復(fù)氧損傷神經(jīng)元的保護(hù)作用.pdf

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1、東南大學(xué)學(xué)JSouutthheastUni,v舞(Med醫(yī)Sc學(xué)iE版di;)2?。15,Jun;34(3):3?47—3?52·347·內(nèi)皮祖細(xì)胞對(duì)氧糖剝奪/復(fù)氧損傷神經(jīng)元的保護(hù)作用李子惠,柏盈盈,居勝紅(1.東南大學(xué)醫(yī)學(xué)院分子與功能影像實(shí)驗(yàn)室,江蘇南京2100092.東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院放射科,江蘇南京210009)[摘要]目的:研究?jī)?nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)共培養(yǎng)對(duì)氧糖剝奪/復(fù)氧(OGD/R)損傷神經(jīng)元是否有保護(hù)作用。方法:分離培養(yǎng)新生小鼠的海馬神經(jīng)元,利用缺氧培養(yǎng)室建立神經(jīng)元OGD/R模型。分離培養(yǎng)小鼠骨髓源性EPCs,采用Transwell小室建立E

2、PCs與OGD/R損傷神經(jīng)元的共培養(yǎng)系統(tǒng)。將神經(jīng)元隨機(jī)分為4組,即對(duì)照組、OGD/R組、EPCs共培養(yǎng)組及EPCs共培養(yǎng)并加入一氧化氮合酶(eNOS)抑制劑(L-NAME)組。神經(jīng)元凋亡率用TUNEL熒光法檢測(cè)。用Westernblot法檢測(cè)神經(jīng)元caspase3及內(nèi)皮型eNOS活性。結(jié)果:OGD/R組神經(jīng)元的細(xì)胞凋亡率和caspase3活性較對(duì)照組顯著增加。與OGD/R組相比,EPCs共培養(yǎng)組神經(jīng)元凋亡情況顯著降低(P<0.05),且eNOS磷酸化水平明顯增高(P<0.05)。而與EPCs共培養(yǎng)組相比,EPCs+L—NAME組神經(jīng)元凋亡情況明顯增加(P<

3、0.05),且eNOS磷酸化水平也明顯下降(P<0.05)。結(jié)論:與EPCs共培養(yǎng)可以通過(guò)提高神經(jīng)元eNOS的活性來(lái)保護(hù)OGD/R損傷的神經(jīng)元。[關(guān)鍵詞]內(nèi)皮祖細(xì)胞;神經(jīng)元;氧糖剝奪/復(fù)氧;共培養(yǎng);內(nèi)皮型一氧化氮合酶[中圖分類(lèi)號(hào)]R743.3[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A[文章編號(hào)]1671。6264(2015)03‘0347。06doi:10.3969/j.issn.1671·6264.2015.03.003Protectiveefectofendothelialprogenitorcellsonoxygenandglucosedeprivation/reoxygen

4、ationinjuredneuronsLlZi’hui,BAIYing‘ying,JUSheng。hong(1.JiangsuKeyLaboratoryofMolecularandFunctionalImaging,MedicalSchool,SoutheastUniversity,Nanjing210009,China;2.DepartmentofRadiology,ZhongdaHospital,SoutheastUniversity.Nanjing210009.ina)[Abstract]Objective:Toinvestigatewhethere

5、ndothelialprogenitorcells(EPCs)CO‘culturehasprotectiveeffectonoxygenandglucosedeprivation/reoxygenation(OGD/R)injuredneurons.Methods:Hippocampalneuronswereisolatedandculturedfromnewbornmice,andOGD/Rmodelofneuronswasperformedusingahypoxiachamber.EPCswereisolatedfromthebonema~owofmi

6、ce,andTranswellwasusedtobuildtheCO‘culturesystemofEPCsandtheOGD/Rinjuredneurons.Neuronswererandomlydividedintofourgroups:thecontrolgroup,theOGD/Rgroup,theEPCsCO。culturegroupandtheEPCs+nitricoxidesynthaseinhibitor(L。NAME)group.Neuron~apoptosisratewasdetectedbyTUNELassay.Westernblot

7、wasusedtodetectcaspase3andendothelialnitricoxide[收藕日期]2014-12·26[修回日期]2015—02—02[基金項(xiàng)目]國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81371538)[作者簡(jiǎn)介]李子惠(1989一),女,江蘇泰州人,在讀碩士研究生。E。mail:zihuili0731@hotmail.com[通信作者]居勝紅E。mail:jsh0836@hotmail.corn[引文格式]李子惠,柏盈盈,居勝紅.內(nèi)皮祖細(xì)胞對(duì)氧糖剝奪/復(fù)氧損傷神經(jīng)元的保護(hù)作用[J].東南大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版,2015,34(3):347—352

8、東南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)2015年6月,34(3)synthase(

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