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《類黃酮合成途徑結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)分析與中國(guó)水仙不能合成花青素原因的初步解析.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、。。．現(xiàn)代圍抹發(fā)育：生理、生化和分子調(diào)控，VDeveloDment：PhysiologyBiochemistryandMolecularRegulationModernLandscapeArchitecture,類黃酮合成途徑結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)分析與中國(guó)水仙不能合成花青素原因的初步解析ExpressionofFlavonoidBiosyntheticGenesinNarc~sustazettavar．Chinensis曾黎輝羅鵬吳雪琴ZengLihui,Lu。Peng，wu×ueqin福建農(nóng)林大學(xué)園藝學(xué)院
2、，福州350002ColegeofHorticulture，F(xiàn)u]ianAgncultureandForestryUniversity，F(xiàn)uzhou350002摘要：植物類黃酮合成途徑包括花青素、黃酮醇、原花青素等不同分支。為了解析中國(guó)水仙花色單一的原因，我們通過(guò)顯色反應(yīng)和HPLC分析了中國(guó)水仙(漳州水仙)不同器官中類黃酮的主要成分。結(jié)果顯示：花瓣和副冠中類黃酮的主要成分是黃酮醇；鱗莖盤(pán)中的主要成分是原花青素；幾個(gè)器官中都沒(méi)有花青素。因此，缺乏花青素可能是中國(guó)水仙花色單一的主要原因。為了進(jìn)一步了解中國(guó)
3、水仙不能合成花青素的原因，我們進(jìn)行了鱗莖盤(pán)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序。Denovo組裝出36，006個(gè)unigene，平均讀長(zhǎng)706bp。通過(guò)Blast數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)、序列分析等方法鑒定類黃酮合成途徑中表達(dá)的結(jié)構(gòu)基因，共獲得了4個(gè)NtCHS、2個(gè)NtCHI、3個(gè)NtF3H、3個(gè)NtUFGT、1個(gè)NtF3’、1個(gè)NtDFR和1個(gè)NtLAR；同時(shí)還獲得了與類黃酮代謝相關(guān)的調(diào)控因子MYB，6，_圮和WD40等基因。但沒(méi)有發(fā)現(xiàn)花青素合成途徑的～S基因以及原花青素合成分支途徑的ANR基因。通過(guò)qPCR研究獲得的16個(gè)結(jié)構(gòu)基因在中國(guó)
4、水仙全開(kāi)、半開(kāi)和花蕾期三個(gè)時(shí)期的花瓣、副冠以及葉片和鱗莖盤(pán)中的表達(dá)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在花瓣和副冠中NtDFR的表達(dá)量低，MFLS的表達(dá)量很高；鱗莖盤(pán)中NtDFR和NtLAR的表達(dá)量都很高?！玈的表達(dá)量低。結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)水平與這三種器官中類黃酮的主要成分相吻合。通過(guò)HPLC進(jìn)一步分析了鱗莖盤(pán)中原花青素單體的成分．發(fā)現(xiàn)主要是兒茶素單體(catechin)，說(shuō)明中國(guó)水仙鱗莖盤(pán)中經(jīng)過(guò)NtDFR作用生成無(wú)色花青素(IeucoanthDcvandin)后，直接在NtLAR的作用下合成原花青素，沒(méi)有經(jīng)過(guò)ANS和ANR的作
5、用步驟，與轉(zhuǎn)錄組測(cè)序中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)ANS和ANR基因表達(dá)相一致。因此我們推測(cè)，中國(guó)水仙花瓣和副冠中也缺少ANS基因的表達(dá)，沒(méi)有ANS基因的表達(dá)可能是中國(guó)水仙不能合成花青素的主要原因，有待進(jìn)一步驗(yàn)證。關(guān)鍵詞：中國(guó)水仙；類黃酮合成途徑；花青素；基因表達(dá)文章編號(hào)：1003—6997(2015)04—0295—02中圖分類號(hào)：S一3文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A作者簡(jiǎn)介曾黎輝／教授／博導(dǎo)／主要從事花卉遺傳育種與分子生物學(xué)收稿日期2015—03—10修回日期2015—03—10接收日期2015—03—10295現(xiàn)代圍林發(fā)育：生理、
6、生化和分子調(diào)控Abstract：Flavonoidbiosyntheticpathwayinplantsincludesseveralbranches．1ikeanthocyanin，flavonolandpr0anthOcyanidin．CompositionofflavonoidindifferenttissuesandorgansofNarcissustazettavar．Chinensis(ChinesenarcissusorZhangzhounarcissus)wasanalyzedbyco
7、lorreactionandHPLCanalysisTheresultsshowedthatthemaincomponentsinperianthandcoronawereflavonolsandinbasaIplatewerepr0anth0cyanidins．NoanthocyaninsweredetectedinNarcissustazettavarChinensis，whichisthekeyreasonwhyChinesenarcissusdoesn’thavecolorfulflowers
8、．High—thrOughputRNAsequencingwasperformedinChinesenarcissusBydenovoassembly，36，006unigeneswithanaveragelengthof706bpwereobtainedfromthecDNAlibraryofbasalplatesAfterblastingtopublicsequencedatabasesandsequenceanalysisflavonoidbios
