PCR技術在醫(yī)學檢驗乙肝中的應用-論文.pdf

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1、·2576·齊齊哈爾醫(yī)學院學報2014年第35卷第17期JournalofOiqiharUniversityofMedicine，2014，Vo1．35，No．17．經驗交流．PCR技術在醫(yī)學檢驗乙肝中的應用楊巍巍【摘要】目的研究PCR在醫(yī)學檢驗中的應用。方法隨機抽取50例患者2013年6月進入我院進行調查，所有患者均為乙肝攜帶者，需要進行采、化驗等檢驗患者的病況。將患者隨機分為實驗組和對照組，實驗組人數(shù)30人，對照組人數(shù)20人，實驗組采用PCR技術對患者進行檢測，對照組采取常規(guī)的方法對患者進行檢測。兩組的用藥量與種類嚴格的一致。分別記錄這兩組實驗對乙肝患者檢測出的病

2、毒數(shù)量并探其性。結果觀察組檢測乙肝患者病毒的速度和準確性明顯高于傳統(tǒng)檢測方式的效果，經過記錄顯示最后的統(tǒng)計學結果，P<0．05，表明測試結果具有統(tǒng)計學意義。結論通過PCR技術對乙肝患者的檢測實驗結果更準確快速，所以PCR技術檢驗明顯優(yōu)于傳統(tǒng)的檢驗方式?！娟P鍵詞】聚合酶鏈式反應；檢驗；乙肝聚合酶鏈式反應(PolymeraseChainReaction)，簡稱表1兩組患者檢測靈敏程度比較表PCR_1J，是一種分子生物學技術，用于放大擴增特定的DNA片段?？煽醋魃矬w外的特殊DNA復制。我科近年來采用PCR技術對乙肝患者的血清資料進行檢測分析，為比較PCR與傳統(tǒng)檢測方法的差

3、異，特與采用傳統(tǒng)檢測手段患者資料進行對照分析，現(xiàn)綜合報道如下。一表中的數(shù)據(jù)顯示P值小于0．05，表示調查結果具有統(tǒng)計、資料與方法1．一般資料：隨機抽取于2013年6月在我院乙肝治療的學意義，即表明PCR技術對乙肝的檢測優(yōu)于傳統(tǒng)學檢測。50例患者，年齡分布為20—60歲。調查的5O例患者均為乙討論PCR(聚合酶鏈式反應)是利用DNA在體外攝氏肝患者，全身均無系統(tǒng)性疾病和藥物過敏史。患者需要進行95。高溫時變性會變成單鏈，低溫(經常是60℃左右)時引物與單鏈按堿基互補配對的原則結合，再調溫度至DNA聚合酶采血、化驗等輔助檢查?，F(xiàn)將50例患者隨機分為實驗組和對照組，實驗組人

4、數(shù)30人，男12人、女18人，對照組人數(shù)20最適反應溫度(72℃左右)，DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5人，男11人、女9人。分組完全按照隨機分組的方法來進行一3，的方向合成互補鏈。基于聚合酶制造的PCR儀實際就分組，兩組患者在年齡、性別及疾病原因等方面比較，差異不是一個溫控設備，能在變性溫度，復性溫度，延伸溫度之間很顯著，不具有統(tǒng)計學意義，具有可比性。好地進行控制。醫(yī)學檢驗是對病人的血液、體液、分泌物或脫2．納入和評價標準：納入標準：年齡在20～60歲的乙肝落細胞等標本，進行化驗檢查，以獲得病原、病理變化及臟器患者；沒有免疫缺陷等疾病、智力正常、自然狀況一切正功能狀

5、態(tài)等資料。通過對患者的上述標本進行醫(yī)學檢驗，達常；排除標準：存在感覺功能缺陷；先天性的疾病；高血壓到對患者疾病進行診斷與輔助診斷的目的。等。ELISA測定的是乙肝病毒表達的蛋白質(多肽)抗原或相3．方法：實驗組采取PCR檢測技術，對照組采取傳統(tǒng)檢應的抗體。r'Q．PCR測定乙肝病毒DNA。檢測HBV—DNA是驗方法，即常規(guī)的物化檢測。兩組的用藥方法用量相同，均采判斷乙肝病毒有無復制的“金指標”。ELISA方法測定乙肝五用局部浸潤方法注射。對照組：常規(guī)檢測技術；實驗組：采用項指標依然是輔助診斷乙肝的常規(guī)方法，特別對急性乙肝的PCR技術，根據(jù)對乙肝患者抗原抗體檢測的敏感度

6、進行評價。發(fā)現(xiàn)有重要作用，只是該方法對檢測慢性乙肝表現(xiàn)得越來越4．效果評價標準：觀察檢測抗原抗體的數(shù)量和靈敏度不靈敏，特別是在乙肝病毒發(fā)生了變異以后，需要進行HBV-作為評估標準。DNA檢測才能確診。在技術上，F(xiàn)Q—PCR采用熒光標記和閉5．統(tǒng)計學處理：采集到的數(shù)據(jù)采用SPSS15．0軟件進行管檢測，克服了常規(guī)PCR擴增產物污染所致假陽性的缺點，統(tǒng)計學分析，百分率(％)表示計數(shù)資料，定性資料的比較采使結果具有極高的特異性和敏感性。但在分析FQ—PCR結果用x檢驗，成組設計的t檢驗用于組間比較，當P<0．05時，時，還應考慮以下因素：r'Q．PCR的反應體系復雜，易受多

7、種可認為差異有統(tǒng)計學意義。因素影響。待測標本的溶血、脂血、處理不當都會導致其假陽二、結果性或假陰性；VQ．PCR只能檢測血中游離的HBV—DNA，當病兩組的檢測效果統(tǒng)計情況見表1。毒整合到肝細胞染色體上，隨同肝細胞一起復制、表達時，ELISA可出現(xiàn)陽性反應，但血清中已沒有HBV顆粒存在，作者單位：163453黑龍江省大慶龍南醫(yī)院檢驗科此時FQ．PCR為陰性反應；當患者感染的HBV—DNA發(fā)生突變，不能與熒光探針結合，r'Q—PCR為陰性，而ELISA可為陽齊齊哈爾醫(yī)學院學報2014年第35卷第17期JournalofOiqiharUniversity