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《ERK途徑對肝癌BEL-7402細胞增殖和遷移的影響-論文.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、腫瘤2013年11月第33卷第11期TUMORVo1．33，November2013www．tumorsci．org947DOI：10．3781~．issn．1000—7431．2013．11．002Copyright◎2013byTUMOR基礎(chǔ)研究·BasicResearchMiR-21通過AKT／ERK途徑對肝癌BEL一7402細胞增殖和遷移的影響包龍龍，嚴妍。，季衛(wèi)丹。，沈舒文。，吳孟超，蘇長青。1．蘇州大學醫(yī)學部基礎(chǔ)醫(yī)學與生物科學學院遺傳學系，江蘇蘇州215123；2．第二軍醫(yī)大學東方肝膽外科醫(yī)院分子腫瘤研究室，上海200438【摘要】目的：探討微小RNA一2
2、1(microRNA一21，miR一21)對人肝癌BEL一7402細胞增殖、遷移和侵襲的影響及其可能的作用機制。方法：將攜帶增強型綠色熒光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein，EG)基因的miR一21表達載體pGL3一miR21一EGFP瞬時轉(zhuǎn)染BEL一7402細胞，實時熒光定量一PCR檢測細胞中miR一21的表達水平，蛋白質(zhì)印跡法檢測細胞中磷酸化蛋白激酶B[phospho—proteinkinaseB，P—PKB(又稱p-AKT)1、磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(phospho—extracellularsignal—regulatedk
3、inase，p-ERK)的表達，MTT法檢測miR一21過表達對BEL一7402細胞增殖的影響，細胞劃痕和Transwell小室法檢測miR一21過表達對BEL一7402細胞遷移和侵襲能力的影響。將pGenesil—shAKT載體轉(zhuǎn)染BEL一7402細胞，實時熒光定量PCR檢測細胞中miR一21的表達，蛋白質(zhì)印跡法檢測細胞中AKT和p-AKT的表達水平，MTT法和細胞劃痕實驗檢測pGenesil—shAKT對BEL一7402細胞增殖和遷移的影響。結(jié)果：與空白對照組(未轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的BEL一7402細胞)相比，pGL3一miR21一EGFP轉(zhuǎn)染后，BEL一7402細胞中mi
4、R一21的表達水平明顯上調(diào)(P<0．01)，p-AKT和P—ERK的表達水平同時上調(diào)(P<0．05)；與空白對照組相比，miR一21的過表達明顯促進了BEL一7402細胞的增殖、遷移和侵襲的能力(P<0．05)。pGenesil—shAKT轉(zhuǎn)染BEL一7402細胞后，伴隨著AKT和p-AKT表達水平的下調(diào)，細胞的增殖和遷移能力均明顯下降(P<0．05)，而細胞中miR一21的表達水平無明顯變化。結(jié)論：MiR一21可能通過AKT／ERK信號通路促進BEL一7402細胞的增殖和遷移。【關(guān)鍵詞】肝腫瘤；細胞增殖；細胞運動；腫瘤侵潤；微RNAs【中圖分類號】R735．7【文獻
5、標志碼】A【文章編號】1000—7431(2013)11—0947—07EfectofmiR-21ontheproliferationandmigrationofhumanhepatomaBEL一7402cellsthroughAKT／ERKpathwayBAOLong-long。，YANYan，JIWei—dan，SHENShu—wen，WUMeng—chap，SUChang—qing?！?．DepartmentofMedicaIGenetics。SchoolofBiology＆BasicMedicaISciencesofSoochowUniversity，Suzh
6、ou215123，JiangsuProvince，China；2．DepartmentofMolecularOncology，EasternHepatobiliarySurgicalHospital，SecondMilitaryMedicalUniversity，Shanghai200438，China[ABSTRACT]Objective：Toinvestigatethee仟ectsofmiR一21ontheproliferation．invasionandmigration0fhumanhepatomaBEL一7402cellsandexPIorethepossi
7、bIemechanism．Methods：MiR一21over—expressionvectorpGL3一miR21一EGFP(enhancedgreenfluorescentprotein)wastransfectedintoBEL一7402cells．TheexpressionleveIofmiR一21wasdetectedbyreal—tlmefluorescencequantitative—PCRandtheexpressionlevelsofphospho—AKT(p-AKT)andphospho—extracelIuIarsignalre
