新生大鼠成骨細胞原代培養(yǎng)與鑒定

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1、中國組織工程研究第17卷第41期2013–10–08出版ChineseJournalofTissueEngineeringResearchOctober8,2013Vol.17,No.41www.CRTER.orgdoi:10.3969/j.issn.2095-4344.2013.41.003[http://www.crter.org]程浩,張延芳,許巍.新生大鼠成骨細胞原代培養(yǎng)與鑒定[J].中國組織工程研究,2013,17(41):7199-7204.新生大鼠成骨細胞原代培養(yǎng)與鑒定★11212程浩,張延芳,許巍(廣東醫(yī)學院信息

2、工程學院物理教研室,廣東省東莞市523808;廣西梧州制藥(集團)股份有限公司,廣西壯族自治區(qū)梧州市543002)文章亮點:1實驗的特點在于采取3種方法即膠原酶消化法、分段膠原酶消化法及組織塊法,從大鼠幼鼠顱骨中分程浩★,男,1986年生,離成骨細胞,區(qū)別于傳統(tǒng)的一種或者兩種方法。能更全面的確定膠原酶消化法是一種方便、高效、理想的原山東省臨沂市人,漢族,代成骨細胞分離培養(yǎng)方法。2013年廣東醫(yī)學院畢業(yè),碩士,主要從事骨質(zhì)疏松2實驗所用骨細胞分離部位為大鼠的顱骨,相對骨膜以及骨髓,顱骨面積較大且操作簡單。現(xiàn)在成骨細方面的研究。胞原

3、代培養(yǎng)方法眾多,實驗探索一種操作簡便,既經(jīng)濟又高效的原代培養(yǎng)成骨細胞的方法,為進一步的實驗chenghao712@163.com研究奠定基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞:通訊作者:張延芳,博士,組織構(gòu)建;骨組織構(gòu)建;成骨細胞;原代培養(yǎng);膠原酶消化法;組織塊法;膠原酶;成骨細胞鑒定副教授,廣東醫(yī)學院信息主題詞:工程學院物理教研室,廣大鼠;顱骨;成骨細胞;細胞培養(yǎng)技術(shù);細胞增殖;生長曲線表東省廣州市523808zjzyf2006@163.com基金資助:東莞市醫(yī)療衛(wèi)生重點課題(2012105102006)*;東莞市醫(yī)療衛(wèi)生一般課題(2012105152

4、00001)*中圖分類號:R318文獻標識碼:A摘要文章編號:2095-4344背景:組織工程需要大量的種子細胞,成骨細胞是骨組織工程的重要種子細胞之一。但是成骨細胞培養(yǎng)難度(2013)41-07199-06大,不同培養(yǎng)方法得到的成骨細胞數(shù)量、純度、增殖及分化活性各有區(qū)別。收稿日期:2013-04-05目的:驗證及比較成骨細胞原代培養(yǎng)常用的3種方法,探索一種操作簡便,既經(jīng)濟又高效的原代培養(yǎng)成骨細修回日期:2013-07-16胞的方法,為進一步的實驗研究奠定基礎(chǔ)。(201305122/D·C)方法:取新出生72h內(nèi)SD大鼠乳鼠顱骨

5、,以膠原酶消化法、分段膠原酶消化法及組織塊法分離成骨細胞,進行細胞形態(tài)觀察、細胞化學染色、CCK-8法繪制生長曲線及錐蟲藍排斥法計數(shù)活細胞率。結(jié)果與結(jié)論:分離培養(yǎng)的成骨細胞增殖良好,具備典型成骨細胞特性,細胞化學染色結(jié)果明顯。膠原酶消化法比分段膠原酶消化法提取的成骨細胞數(shù)量多,細胞存活率高(P<0.05);且比分段膠原酶消化法操作簡單,耗時短。組織塊法操作最為簡單,對細胞損傷較小,但是細胞數(shù)量低、耗時長,很難用于大規(guī)模成骨細胞培養(yǎng)。膠原酶消化法是一種方便、高效、理想的原代成骨細胞分離培養(yǎng)方法。Primarycultureandi

6、dentificationofneonatalratosteoblasts1121ChengHao,ZhangYan-fang,XuWei(DepartmentofPhysics,SchoolofInformationEngineering,2GuangdongMedicalCollege,Guangzhou523808,GuangdongProvince,China;GuangxiWuzhouPharmaceutical(Group)Co.,Ltd.,Wuzhou543002,GuangxiZhuangAutonomousRe

7、gion,China)AbstractChengHao★,Master,BACKGROUND:Tissueengineeringrequiresalotofseedcells.OsteoblastshavebecomeimportantseedcellsDepartmentofPhysics,SchoolofInformationEngineering,inbonetissueengineering.However,itisdifficulttoculturetheosteoblasts,andcellnumber,purity

8、,proliferationGuangdongMedicalCollege,anddifferentiationactivityaredifferentobtainedbydifferentculturemethods.Guangzhou523808,OBJEC

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