J。及時將加樣后的加貼封片放入恒溫供。核酸擴增熒光基因分析法試劑盒由達安基因提供，采用DA一7600箱里。在加酶試劑的時候不要將水滴到孔外，如果滴到孔外，要及時核酸擴增實時熒光基因分析儀川。用吸水紙輕拭吸干

8、。洗板要徹底，保證洗板針通暢，將洗液注滿每一1．3檢測方法個孔，洗完后用吸水紙吸干。不要混用不同批號的試劑，加顯色劑采患者清晨空腹靜脈血3~5mL，將其離心分離血清，先用ELISA的時候注意不要流到孔外，在檢測前將試劑放置在室溫下30min。法檢測HCV-Ab(1～2h內)3次，對3次結果均為弱陽性的標本，用核綜上所述，影D~ELISA法檢測血清標本HCV-Ab~現(xiàn)假陽性的因素酸擴增熒光基因分析法檢測其HCV-RNA。除了試劑盒質量和儀器性能外，還有血清標本的處理和操作不當等也1．4數據處理會引起假陽性的出現(xiàn)。檢驗人員應該規(guī)范操作，盡量消除假陽性出

9、現(xiàn)采用SPSS11．O統(tǒng)計學軟件包對數據結果進行統(tǒng)計分析，當的影響因素，對于可疑的假陽性血清標本最好采用核酸擴增熒光基因P

10、驗醫(yī)學雜志，2006，29(7)：577—580．20％(16／80)。兩種方法比較，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0．05)。