阜豆GmABC基因的克隆及表達(dá)分析-論文.pdf

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1、西北植物學(xué)報(bào),2012,32(9):1726—1730AetaBot.Borea1.-Occident.Sin.文章編號(hào):1000—4025(2012)09—1726—05阜豆GmABC基因的克隆及表達(dá)分析趙胡(阜陽(yáng)師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院,安徽阜陽(yáng)236041)摘要:利用RACE技術(shù)從大豆品種‘阜豆l1號(hào)’中克隆到1個(gè)ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因,該基因cDNA全長(zhǎng)為4693bp,其中開(kāi)放讀碼框4341bp,編碼1447個(gè)氨基酸,分子量162.5kD,具有高度保守的ATP結(jié)合位點(diǎn),命名為GmABC。蛋白序列比對(duì)結(jié)果顯示,該基因編碼蛋白屬于PDR(pleiotropicdrugresistance

2、)多向耐藥性蛋白家族成員。系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析顯示,GmABC與苜蓿PDR親緣關(guān)系最近,相似性達(dá)84?;虮磉_(dá)分析顯示,GmABC受鎘誘導(dǎo)表達(dá),當(dāng)Cd濃度達(dá)到100mg·L時(shí),其表達(dá)量最高。研究表明,GmABC可能對(duì)阜豆鎘脅迫抗性發(fā)揮重要作用。關(guān)鍵詞:阜豆;ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白;基因克?。槐磉_(dá)分析中國(guó)分類(lèi)號(hào):Q785文獻(xiàn)標(biāo)志碼:AIsolationandExpressionPatternAnalysisofGmABCfromFuyangSoybeanZHAOHu(CollegeofLifeScience,F(xiàn)uyangTeachersCollege,F(xiàn)uyang,Anhui236041,China

3、)Abstract:Inthisstudy,amemberofABCtransportergenenamedGmABC,wasisolatedfromFuyangsoy—bean(FuyangGlycinemaxN0.11)usingRACE(rapidamplificationofeDNAends)method.ThefulllengthofeDNAwas4693bpwitha4341bpopenreadingframe(ORF)whichencodedapeptideof1447aminoacidsandcontainingthehighlyconservedATPbinding

4、sitemodules,andthepredictedproteinmo一1ecularmasswas162.5kD.Theproteinsequencealignmentshowedthatthisgeneencodedaproteinbe—longingtothePDR(pleiotropicdrugresistance)familyofABCproteins.ThephylogeneticanalysisshowedthatGmABChasthehighestsimilaritywithPDRfromMedicagotruncatula,whichshared84homolog

5、ywithMedicagotruncatulaintheaminoacidsequence.ExpressionanalysisindicatedthatGmABCgenewasinducedbyCd,expressionlevelofGmABCgenewasthehighestatCdconcentrationof100mg·I.TheresultssuggestedthatGmABCmayplayanimportantroleinCdstressresistanceofFuyangsoybean.Keywords:Fuyangsoybean;ABCtransporter;gene

6、isolation;expressionanalysis鎘是環(huán)境中主要的重金屬污染物之一,但它不是鎘對(duì)植物的傷害是多方面的,相應(yīng)地植物采取多植物生長(zhǎng)發(fā)育所必需的元素,不參與生物的結(jié)構(gòu)和代方面的策略來(lái)抵抗或減弱Cd抖脅迫的程度,如合成謝活動(dòng),易被植物吸收。過(guò)量積累對(duì)植物具有明顯的植物螯合肽、金屬硫蛋白、應(yīng)激蛋白、應(yīng)激乙烯及固定毒害作用,在形態(tài)上主要表現(xiàn)為根、莖生長(zhǎng)遲緩和葉化、區(qū)域化、抗氧化等I4]。同時(shí)多種質(zhì)膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和片失綠、卷曲;生理生化方面多表現(xiàn)為光合作用和蒸液泡膜重金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(如HMT、p-型質(zhì)子泵、CDF、騰作用受到抑制,引起氧化脅迫和膜的損傷_】。]。Nramp和ZIP家

7、族的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)將Cd抖外排或隔離收稿日期:2012—02—28;修改稿收到日期:201207—23基金項(xiàng)目:安徽省教育廳自然科學(xué)基金項(xiàng)目(KJ2011B122)作者簡(jiǎn)介:趙胡(1977-),男,在讀博士研究生,主要從事植物細(xì)胞與分子生物學(xué)研究。E-mail:zhaohu8196@sina.corn9期趙胡:阜豆GrnABC基因的克隆及表達(dá)分析在液泡內(nèi),減輕了Cd。。對(duì)植物細(xì)胞的毒性l_8。。DH5a為本實(shí)驗(yàn)室保存,其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。近年來(lái),在眾多的生

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