提高冷凍切片制片質(zhì)量的方法探討

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1、第19卷第4期中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志Vol_19．No．42010年O8月CHINESEJOURNALOFHISTOCHEMISTRYANDCYT0CHEMISTRYAugust．2010提高冷凍切片制片質(zhì)量的方法探討田玉旺李琳朱紅艷邢宜苗金紅(北京軍區(qū)總醫(yī)院病理科，北京100700)(關(guān)鍵詞]冷凍切片；質(zhì)量；探討[中圖分類(lèi)號(hào)]R361．2[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A術(shù)中冷凍切片診斷是病理科的急診工作，其重慢，依賴(lài)于溫度、組織的大小及厚薄，取材大小一要性和責(zé)任性都很大。其中冷凍切片質(zhì)量的好壞至般為1．5×1．5×0．3cm為宜。取材時(shí)，盡量避開(kāi)關(guān)重要

2、，它是許多病理技術(shù)人員一直探討的問(wèn)題。組織壞死出血區(qū)，要盡量剔除脂肪、毛發(fā)、骨及鈣本文對(duì)影響制片質(zhì)量的各種因素及環(huán)節(jié)進(jìn)行了分析，化物；取材時(shí)注意干燥，取材工具盡量不要接觸并提出了可行的防范措施，使制片質(zhì)量明顯提高。水，囊性組織內(nèi)有很多液體，取材時(shí)不要用水沖洗；若組織標(biāo)本表面附著大量粘液或血液需用紙巾材料和方法擦拭干凈，不能用水沖洗。取材用的刀剪應(yīng)當(dāng)鋒1．標(biāo)本選取我院手術(shù)中的各種活體組織標(biāo)本。利，取材時(shí)避免刀來(lái)回挫動(dòng)擠壓組織。2．儀器德國(guó)徠佧一1900型冷凍切片機(jī)。另外，術(shù)中組織送檢要及時(shí)，以保證標(biāo)本新3．方法冷凍切片方法和染色方法基本同常鮮。

3、冷凍切片標(biāo)本不要浸入酒精、生理鹽水和甲醛規(guī)，切片厚5／,m。液內(nèi)；需要術(shù)中進(jìn)行快速病理診斷的活檢組織，最好用一次性塑料或乳膠手套盛放，切忌用干紗布、結(jié)果和討論衛(wèi)生紙或干棉花包裹組織，以免紗布等上面的線(xiàn)毛粘在組織上，不利于制片，且易損傷刀刃。在整個(gè)制片過(guò)程中注意文中所述細(xì)節(jié)后，制片質(zhì)量明顯提高，組織結(jié)構(gòu)清晰，核漿染色鮮艷，組3．冷凍條件的設(shè)置織內(nèi)冰晶明顯減少。冷凍切片是借助在低溫的條件下，使組織迅速影響冷凍制片質(zhì)量的因素較多，我們經(jīng)大量實(shí)凍結(jié)達(dá)到一定硬度進(jìn)行切片的一種方法。一般工作驗(yàn)及實(shí)際應(yīng)用，認(rèn)為在整個(gè)制片過(guò)程中應(yīng)注意以下時(shí)間內(nèi)，箱體的溫度設(shè)

4、在一20℃左右，非工作時(shí)間設(shè)在一l5℃左右較好。由于各種組織的結(jié)構(gòu)不同，細(xì)節(jié)。1．做好前期準(zhǔn)備工作適宜的切片條件也有所不同。控制好冷凍組織的溫1．1日常工作中，儀器要定期進(jìn)行擦拭、除度和冷凍時(shí)間是制作優(yōu)質(zhì)切片的關(guān)鍵。霜、清潔消毒等，使冷凍切片機(jī)始終處于良好的運(yùn)3．1肝臟、脾、腦、腎臟、甲狀腺組織、淋巴行狀態(tài)。結(jié)等細(xì)胞較豐富，纖維組織較少的標(biāo)本，冷凍室溫1．2切片刀要定期進(jìn)行更換，調(diào)整好切片刀的度一般控制在一16℃～一18℃左右，冷凍時(shí)間應(yīng)當(dāng)縮角度，刀頭刀架不要松動(dòng)，不同的組織可使用不同短，否則組織變脆、易碎，鏡下形成裂隙，破壞了刀片，一般組織

