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1、66O陜西醫(yī)學(xué)雜志2015年6月第44卷第6期蒺藜總皂苷對(duì)大鼠肺缺血再灌注損傷后細(xì)胞凋亡的影響西安市中心醫(yī)院(西安710003)杜旭升黃妙毅劉志燕李建英摘要目的：探討蒺藜總皂苷(GSTT)對(duì)大鼠肺缺血再灌注損傷后細(xì)胞凋亡的影響。方法：建立在體肺缺血再灌注模型。將3O只大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組(C組)，缺血再灌注組(IR組)，蒺藜總皂苷組(G組)。每組分別在再灌120min時(shí)處死10只大鼠，留取右肺組織，原位細(xì)胞凋亡檢測(cè)(TUNEL)法檢測(cè)肺組織中細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)及免疫組化法檢測(cè)肺組織Bcl一2、Bax蛋白的表達(dá)。結(jié)果：
2、IR組肺組織AI、Bax／Bcl一2的表達(dá)均明顯升高，而預(yù)先給予GSTT干預(yù)后，G組均可以減弱缺血再灌注誘導(dǎo)上述指標(biāo)的變化。結(jié)論：GSTT可通過(guò)下調(diào)Bax／Bcl一2蛋白表達(dá)，從而抑制細(xì)胞凋亡，對(duì)肺缺血再灌注損傷起到保護(hù)作用。主題詞肺再灌注損傷細(xì)胞凋亡基因，bcl一2@蒺藜總皂苷【中圖分類(lèi)號(hào)】R563．9【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】Adoi：10．3969／j．issn．1000—7377．2015．06．007Theeffectsofgrosssaponinfromtribulusterrestrisonapoptosisinlun
3、gischemia—reperfusioninjuryXi’anCentralHospital(Xian710003)DuXushengHuangMiaoyiLiuZhiyanetalABSTRACTObjective：Toinvestigatetheeffectsofgrosssaponinfromtribulusterrestris(GSTT)onpneumoeyteapoptosisinlungisehemia—reperfusioninjury．Methods：Thirtyhealthyratswererando
4、mlydividedintothreegroups：Cgroup，IRgroup，Ggroup．After120minreperfusion，TUNELassaywasappliedtodetectlungapop—toticindex(AI)andimmunohistoehemicalSPtechniquewasusedtodetecttheexpressionsofBcl一2andBaxprotein．Results：GSTTcoulddecreaseAI(P~O．05)，andlowerBaxproteinexpr
5、ession(P<0．05)．Conclusion：GSTTcanre—ducelungapoptosisthroughregulatingproteinexpressionsofBcl2andBax，SOthatitprovidessignificantprotectiveeffectsonlungischemia—reperfusioninjury．KEYWoRDSLungReperfusioninjuryApoptosisGenes，bcl2@Tribulusterrestris現(xiàn)已證實(shí)，細(xì)胞凋亡在肺缺血再灌注損傷
6、(LIR1)d，連續(xù)10d，第1O次灌胃后1h行手術(shù)，其余操作同中起著重要作用，過(guò)度凋亡可引起肺組織損傷，蒺藜總IR組。C組和IR組采用與G組相同時(shí)點(diǎn)與方法灌人皂苷(GSTT)可通過(guò)抑制細(xì)胞凋亡而對(duì)心肌及缺血再等量生理鹽水。②模型的建立：采取既往研究的建模灌注后腦組織起到保護(hù)作用n]。本研究擬通過(guò)觀察方法lL2]，制成在體肺缺血再灌注模型，各組分別于再灌GSTT對(duì)LIRI時(shí)細(xì)胞凋亡及其相關(guān)蛋白Bax／Bcl一2120min后處死大鼠，留取右肺中葉作為標(biāo)本。③肺組的影響，并探討其可能機(jī)制?？椉?xì)胞凋亡指數(shù)(AI)檢測(cè)：采用原
7、位缺口末端標(biāo)記法材料與方法(TUNEL)，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)對(duì)右肺中葉凋亡細(xì)胞進(jìn)1材料心腦舒通膠囊(蒺藜總皂苷粉，吉林行定量檢測(cè)，細(xì)胞核呈棕黃色為陽(yáng)性細(xì)胞，高倍鏡下敖東洮南藥業(yè)公司)，凋亡檢測(cè)試劑(POD，北京中山生(×400)隨機(jī)選擇10個(gè)視野觀察陽(yáng)性細(xì)胞，AI即為陽(yáng)物技術(shù)有限公司)，Bcl一2、Bax抗體(美國(guó)Santacruz公性細(xì)胞所占百分?jǐn)?shù)。④免疫組化sABC法檢測(cè)肺組織司)，SABC過(guò)氧化物酶試劑盒購(gòu)自武漢博士德公司，Bcl一2、Bax蛋白：肺組織切片常規(guī)脫蠟，3HO阻斷PBS緩沖液：自行配制，每升中含8gNa
8、C1，0．2gKC1，內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，復(fù)合消化液暴露抗原，封閉非特異1．44gNa2HPO，0．24gKH2PO，pH調(diào)至7．4，余為性抗原后滴加1：100稀釋的i抗，37℃1h，陰性對(duì)照市售純?cè)噭?O只雄性Wistar大鼠，體重220～240g為PBS替代1抗；滴加山羊抗兔II抗IgG，37℃(山西醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物
