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1、中國醫(yī)藥生物技術(shù)2014年6月第9卷第3期ChinMedBiotechnol，June2014，Vo1．9，No．3·論著·DOI：10．3969／cmbad．issn．1673·713X2014．03．002三氧化二砷聯(lián)合順鉑抑制C6膠質(zhì)瘤細胞增殖的實驗研究王志剛，鐘根深，馬鵬舉，岳雙柱，周國勝【摘要】果J。同時亦有研究發(fā)現(xiàn)，As2O3脂質(zhì)體可使更多目的探討三氧化二砷(As2O3)聯(lián)合順鉑(CDDP)抑制C6的As2O3通過血腦屏障，誘導(dǎo)腦膠質(zhì)瘤細胞凋亡，神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞增殖情況及其分子機制。并具有明顯的劑量．時間依賴性關(guān)系L8J。CDDP在膠方
2、法體外實驗采用MTT法檢測對C6神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞質(zhì)瘤的化療中應(yīng)用較為廣泛，本研究欲通過As2O3的抑制率，流式細胞法檢測C6膠質(zhì)瘤細胞的凋亡及周期，與CDDP聯(lián)合應(yīng)用的體外、體內(nèi)實驗，來探討臨Westernblot檢測caspase．3、PTEN、PI3K、Akt蛋白表達床As2O3與CDDP聯(lián)合應(yīng)用治療腦膠質(zhì)瘤的可水平；體內(nèi)實驗采用免疫組化法檢測caspase一3、Ird3—0【調(diào)行性及其可能的機制；并探討中西藥結(jié)合治療腦膠控因子的表達，并觀察大鼠的生存情況。質(zhì)瘤的優(yōu)勢。結(jié)果As2O3、CDDP及聯(lián)合應(yīng)用分別作用于C6神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞24h后的細胞
3、增殖最大抑制率分別為34．37％、1材料與方法1．1材料31．73％和76．40％，其相應(yīng)藥物濃度分別為12．5、10．0、1．1．1細胞株及實驗動物C6膠質(zhì)瘤細胞由河(12．5+10．0)gmol／L；兩者聯(lián)用后對C6膠質(zhì)瘤細胞作用南省神經(jīng)病學(xué)研究所提供，常規(guī)傳代培養(yǎng)；雌性SD24h后的凋亡率分別為從單獨用藥時的(4．604-1．12)％、大鼠，體重150～200g，購自河南省實驗動物中心，(14．594-O．79)％提高到(36．134-1．55)％；采用PI單許可證編號：SCXK(京)2013—0001，普通環(huán)境飼染檢測的細胞周期也進一步證
4、明了聯(lián)合用藥增加了C6細養(yǎng)。胞的周期抑制作用。Caspase．3、PTEN蛋白在聯(lián)合組c6膠質(zhì)瘤細胞中表達顯著上調(diào)，而PI3K、Akt蛋白在聯(lián)合組1．1．2主要藥物和試劑As203、CDDP(20061001)為云南生物谷燈盞花藥業(yè)有限公司產(chǎn)品；caspase．3、C6膠質(zhì)瘤細胞中表達下調(diào)；免疫組化法檢測結(jié)果顯示，caspase．3調(diào)控因子在聯(lián)合組用藥的c6膠質(zhì)瘤細胞中的表Ivd3．G【、PTEN、PI3K、Akt單克隆抗體及ABC免疫組織化學(xué)試劑盒購自北京中杉金橋生物技術(shù)有達上調(diào)，而boB．a(chǎn)調(diào)控因子表達下調(diào)；但體內(nèi)實驗表明，限公司；BCA蛋白
5、定量試劑盒及定影液、顯影液在18d觀察期內(nèi)各組大鼠的生存期無明顯差異(P：購自武漢博士德生物工程有限公司。0．2531)。1．1．3主要儀器MultiskanMK3酶標儀由美國結(jié)論As2O3聯(lián)合CDDP通過上調(diào)caspase-3和PTEN，ThermoElectron公司生產(chǎn)；BM．IX生物組織包埋下調(diào)PI3K、Akt及InB．d抑制膠質(zhì)瘤細胞體內(nèi)外的生長。機由孝感醫(yī)療器械公司生產(chǎn)；HI122型烤片機由德【關(guān)鍵詞】順鉑；神經(jīng)膠質(zhì)瘤；細胞凋亡；三氧國LeicaMicrosystemNussloch公司生產(chǎn)；江灣化二砷：藥物療法，聯(lián)合I型腦立體定向儀
6、為第二軍醫(yī)大學(xué)生產(chǎn)。中國醫(yī)藥!物技術(shù)2ol4．9f3)：167一i731．2方法12．1細胞培養(yǎng)及處理C6膠質(zhì)瘤細胞常規(guī)傳惡性腫瘤的術(shù)后化療可以阻滯腫瘤細胞的生代培養(yǎng)，取對數(shù)生長期的細胞以5×10個／孑L接種長、侵襲及擴散，進而提高患者的生活質(zhì)量，延長患者的生存期。近年來研究發(fā)現(xiàn)，As2O3不僅對急基金項目：國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金(81201765)；河南省衛(wèi)生性早幼粒細胞白血病有很好療效，而且對實體腫科技創(chuàng)新型人才工程(4160)瘤，如胃癌、肺癌、肝癌、前列腺癌、乳腺癌等也作者單位：453100河南衛(wèi)輝，新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院神經(jīng)外科／河
7、南顯現(xiàn)了一定的抗腫瘤效果[1-S]。另有研究表明，As2O3省神經(jīng)病學(xué)研究所通訊作者：周國勝，Email：745772199@qq．tom：鐘根深，Email：與順鉑(CDDP)聯(lián)合應(yīng)用，在不增加CDDP對genshenzhong@163．corn腎毒性作用情況下，還能提高CDDP的化療效收稿日期：2013-12—31中國醫(yī)藥生物技術(shù)2014年6月第9卷第3期ChinMedBiotechnol，June2014，Vo1．9，No．3于96孔板中。分為4組：①對照組；~As203組；1mg／kg~④As2O3+CDDP組，腹腔注射CDDP和~CDD
8、P組；@As2O3+CDDP組。CDDP濃度分As203均為1mg／kg。連續(xù)給藥7d后，每組處死別為10、5、2．5gmol／L，As
