冷凍切片操作方法探討.pdf

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1、·1144·臨床與實驗病理學雜志JClinExpPathol2013Oct;29(10)冷凍切片操作方法探討張同海，黃文斌關鍵詞:冷凍切片;標本;溫度中圖分類號:Ｒ329-33文獻標志碼:B文章編號:1001－7399(2013)10－1144－02在病理科工作中，快速冷凍切片是病理工作中一項重要且有難度的工作。病理醫(yī)師需在較短的時間內(nèi)發(fā)出病理報告，對切片的要求較高，不容許有差錯。本文就針對冷凍切片的制作方法在實際應用中的體驗做一些探討。1材料與方法①②1．1材料全部實驗材料均由本院臨床科室提供，共100圖1采用正確的方法制備冷凍切片:組織結構清晰，細胞形態(tài)完整例，

2、其中包括各系統(tǒng)組織，如乳腺、甲狀腺、胃、腦、淋巴結組圖2與圖1同一組織，方法操作不當制備的切片:組織間出現(xiàn)裂織等。使用LEICACM1900冷凍切片機切片。隙，組織結構模糊1．2方法所用標本共分為以下幾類:(1)含有較多脂肪組織的標本。(2)不含或者只含少許脂肪組織，組織結構較科雖有《臨床技術操作規(guī)范》為指導，但各家醫(yī)院執(zhí)行力度疏松的標本，如甲狀腺、腦、卵巢、淋巴結等。(3)含纖維組不一，仍有依據(jù)操作者經(jīng)驗進行操作的現(xiàn)象發(fā)生。織較多，組織結構較致密的標本，如子宮、乳腺等。將上述標取材標本最好是新鮮的標本。但是，有時因其他原因，本根據(jù)要求取材，組織直徑約1.5cm，厚

3、0.2～0.3cm，立即［1］如為了保存組織內(nèi)的抗原，組織事先必須用固定液固定。放入冷凍切片機。第一類標本冷凍時溫度盡量調(diào)低，直至切對于已固定標本，在冷凍前可用流水沖洗固定液，然后再用出滿意的切片為止。第二類標本，冷凍溫度調(diào)至－21～－19吸水紙盡量吸干凈。如標本用乙醇固定，盡量用流水洗凈，℃時切片。第三類標本溫度調(diào)至－24～－21℃時切片。組［2］因為乙醇會抑制組織冷凍，使組織冷凍效果不佳?？椙衅蠼?jīng)乙醚乙醇固定0．5min后，行HE染色3～4min，所取組織塊厚度合適，不能超過0.3cm，因為組織越切片即可完成。［2］厚，冷凍所需時間越長，而且易形成冰晶體。尤其

4、是對含水分較多的腦組織，切取組織應更薄些，使其速凍，避免冰晶2結果的形成。組織塊的直徑不能太大，否則切片容易卷曲。組織對于不同樣的組織標本，取材的大小、方法、組織冷凍的塊也不宜太薄，以免影響冷凍組織隨后的常規(guī)制片。溫度、時間、切片時采用的方法不同，可造成切片質量完全不［3］切取的切片可用乙醚乙醇固定，因為乙醚乙醇可使組一樣，采用正確的方法制作的切片，鏡下觀察組織形態(tài)結構織內(nèi)的蛋白質快速沉淀，可防止組織掉片和細胞變形。固定完整、細胞染色清晰、細胞形態(tài)與常規(guī)切片差異不大(圖1)，后，即可入蘇木精中染色，但在蘇木精中染色時不可像快速完全滿足診斷需要。若操作不當，可引起細胞

5、腫脹、收縮、組石蠟切片那樣用酒精燈加熱，防止組織變形。經(jīng)蘇木精染2織間裂隙、結構不清等人為假象(圖2)?！?min即可，因為組織是新鮮未固定標本，著色較快、較深，因此冷凍快速切片染蘇木精時間要比石蠟切片短一些，以防3討論染色過深。病理快速制片技術可分為石蠟加快和冷凍快速。冷凍脂肪組織的冷凍切片是個難題，脂肪組織切片時需注意切片因其方便快捷的優(yōu)勢，越來越被廣泛使用。若操作不如下操作:(1)脂肪組織冷凍時溫度須極低時才能切片，但當，也會給診斷帶來風險。作者認為只要操作過程中各方法對在同一冷凍頭上的非脂肪組織，低溫又造成切片不滿意，正確，注意其中的關鍵步驟，能夠避免不良問

6、題。目前，病理所以在切片時盡量去除組織上的多余脂肪組織，如取淋巴結時盡量去除淋巴結周邊的組織。(2)對于含有脂肪的組織，收稿日期:2013－04－02要盡可能避免脂肪早接觸刀片，因為切片時可能會使連著脂作者單位:南京醫(yī)科大學附屬南京市第一醫(yī)院病理科，南京210006肪的包埋劑被切掉，影響非脂肪組織的切片，而且脂肪組織作者簡介:張同海，男，主管技師。Tel:(025)52887053，E-mail:tong-會污染切片機臺面。(3)防卷板及刀片必須清潔，如果有脂haizhang@aliyun．com肪組織污染必須及時用紗布清除，如果發(fā)現(xiàn)組織上出現(xiàn)條紋臨床與實驗病理學雜

7、志JClinExpPathol2013Oct;29(10)·1145·冷凍組織包埋劑在漿膜腔積液細胞塊制作中應用1211111程新宇，吳璠，孫虓，金丹，白陽，王星，王翠芳關鍵詞:冷凍組織包埋劑;漿膜腔積液;細胞塊2012～2013年各臨床科室送檢的漿膜腔積液。中圖分類號:Ｒ361+．3文獻標志碼:B1．1．2儀器中佳SC-3612低速離心機，Leica-Asp300s全文章編號:1001－7399(2013)10－1145－03自動脫水機，Leica-HM315Ｒ石蠟切片機，Leica-G-1140H(C)石蠟包埋機，微型震蕩儀，VENTANA-BenchMar