三氧化二砷與順鉑聯(lián)合誘導(dǎo)人卵巢癌HO8910細(xì)胞凋亡的初步研究-論文.pdf

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1、·250·中國實(shí)用醫(yī)藥2013年2月第8卷第6期ChinaPracMed,F(xiàn)eb2013,Vo1.8,No.6·論著·三氧化二砷與順鉑聯(lián)合誘導(dǎo)人卵巢癌H08910細(xì)胞凋亡的初步研究高洪泉張愛清田忠富【摘要】目的探討三氧化二砷與順鉑聯(lián)合對體外培養(yǎng)卵巢癌細(xì)胞株H08910細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期調(diào)控及細(xì)胞凋亡影響。方法用三氧化二砷與順鉑聯(lián)合處理H08910細(xì)胞,采用MTI"法檢測藥物對細(xì)胞的抑制作用,倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變;瓊脂糖凝膠電泳觀察DNA降解,以及應(yīng)用流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞凋亡過程中細(xì)胞周期的變化。結(jié)果在三氧化二砷與順鉑聯(lián)合作用下,H08910細(xì)胞呈凋亡改變,D

2、NA瓊脂糖凝膠電泳呈典型的凋亡特征。細(xì)胞凋亡的同時(shí),細(xì)胞周期發(fā)生特定的改變。結(jié)論三氧化二砷與順鉑聯(lián)合能抑制卵巢癌細(xì)胞增殖,能誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞凋亡?!娟P(guān)鍵詞】三氧化二砷(As0,);順鉑(DDP);細(xì)胞凋亡;卵巢癌細(xì)胞株StudiesonArsenictrioxideandCisplatininducesapoptosisinOvarianCancercelllinesHO8910GAOHong—quan,ZHANGAi—qing,T1ANZhor,!g,XiamenMedicalCollage157011,China【Abstract】ObjectiveThecur

3、rentstudywasdesignedtoinvestigatewhetherArsenictrioxideandCis.platincaninducesapoptosisinOvarianCancercel1.MethodsCellproliferationwasassessedbyMTFas—says.Morphologicalchangesofapoptosiswereobservedwithinve~microscope.DNAladderandcellcyclewereexaminedbyDNAagarosegeleletronphoresandPIf

4、luorescenceflowcytometry(FCM).ResultsUnderthein—fluenceofArsenictrioxideandCisplatin,H08910cellexhibitedchangesofapoptosisbothinmorphologyandinthecharacteristicsofelectrophoresis.Meanwhilethecellcyclealsoshowedspecialchange.ConclusionArsenictrioxideandCisplatincaninhibitcellproliferat

5、ion,ArsenictrioxideandCisplatincaninducesapoptosisinO—vanCancercel1.【Keywords】Arsenictrioxide;Cisplatin;apoptosis;OvarianCancercellline卵巢癌是是婦科惡性腫瘤中死亡率最高的腫瘤。眾多研1.2.1細(xì)胞培養(yǎng)人卵巢癌細(xì)胞H08910培養(yǎng)于含有10%究表明腫瘤的發(fā)生發(fā)展不僅與細(xì)胞分化異常增殖過度有關(guān),小牛血清,lOOU/ml青霉素、鏈霉素RPMI1640培養(yǎng)基中,在而且與細(xì)胞凋亡有關(guān)。隨著人們對細(xì)胞凋亡機(jī)制的深入37℃、5%CO,培養(yǎng)箱內(nèi)常

6、規(guī)傳代培養(yǎng)。研究,發(fā)現(xiàn)許多化療藥物是通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡來發(fā)揮抗1.2.2MTT試驗(yàn)藥物組為DDP濃度為4txmol/L,As2O3癌效應(yīng)的。因此探索藥物誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,將成為腫瘤治濃度分別為1.0、2.0、4.0、8.0txmol/L共4組,用培養(yǎng)液稀療的新方向。本文探討三氧化二砷與順鉑聯(lián)合對體外培養(yǎng)卵釋,卵巢癌細(xì)胞以10/ml接種于4塊進(jìn)口96孑L培養(yǎng)板,每孔巢癌細(xì)胞株HO8910細(xì)胞凋亡的作用。加200培養(yǎng)液,每天用一塊。每組設(shè)4個(gè)復(fù)孔,接種后241材料和方法h更換培養(yǎng)液。實(shí)驗(yàn)組加入各濃度藥物培養(yǎng)液,對照不加藥,1.1材料及儀器人卵巢癌細(xì)胞系HO8910購

7、自中國科學(xué)空白對照不加培養(yǎng)液,加藥后分別于24、48、72、96h加入2O院上海細(xì)胞生物研究所。三氧化二砷購自哈醫(yī)大第一附屬醫(yī)~IMTY,繼續(xù)放入培養(yǎng)箱孵育4h后吸出培養(yǎng)液,加入150Ixl院,順鉑購于錦州制藥~廠。RPMI一1640培養(yǎng)基為美國Pro—DMSO震蕩溶解10rain,空白對照調(diào)零,酶聯(lián)儀檢測,波長490mega公司生產(chǎn)。使用前加小牛血清至10%,青霉素,鏈霉素nm,測定各孔的吸光值。計(jì)算抑制率,抑制率=[(陰性對照至100U/ml。流式細(xì)胞儀(FCM)為美國Coulter公司生產(chǎn)。組OD值.實(shí)驗(yàn)組OD值)/陰性對照組OD值]×100%。碘化丙啶(P

8、1)為美國

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