酶聯法檢測丙型肝炎病毒抗體陽性分析

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1、酶聯法檢測丙型肝炎病毒抗體陽性分析【摘要】目的了解采用間接酶聯免疫法(ELISA)檢測丙型肝炎病毒抗體(抗HCV)的陽性情況。方法ELISA法進行抗HCV測定，篩選出陽性血清141份按S/CO和年齡分組,分別進行比較。結果1≤S/CO<3.8的例數占總陽性率的27.7%，S/CO≥3.8的例數占總陽性率的72.3%；20～49歲與50～80歲的例數分別占總陽性率的31%和69%，兩組存在明顯差別(P＜0.001)。結論采用間接ELISA法檢測抗HCV有一定的干擾因素，可導致陽性率偏高。臨床診斷時它只能作為一個篩查實驗，抗HCV陽性不能完全證明體內存在丙型肝炎病毒感染，

2、要做相關檢查慎重診斷，有條件時進行確認實驗才能確診?！娟P鍵詞】丙型肝炎病毒抗體間接酶聯免疫法目前丙型肝炎感染的免疫測定應用最廣泛的是間接酶聯免疫法(ELISA)檢測丙型肝炎病毒抗體(抗HCV)，影響ELISA測定抗體的因素是包被抗原的純度、機體內較高的IgG類抗體濃度和標本中含有超氧化物歧化酶(SOD)等，這些都易引起假陽性反應，現將我院臨床標本陽性情況報道如下。1對象與方法1.1觀察對象在我院通過常規(guī)篩檢實驗為抗HCV陽性標本共141例，其中男80例，女61例,年齡20～80歲。1.2儀器與試劑半自動酶標儀,洗板機,試劑由北京萬泰生物藥業(yè)有限公司。1.3統(tǒng)計方法采用SPSS軟

3、件行χ2檢驗。2結果2.1將141例抗HCV陽性樣本按S/CO值分組，1≤S/CO＜3.8者39例,占27.7%；S/CO≥3.8者102例，占72.3%。來自美國的研究表明間接ELISA法檢測抗HCV，S/CO≥3.8時才高度預示抗HCV呈陽性狀態(tài)，并建議對S/CO≥3.8的標本做確認實驗。2.2將抗HCV陽性樣本按年齡分組，年齡50～80歲組的抗HCV陽性患者98例，占總陽性百分率的69.5%，而20～49歲以下年齡組的抗HCV陽性患者43例，僅占總陽性率的30.5%，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.001)。3討論抗HCV是目前臨床診斷丙型肝炎感染的常用指標，

4、主要用于檢測急、慢性或既往丙型肝炎病毒感染和測定獻血員存在感染的可能性。我國丙型肝炎感染率僅次于乙型肝炎。患急性丙型肝炎后約有55%～85%的患者可變成慢性丙型肝炎，其中5%～20%的患者20～25年后可發(fā)展為肝硬化，肝硬化患者10年內30%發(fā)展為終末期肝病。丙型肝炎自然轉陰率低，治療效果差，病程遷延，且與肝硬化、肝癌等的發(fā)生及發(fā)展顯著相關［1］。ELISA間接法檢測抗HCV仍是目前常用的手段,由于存在一定的影響因素會導致抗HCV出現假陽性,尤其是弱陽性?？躬睭CV出現假陽性的主要原因是：①類風濕因子(RF)的干擾，RF可大量存在于類風濕性關節(jié)炎及某些患有自身免疫性疾病患者的體

5、內，RF多為IgG，它有與變性IgG產生非特異結合的特點。因此在抗HCV測定中，如血清標本中存在RF，則其可以與固相上的IgG和酶標的IgG結合,而出現假陽性反應。②高免疫球蛋白血癥，抗HCV的間接法最后一步加的是酶標的抗人IgG,血清中的高濃度的非特異IgG可能會致非特異地吸附于固相表面,從而與后加的酶標抗人IgG結合,造成假陽性。③標本中SOD的干擾。用于包被固相的重組HCV抗原片段C100如為酵母菌產生的SOD融合蛋白,則標本中的SOD升高可能會造成抗HCV假陽性結果。④用于固相包被的HCV基因工程抗原不純［2］。另外，篩查實驗S/CO比值能預測補充實驗結果：許多早期

6、研究顯示，HCV抗體ELISA篩查弱陽性的結果，進一步實驗及臨床證實為陰性。據美國一些血站提供給美國疾病與控制中心(CDC)的資料明確顯示，篩查實驗S/CO比值能用來預測補充實驗結果；用美國FDA批準的兩家ELISA試劑進行篩查實驗，當S/CO≥3.8時，高度預示HCV抗體呈陽性狀態(tài)。2000年美國的研究資料對HCV抗體篩查弱陽性結果的常規(guī)確認實驗，發(fā)現對抗體弱陽性樣本進行確認實驗，其中86%～88%為陰性。也對HCV抗體篩查陽性的樣本進行RIBA確認實驗，他們觀察了1000例結果(來自7.5%血清陽性預期值的人群)，其中75例ELISA陽性，75例中有65例S/CO比值≥3.8，

7、64例重組免疫印跡實驗(RIBA)陽性，占98.5%；75例中有10例S/CO比值＜3.8，3例RIBA陽性。目前美國已經采用了CDC的新導則，現在僅對篩查試驗S/CO比值≥3.8的樣本做RIBA補充實驗，這樣既節(jié)約了大量資金，又使檢驗結果更加可靠。篩查實驗S/CO比值的應用能增加確認實驗的價值，提高目前試驗的準確性［3］。因此本資料統(tǒng)計抗HCV的S/CO＜3.8的陽性人群中大部分可能存在假陽性結果；另一方面通過對臨床觀察:50歲以上抗HCV陽性患者在總陽性中占有