螺旋藻c-藻藍蛋白亞基分離及抗腫瘤活性研究

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1、浙江大學學報(理學版)第37卷第3期JournalofZhejiangUniversity(ScienceEdition)http://www.journals.zjn.edu.cn/sciVoM1.37No.32010年5月ay2010DOI:10.3785/j.issn.1008—9497.2010.03.016螺旋藻C一藻藍蛋白亞基分離及抗腫瘤活性研究張昕,酈劍勇,龔興國(浙江大學生命科學學院,生物化學研究所,浙江杭州310058)摘要:為解決C藻藍蛋白分子較大,難以直接與細胞發(fā)生作用的問題

2、,對藻藍蛋白亞基的分離純化方法進行研究,并初步探討了其對腫瘤細胞的抑制作用.對通過熱變性、鹽析和自制的羥基磷灰石吸附層析,從鈍頂螺旋藻中獲得高純度的藻藍蛋白(C—PC,A/A。>4.5).C—PC用8mo卜I_。的尿素溶液變性,過CM—SepharoseF.F.陽離子交換層析、透析、復性,獲得具活性的C~PC亞基.用CCK一8試劑盒分別研究了C—PC、d和B亞基對一個肺腺癌細胞株SPCA1的生長的影響,結果表明藻藍蛋白及其亞基對該細胞株的生長具有抑制作用,0亞基效果最好,預示著它們具有一定的抗腫瘤

3、潛力.關鍵詞:柱層析;復性;亞基;肺腺癌細胞株SPC—A一1;生長抑制作用中圖分類號:Q5l文獻標志碼:A文章編號:1008—9497(2010)03—3l9一O5ZHANGXin,IdJian—yong,GONGXing—guo(InstituteofBiochemistry,CollegeoJ’lifeSciences,ZhejiangUni—versity,Hangzhou310058,China)IsolationofC—PCsubuni~fromspirulinaplatensisand

4、inhibitoryeffectonSPC。A‘1cellline.JournalofZhejiangUniversity(ScienceEdition),2010,37(3):319—323Abstract:InordertosolvethedifficultyofinteractionbetweenC—phycocyanin(C—PC)andcells,themethodsofisolatingandpurifyingCPCsubunitswereinvestigatedandtheantit

5、umoreffectsofthemontheSPC—A1cellswerestudiedalso.AhighefficiencyandrelativelyconvenientpurificationsystemwithtWO—stepself—composedHAchromatogramwasdevisedintheresearch,andobtainedpureC—PCwithOD62。/OD280Of4.5.AfterdenaturingthepurifiedC—PCbysodiumaceta

6、tebuffercontaining8tool·Lurea,thesubunitswereisolatedbycationexchangechromatographybyusingCMsepharoseF.F,thenthesubunitswererenaturedseparately.Bothofthetwosubunitshadstrongfluorescenceactivity.Theanti—tumoreffectofhighlypurifiedC—PC、aand8subunitwaste

7、stedongrowthandmultiplicationofhumanlungadenocarcinomacell1ine(SPCA一1).TheresultsindicatedthattheBsubunitofCPCwasthepotentestanti—cancerfragmentunderthesameconcentrationconditioninvitro.KeyWords:chromatography;renature;activity;inhibitoryeffect;subuni

8、ts藻藍蛋白是藍藻、紅藻等藻類的主要集光分子,近年來,國外有大量文獻報道了藻藍蛋白的抗傳光效率極高l1.大量研究表明,藻藍蛋白具有抗腫瘤活性,以及藻藍蛋白誘發(fā)細胞調(diào)亡的原理_5],引氧化j、清除自由基]、抗炎癥、抗腫瘤Ⅲ4等作用,起了國內(nèi)外廣泛的興趣.但是,對藻藍蛋白亞基的分能有效預防和治療多種疾?。逅{蛋白已廣泛應用離少見報道.本文運用熱變性的方法,從鈍頂螺旋藻于食品、化妝品、醫(yī)藥等領域.根據(jù)其來源不同,可將中分離出C一藻藍蛋白,研究獲得組成其的兩個亞基藻藍蛋白分為C一藻藍蛋白(

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