沙門氏菌快速檢測技術(shù)分析.doc

《沙門氏菌快速檢測技術(shù)分析.doc》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。

1、沙門氏菌快速檢測技術(shù)研究進展摘要：沙門氏菌是食品中最常見的致病菌，是導致食物中毒的重要病原菌之一，嚴重危害人類的健康安全和食品安全。傳統(tǒng)的細菌學檢測耗時繁瑣，不能滿足當今發(fā)展的需求。本文簡要介紹了近年來沙門氏菌快速檢測技術(shù)研究進展，并分析各種檢測方法的優(yōu)缺點，以期尋找一種快速、簡便、特異、靈敏，能檢測絕大多數(shù)血清型沙門氏菌的方法。關(guān)鍵詞：沙門氏菌；快速檢測、免疫學技術(shù)、分子生物學技術(shù)ResearchProgressontheRapidDetectionofSalmonellaZhaoHui(CollegeofFoodScien

2、ceandEngineering,NorthwestA&FUniversity,Yangling,Shaanxi,China)?Abstract：Salmonellaisthemostcommonpathogenicbacteriainfood,whichcancausebromatoxismandbringabouthazardonhuman,Thetraditionalbacteriologydetectionshavenotbeesatisfiedtherequirementofdevelopmentbecauseoft

3、ime-consuming.ThisreviewbrieflyintroducedresearchprogressoftherapiddetectionofSalmonellainrecentyearsandanalyzedtheadvantagesanddisadvantagesofvariousdetectionmethods，hopingtofindafast，simple，specificandsensitivemethodthatcoulddetectthemajorityserotypesofSalmonella．

4、Keywords:salmonella；rapiddetection；immunologicaltechniques；molecularbiologicaltechniques隨著國民經(jīng)濟的發(fā)展，食品、海產(chǎn)品中存在的衛(wèi)生隱患問題愈發(fā)嚴重，在世界各地的食物中毒中，沙門氏菌引起的中毒病例占首位或第2位，在中國，每年由沙門氏菌引起的食物中毒事件占到全部食物中毒事件的40%-60%[1]。沙門氏菌是常見的重要食源性致病菌，它們廣泛分布在河口、海水及沉積物、水產(chǎn)養(yǎng)殖等區(qū)域，寄生在海洋生物體中，通過污染的動物源性食品感染人類，導致食物中毒

5、，嚴重危害人體健康。目前我國食品中致病菌的檢驗普遍采用傳統(tǒng)的細菌學檢驗方法和血清學方法，這些方法一般都復(fù)雜繁瑣、耗時費力，大致需要4d~6d才能出檢驗結(jié)果，難以應(yīng)對突發(fā)事件的發(fā)生。因此，建立一些快速、簡便、準確度高的檢測方法一直是沙門氏菌檢測研究的核心問題。隨著生物技術(shù)的進步，在食源性致病菌檢測領(lǐng)域出現(xiàn)了許多比傳統(tǒng)方法更快捷、敏感性更好的新技術(shù)，如免疫學檢測技術(shù)和分子生物學檢測技術(shù)等。本文總結(jié)了一些食品中沙門氏菌的快速檢測方法，從以傳統(tǒng)方法為基礎(chǔ)發(fā)展到以免疫學為基礎(chǔ)的或以分子生物學為基礎(chǔ)的快速檢測方法，以期加快檢測工作的進行[

6、2]。1免疫學檢測技術(shù)在所有食品中的沙門氏菌的檢測技術(shù)手段中，免疫學檢測技術(shù)占有重要的地位，主要是因為其價格低廉，不需要特定的實驗儀器，容易在基層推廣開來。免疫學技術(shù)以抗原和抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)為基礎(chǔ)，通過病原體刺激機體產(chǎn)生免疫球蛋白（抗體），再輔以免疫放大技術(shù)來進行檢測?？乖涂贵w的結(jié)合反應(yīng)可在很短時間內(nèi)完成，同時由于敏感的標記技術(shù)及示蹤技術(shù)的應(yīng)用，使得沙門氏菌可在較短的時間內(nèi)超微量而特異地檢出。目前已建立的沙門氏菌免疫學檢測方法主要有以下幾種：1.1免疫熒光技術(shù)(IFT)免疫熒光技術(shù)是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理,先將已知的抗原

7、或抗體標記上熒光素,制成熒光抗體,再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢測組織或細胞內(nèi)的相應(yīng)抗原(或抗體)在組織或細胞內(nèi)形成的抗原抗體復(fù)合物上含有標記的熒光素,利用熒光顯微鏡觀察標本,熒光素受外來激發(fā)光的照射而發(fā)生明亮的熒光（黃色或橘紅色），可以看見熒光所在的組織細胞，從而確定抗原或抗體的性質(zhì)、定位，以及利用定量技術(shù)測定含量。免疫熒光技術(shù)主要有直接法和間接法。直接法是在檢測樣品上直接滴加已知特異性熒光標記的抗血清，經(jīng)洗滌后在熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。直接法還可以清楚地觀察抗原并用于定位標記觀察。趙文學[3]等直接將沙門氏菌固定在載玻

8、片上,再用熒光標記抗體染色,通過熒光顯微鏡觀察染色效果,建立了沙門氏菌直接免疫熒光檢測技術(shù),該技術(shù)染色程序簡單、操作方便,具有一定的應(yīng)用價值。間接免疫熒光法在實踐中用途較廣，是在檢樣上滴加已知的細菌特異性抗體，待作用后經(jīng)洗滌，再加入熒光標記的第二抗體，一抗與結(jié)合有熒光色素的二