5、選用R一35型，較硬的組織，如宮組織結(jié)構(gòu)，影響診斷。冷凍時(shí)間控制在lmin左頸組織、子宮肌瘤等，使用A一35型較好。防卷板右，且適當(dāng)切薄。調(diào)整到最佳位置，防卷板要注意清潔，避免切片污3．2對(duì)于質(zhì)韌、硬的宮頸組織、子宮肌瘤等纖染和切片出現(xiàn)皺褶。在切片過(guò)程中，盡量不要隨意維多的組織，冷凍室溫度一般為一l9℃～一22℃之調(diào)整切片刀的角度和防卷板的位置，以免延長(zhǎng)制片間，冷凍時(shí)間也不宜過(guò)長(zhǎng)，控制在2min左右較好，過(guò)長(zhǎng)會(huì)使組織變硬，不僅損刀而且組織片會(huì)出時(shí)問(wèn)。1．3試劑及染液要定期進(jìn)行更換，以保證染色現(xiàn)裂痕、厚薄不均或呈簾狀，染色時(shí)易脫片。切片質(zhì)量。時(shí)

6、，速度可相對(duì)慢一些。2．取材方面3．3含脂肪的乳腺組織，冷凍室的溫度一般控標(biāo)本取材大小要合適，因?yàn)榻M織冷凍速度的快制在一25℃～一3o℃左右；脂肪瘤等多脂肪的組織冷凍室的溫度在一35℃以下，冷凍時(shí)間要適當(dāng)延長(zhǎng)，一般5min左右。脂肪含量多的組織標(biāo)本，由于脂[收稿日期]2009—1220[修回日期]2010—03—10肪組織冰點(diǎn)低，只有低于一40℃才能凍硬，單壓縮[作者簡(jiǎn)介]田玉旺，男(1962年)，漢族，主任技師。機(jī)的冷凍切片機(jī)達(dá)不到其冷凍溫度，因此不易制第4期田玉旺等．提高冷凍切片制片質(zhì)量的方法探討409片。雙壓縮機(jī)的冷凍切片機(jī)機(jī)頭溫度可在

7、2—3min對(duì)于活檢小組織冷凍時(shí)間相對(duì)短一些，以肉眼內(nèi)降到一5O℃，把冷凍托夾在機(jī)頭的樣本夾上，待觀察周?chē)l(fā)白時(shí)及時(shí)修整，避免組織過(guò)脆，切片脂肪組織凍硬后即可切出完整切片。另一種方法時(shí)速度可相對(duì)慢且要?jiǎng)蛩偾衅?，過(guò)快會(huì)出現(xiàn)跳刀現(xiàn)是：將脂肪組織放人液氮速凍后，利于切片。切片象。時(shí)進(jìn)刀要快，否則切片粘連。特殊組織如淋巴結(jié)，觀察組織上部有一小點(diǎn)未3．4卵巢、肺、膽囊、胃壁、腸壁、胰腺等軟完全凍凝時(shí)快速進(jìn)行切片。組織，冷凍室的溫度控制在一2O℃～一22℃左右，冷質(zhì)地較硬的組織，如子宮肌瘤、宮頸組織等，凍時(shí)間2min。以肉眼待冷凍組織中央反光區(qū)尚存光澤

8、時(shí)為最佳切3．5睪丸、膀胱組織，冷凍室溫度一18℃～一片時(shí)機(jī)。由于宮頸組織結(jié)構(gòu)較致密，對(duì)冷凍的時(shí)問(wèn)20℃，冷凍時(shí)間2min左右。及溫度較敏感，組織易冷凍過(guò)度，組織切