苧麻根總黃酮超聲提取工藝研究.pdf

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1、湖北中醫(yī)雜志2014年O8月第36卷第08期HubeiJournalofTCMNO2014．Vof．36．Ⅳ0．08一67一·中藥研究·苧麻根總J黃臾酮日I超聲提取工藝研究吳尚敏(湖北省黃岡市黃州區(qū)腦血管病醫(yī)院，湖北黃岡438000)關(guān)鍵詞：苧麻根；黃酮；超聲提取；正交實驗中圖分類號：R284．2文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1000—0704(2014)08—0067—03苧麻BoehmeNan∞(Linn．)原產(chǎn)中國，屬于蕁麻科苧麻屬分別準(zhǔn)確吸取該標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0．5、1．0、1．5、2．0、2．5、3．0mL于植物。李時珍在著名的醫(yī)學(xué)著作《本草綱目

2、》中，對苧麻，特別是10mL容量瓶中，加70％乙醇定容至5mL，加5％亞硝酸鈉溶液苧麻根的藥用功能作了詳細(xì)的記載和闡述?；在我國臺灣被用0．3mL，搖勻靜置6min后，加10％硝酸鋁溶液0．3mL，搖勻后靜作利尿劑、退燒藥和護肝藥物。苧麻根具有廣泛的生物活置6min，再加1mol／L氫氧化鈉溶液2mL，混勻，70％乙醇定容至性，Huang和Chang等研究表明引，苧麻根萃取物在體外10mL，靜置30min，在500nm下測定其吸光度。以蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品的HepG22．2．15細(xì)胞中和乙肝病毒血癥SCID鼠體內(nèi)均能抑制乙濃度X(mg／mL)為橫坐標(biāo)，以吸

3、光度值Y為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲肝病毒活性和產(chǎn)生。“n等研究表明J，苧麻根粗提物具有清除線，回歸方程Y=14．339x+0．015，并求相關(guān)系數(shù)r=0．9997，線性自由基、抗FeCL2一抗壞血酸誘發(fā)的脂質(zhì)過氧化等多種生理作范圍：0．005—0．03ms／mL。用。2．2超聲提取法單因素實驗本研究以苧麻根為原料，對苧麻根中總黃酮的超聲提取工(1)提取溶劑濃度對苧麻根總黃酮提取率的影響藝進(jìn)行研究，采用單因素實驗和正交實驗對超聲提取工藝參數(shù)準(zhǔn)確稱取1g干燥苧麻根粉(8O目)5份，分別加入20mL蒸進(jìn)行了優(yōu)化。餾水、30％乙醇溶液、50％乙醇溶液、70％乙

4、醇溶液、90％乙醇溶1儀器與試藥液，置于超聲提取器(功率600W)中超聲處理8rain，用布式漏斗1．1藥材抽濾，取濾液備用，將濾液離心5min，離心速率4000rad／s，取出上苧麻根，采自湖北成寧，采后洗凈在40℃烘箱中烘干至恒清液，定容至50mL，作為供試品。按標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行顯色后測試重。將干燥的苧麻麻根粉碎后，過80目篩備用。并計算提取率。1．2主要試劑與儀器(2)提取時間對苧麻根總黃酮提取率的影響主要實驗試劑：蘆丁對照品購于中國藥品生物制品檢定所，稱取1g干燥苧麻根粉(80目)5份，各加入20mL50％乙醇溶亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、

5、無水乙醇、三氯化鐵、醋酐、濃硫液置于超聲提取器(功率600W)中分別超聲處理2rain、4rain、酸、鹽酸鎂、醋酸鉛、醋酸鎂、鋅粉、三氯化鋁、濃氨水、鹽酸、碘化6min、8rain、10min，用布式漏斗抽濾，取濾液備用，將濾液離心秘鉀、氯仿、冰醋酸均購自上海實驗試劑有限公司。5rain離心速率為4000rad／s，取出上清液，定容至50mL，作為供主要儀器：電子分析天平(CPA225D，Sartofius)，紫外可見分試品。按標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行顯色后測試并計算提取率。光光度計(UV一1201，北京瑞利公司)，超聲波清洗器(sB一(3)提取劑用量對

6、苧麻根總黃酮提取率的影響120D，寧波新蘆生物科技股份有限公司)，真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(RE稱取1g干燥苧麻根粉(8O目)5份，分別加入5mL、10mL、一52A，上海亞榮生化儀器廠)。15mL、20mL、25mL50％乙醇溶液(提取劑用量分別為5倍、1O倍、2方法與結(jié)果15倍、2O倍、25倍)置于超聲提取器(功率600W)中超聲處理2．1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制8min，用布式漏斗抽濾，取濾液備用，將濾液離心5min，離心速率參考文獻(xiàn)報道，準(zhǔn)確稱取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品5．0rag，置于50mL為4000rad／s，取出上清液并轉(zhuǎn)移到玻璃試管中，再用50％乙醇溶容量瓶

7、中，用70％乙醇定容，得到0．1mS／mL的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液，液稀釋到50mL備用。按標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行顯色后測試并計算提一68一湖北中醫(yī)雜志2014年08月筮魚鲞箜Q塑取率。由表2顯示的結(jié)果可見，三個因素的極差大小排序為A>C2．3超聲提取法正交實驗設(shè)計>B，因此，三個因素影響次序為：乙醇濃度>提取劑用量>超聲依據(jù)前期超聲提取苧麻根總黃酮單因素實驗的條件，設(shè)計波時間。最佳工藝組合為A2B3C3但結(jié)合表3進(jìn)行方差分析可正交實驗進(jìn)一步優(yōu)化對提取率影響較大的3個因素(提取劑濃知，A因素有顯著意義，B因素和c因素沒有顯著想意義，從節(jié)約度、提取時間和提取劑用量倍

8、數(shù))，取三個水平，優(yōu)選最佳提取工時間和能源的角度考慮，B因素選2，C因素選2比較合適。綜合藝條件。因素水平(見表1)。以上分析，最佳提取