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1、·284·價值工程高效液相色譜法測定預混料中維生素的研究OntheThesisResearchofVitamininPremixedFodderbyHPLC王曉峰WANGXiao—feng(廣東省梅州市質(zhì)量計量監(jiān)督檢測所,梅州514000)(GuangdongMeizhouSupervisionTestingInstituteofQuality&Metrology,Meizhou514000,China)摘要:本文就如何通過高效液相色譜,測定預混合飼料中的維生素,作了一些探討。并得出以下結(jié)論:檢測器選用紫外檢測器;色譜柱可使用C18柱;對于流動相,用90%甲
2、醇作為測定脂溶性維生素的流動相,用超純水作為測定水溶性維生素的流動相;對于檢測波長,脂溶性維生素用275nm,水溶性維生素用254nm;柱溫20%一30~C;流速lm1]s;pH4.5。檢測脂溶性維生素直接用甲醇溶解提取,水溶性維生素也可直接用超純水溶解提取。Abstract:ThethesisresearchestheVitaminbyHPLC.Theconclusion:chooseUV-detector;useC18column;flowingphase:90%methylalcoholforfatsolubleVitamin;ultrapurewat
3、erforwatersolubleVitamin.UVdetectionwavelength:275nmforfatsolubleVitamin,254nmforwatersolubleVitamin;columntemperature20cC一3O℃:flowrate:1ml/s;pH4.5:dissolveandabstractfatsolubleVitaminbymethyl,dissolveandabstractwatersolubleVitaminbyultrapurewater.關(guān)鍵詞:高效液相色譜;維生素;水溶性;脂溶性;檢測Keywords:
4、HPLC;vitamin;watersoluble;fatsoluble;test中圖分類號:Q56文獻標識碼:A文章編號:1006—4311(2015)07—0284—020引言靈敏度較低,因此維生素分析的檢測限較高;熒光檢測器維生素預混料主要是由載體沸石粉和谷糠等,并添加(FD)靈敏度比紫外檢測器高,但不能直接檢測不能產(chǎn)生少量的各單體維生素混合而成的。目前測定預混料中的維熒光的物質(zhì),需使用柱后衍生技術(shù);電化學檢測器fEcD)靈生素,一般使用高效液相色譜儀檢測。維生素分為兩種類敏度高,但操作復雜,比較適合檢測痕量組分。型:一種是水溶性維生素,這類維生素溶于
5、水,包括維生素1.2色譜柱色譜柱是色譜儀最重要的部件(心臟),B、維生素C、生物素和泛酸;另外~種是脂溶性維生素,這它通常用厚壁玻璃管或內(nèi)壁拋光的不銹鋼管制作的。目前類維生素溶于甲醇等有機溶劑,包括維生素A、維生素D、發(fā)展趨勢是減小填料粒度和柱徑,以提高柱效。檢測維生維生素E和維生素K。其中在預混料中含有較多的是維生素一般使用C18柱。C18柱為長鏈烷基鍵合相,有較高的素A、維生素、生物素和維生素E,含量較少的是維生素碳含量和更好的疏水性,對各種類型的生物大分子有更強B和葉酸。測定維生素時,脂溶性維生素用甲醇作為流動的適應(yīng)能力。相,水溶性維生素用超純水作為流
6、動相。柱長的選擇:長柱分離時間長,分離效果好,一般用于關(guān)于維生素的檢測方法,主要有放射免疫法、氣帽色分離不易分離的化合物;短柱分離時間短,分離效果一般,譜法、酶免疫測定法、液相色譜法、質(zhì)譜法和磁共振技術(shù)一般用于分離較易分離的化合物。在檢測維生素時應(yīng)根據(jù)等I。在這些檢測方法中,高效液相色譜法是使用頻率最需要選擇色譜柱的長短。在檢測維生素時,用中等長度的高,應(yīng)用范圍最廣泛的一種方法。高效液相色譜法,具有簡色譜柱基本上能滿足檢測要求。如果是檢測B,和葉酸時,單方便、檢測效率高、檢測結(jié)果精準和分析速度快的特點??墒褂瞄L柱。因為B和葉酸含量較小,有時候幾個波峰1檢測條
7、件易粘在一起,不易分離,造成重疊峰。這個時候使用長柱進1.1檢測器高效液相色譜儀的檢測器有很多種,有行檢測分離,可通過提高分離時間,達到提高分離的效果。紫外檢測器(uv)、二極管陣列檢測器(PAD)、熒光檢測器1.3流動相流動相的選擇主要是其組成及不同組分(FD)、電化學檢測器(ECD)和示差折光檢測器(RID)等。比例的優(yōu)化,使得色譜分離效果最好[51。由于預混料主要是其中使用較多的是紫外檢測器(uv)和二極管陣列檢測器由載體,由添加少量多種維生素單體混合而成的,所以預(PADo混料中的維生素檢測較簡單。檢測不同的維生素,使用不紫外檢測器(uv)可檢測的波
8、長范圍較大,對大部分同的流動相。有機化合物有響應(yīng),因