副豬嗜血桿菌的分離與血清型鑒定-論文.pdf

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1、第35卷第4期家畜生態(tài)學(xué)報Vo1．35NO．42014年4月ActaEcologiaeAnimalisDomasticiApr．2014副豬嗜血桿菌的分離與血清型鑒定于江～，吳家強，張玉玉，陶海英，王金寶。(1．山東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，山東濟(jì)南250014；2．山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，山東濟(jì)南250100；3．山東省畜禽疫病防治與繁育重點實驗室，山東濟(jì)南250100)[摘要]為了解副豬嗜血桿菌的血清型流行情況，采用細(xì)菌分離培養(yǎng)結(jié)合PCR的方法，對2008年至2012年，從山東、河南、河北、湖南、江蘇、上海的多個豬場送檢的186份疑似樣

2、品進(jìn)行副豬嗜血桿菌的檢測，再通過瓊脂擴(kuò)散試驗對分離菌株進(jìn)行了血清型鑒定。結(jié)果表明，從186份疑似樣品中最終分離鑒定到57株副豬嗜血桿菌，分離率為30．69／6。結(jié)果提示，我國副豬嗜血桿菌病存在不同程度的感染，以血清4型和5型最為流行，其次是血清1、12、13型，且該病的發(fā)生與季節(jié)和豬的日齡有關(guān)。[關(guān)鍵詞]副豬嗜血桿菌；分離鑒定；血清學(xué)；調(diào)查[中圖分類號]s811．6[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A[文章編號]1005—5228(2014)04—0064—03副豬嗜血桿菌(Haemophilusparasuis，HPS)是比率最高。定居于健康豬的上呼吸道的常在菌

3、，但在特定條件下本研究采用細(xì)菌分離培養(yǎng)結(jié)合PCR檢測的方可以侵入機(jī)體，引起發(fā)病豬的多發(fā)性漿膜炎、關(guān)節(jié)炎、法，對2008年至2012年送檢的來自山東、河南、河腦膜炎等疾病口]。近年來，隨著我國養(yǎng)豬業(yè)規(guī)?；捅?、湖南、江蘇、上海的多個豬場的186份樣品進(jìn)行集約化發(fā)展，該病以繼發(fā)的方式存在于各規(guī)?；iHPS的分離鑒定，用瓊脂擴(kuò)散試驗對分離菌株的血場，并呈逐年上升趨勢，增加了斷奶到保育階段仔豬清型進(jìn)行鑒定，分析該病的發(fā)生與季節(jié)和豬日齡的的發(fā)病率及死亡率，對養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，關(guān)系，以了解副豬嗜血桿菌病的流行情況，為該病的已逐漸成為世界范圍的重要疾

4、病_2]。綜合防控及治療提供參考依據(jù)。HPS的血清型復(fù)雜多樣，按Kieletein—Rapp—1材料與方法Gabriedson(KRG)瓊脂擴(kuò)散血清分型方法，至少可將副豬嗜血桿菌分為15個血清型。蔡旭旺等]1．1樣品來源研究表明我國以血清4型(24．29／6)和5型(19．29／6)從2008年至2012年，于山東、河南、河北、湖最為流行，其次為13型(12．5％)，14型(7．1％)和南、江蘇、上海的多個豬場采集鼻拭子及發(fā)病豬場的12型(6．8)，另外有12．1Vo的分離菌株不能進(jìn)行疑似病例(包括發(fā)病豬、病死豬或發(fā)病豬的腦、肺臟、血清學(xué)分型j

5、。關(guān)節(jié)、心臟)，共186份。近幾年，HPS在我國各地豬場引起多發(fā)性漿膜1．2主要試劑與儀器炎和關(guān)節(jié)炎的報道屢見不鮮，已從不同地區(qū)分離出HPS標(biāo)準(zhǔn)陽性血清：由山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧該菌，損失相當(dāng)慘重]。臧瑩安等對廣東省部分獸醫(yī)研究所保存、提供；胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基豬場進(jìn)行了HPS流行病學(xué)調(diào)查，結(jié)果表明不同豬場(TSA)為美國BD公司產(chǎn)品；煙酰胺腺嘌呤二核苷感染HPS的陽性率是不同的。白剛等[7對寧夏四酸(NAD)為Sigma公司產(chǎn)品；新生牛血清購自濟(jì)南個地區(qū)未接種HPS疫苗豬場的403份豬血清進(jìn)行勁牛公司；TaqDNA聚合酶、dNTP、DNAMa

6、rker了HPS的血清抗體檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)寧夏不同地區(qū)流DL2000購自大連寶生物工程有限公司。恒溫培養(yǎng)行情況各有差異，且4～1O周齡的仔豬感染HPS的箱購自上海精宏實驗設(shè)備有限公司；PTC一2000型[收稿日期]201310—12，修回日期：2013-10—25[基金項目]山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系；山東省博士后研究基金(201102009)[作者簡介]于江(1985)，女，山東萊州人，在讀博士，主要從事動物微生物與免疫學(xué)研究。E—mail：yujiang_2213@163．corn*[通訊作者]王金寶(1962一)，男，山東昌邑人，教授，博士

7、生導(dǎo)師，研究方向：動物病毒學(xué)與免疫學(xué)。E—mail：wangjb@saas．a(chǎn)c．cn66家畜生態(tài)學(xué)報第35卷陽性數(shù)Positivenumber23i0731O06陽性率Positiverate／3．55．317．512．35．31．8OO3．517．522．810．52．5不同日齡豬HPS感染情況統(tǒng)計57份HPS陽性的樣品的日齡，其中0～參考文獻(xiàn)：30日齡有18例，31～50日齡有28例，51～8O日齡[1]OliveiraS，P~oanC．Haemophilusparasuis：newtrendson有8例，81日齡以上有3例?？梢钥闯?，H

8、PS主要dignosis，epidemiologyandcontrol[J]．VeterinaryMicrobiolo—感染保育舍的31~50日齡(即