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1、江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)2014年第42卷第11期．——327．——張明明，黃芳，張長麗．響應(yīng)面法優(yōu)化野菊花中綠原酸的提取工藝[J]．江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42(11)：327—329doi：10．15889／j．issn．1002—1302．2014．11．116響應(yīng)面法優(yōu)化野菊花中綠原酸的提取工藝張明明，黃芳，張長麗(南京曉莊學(xué)院生物化工與環(huán)境工程學(xué)院，江蘇南京211171)摘要：以野菊花為原料，研究綠原酸最佳提取工藝條件。在乙醇濃度、液固比、提取時間等單因素試驗的基礎(chǔ)上，根據(jù)Box—Behnken中心組合試驗設(shè)計原理，應(yīng)用響應(yīng)面分析法對野
2、菊花中綠原酸提取工藝進行優(yōu)化。結(jié)果表明，超聲波輔助提取野菊花中綠原酸的最佳工藝條件為：乙醇濃度80％、液固比26mL：1g、提取時間35min。在該條件下，綠原酸實際提取率達2．32％，與模型預(yù)測值(2．35％)接近。關(guān)鍵詞：野菊花；綠原酸；超聲波提??；響應(yīng)曲面法中圖分類號：R284．2文獻標志碼：A文章編號：1002—1302(2014)11—0327—03野菊花(Chrysanthemumindicum)別稱山菊花、甘菊花，為設(shè)置一定的超聲溫度、超聲功率、超聲時間，提取一定次數(shù)后菊科多年生草本植物，外形與菊花相似，野生l千山坡草地
3、、田過濾。濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮，定容至50mL，得到綠原酸邊路旁，具有疏風(fēng)清熱、消腫散熱、抗菌消炎、降血壓等多種藥提取液，測定其吸光度，分析綠原酸含量，計算綠原酸提取率。理作用”_2_。綠原酸是菊花中的一種重要成分，屬酚類化合1．2．2綠原酸含量的測定準確稱取綠原酸標準品，用乙醇物，具有抗菌、降壓、降脂、抗病毒、抗腫瘤、保肝利膽、促進腸配制成濃度為0．1mg／mL的儲備液。分別吸取上述溶液道蠕動、清除自由基、興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)等多種生物活性，是0．10、0．30、0．50、1．00、1．50、2．00、2．50mL于10mL容量瓶菊科
4、植物中的主要藥理成分之一。目前，綠原酸提取工中，定容搖勻。以乙醇為參照，在綠原酸的最大吸收波長藝主要有水浴提取法、乙醇回流法、超聲提取法、微波提取法、327nm下依次測定吸光度。以綠原酸濃度C為橫坐標、吸光超臨界流體萃取法等。本試驗采用超聲波輔助提取野度D為縱坐標進行回歸分析，繪制標準曲線，標準曲線方程菊花中綠原酸，并用響應(yīng)面試驗法對其提取工藝進行優(yōu)化，為為D=41．757C+0．0387，相關(guān)系數(shù)r=0．999l，可見綠原酸工業(yè)化提取野菊花中綠原酸提供了參考。濃度在0．001—0．025mg／mL范圍內(nèi)與吸光度D呈良好的線性關(guān)系。將
5、提取的綠原酸稀釋一定倍數(shù)，再在327nm下測定1材料與方法吸光度，根據(jù)標準曲線及公式(1)計算綠原酸的提取率(Y)：1．1儀器與試劑y=CVn／m×100％。(1)AUY120電子天平(日本島津)；UV2450紫外分光光度計式中：C表示綠原酸濃度，mg／mL；V表示體積，L；n表示稀釋(日本島津)；KQ一200KDB高功率速控超聲清洗器(江蘇省倍數(shù)；m表示野菊花粉末的質(zhì)量，g。昆山市超聲儀器有限公司)；RE一52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮1．2．3單因素試驗分別以乙醇濃度、液固比、超聲時間、超生化儀器設(shè)備有限公司)；SHB一Ⅲ循環(huán)水式多用
6、真空泵(河聲溫度、超聲功率等為因素，考察各因素對綠原酸提取率的南鄭州長城科工貿(mào)有限公司)。影響。野菊花購于南京中藥材市場，去除苞片后35℃干燥，粉1．2．4響應(yīng)面試驗設(shè)計在單因素試驗的基礎(chǔ)上，選擇乙醇碎，過40目篩，備用。綠原酸標準品(中國藥品生物制品檢濃度、液固比、提取時間3個因素作為考察對象，以綠原酸提定所)，無水乙醇(分析純)，試驗用水均為二次蒸餾水。取率為響應(yīng)值，采用DsignExpert7．0統(tǒng)計分析軟件中的1．2試驗方法Box—behnken中心組合試驗設(shè)計，對提取條件進行優(yōu)化。具1．2．1綠原酸的提取工藝準確稱取2g干燥
7、的野菊花粉體試驗因素水平及編碼見表1。末于燒杯中，加入80％乙醇溶液，在超聲清洗器中超聲提取，表1響應(yīng)面法優(yōu)化野菊花中綠原酸的提取工藝設(shè)計收稿日期：2014—01—17基金項目：江蘇省高校自然科學(xué)研究項目(編號：13KJD150001)；南京曉莊學(xué)院科研項目(編號：2012NXY18)；江蘇省大學(xué)生實踐創(chuàng)新訓(xùn)練計劃。作者簡介：張明明(1992一)，男，江蘇射陽人，主要從事應(yīng)用化學(xué)研2結(jié)果與分析究。E—mail：zhangmingming@163．oom。通信作者：黃芳(1978一)，女，貴州貴陽人，碩士，講師，主要從事天2．1單因素試
8、驗然產(chǎn)物提取與分析研究。Tel：(025)86178264；E—mail：2．1．1乙醇濃度對綠原酸提取率的影響由圖1可知，隨乙fanghuang1998@163．tom。醇濃度的增加，綠原酸提取率先迅速增加后降低。當乙
