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1、某規(guī)模豬場(chǎng)豬偽狂犬病的診斷湯起武,蔣大良,劉崇靈,王淑琴,李潤成,余興龍(湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,湖南長沙410128)摘要:本文針對(duì)一規(guī)模豬場(chǎng)哺乳仔豬發(fā)病死亡情況,根據(jù)該場(chǎng)發(fā)病仔豬的臨床表現(xiàn)、解剖病變,結(jié)合PCR診斷、家兔接種實(shí)驗(yàn)以及病毒分離,診斷為偽狂犬病毒野毒感染,最后對(duì)該豬場(chǎng)發(fā)病的原因以及防控對(duì)策進(jìn)行了討論分析。關(guān)鍵詞:豬偽狂犬?。籔CR;動(dòng)物接種試驗(yàn);病毒分離中圖分類號(hào):$855-3文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B文章編號(hào):1005—944X(2013)09—0045-03DiagnosisofPseudorabiesinaLargeScalePigFarmTang
2、Qiwu,JiangDaliang,LiuChongling,WangShuqin,LiRuncheng,YuXinglong(VeterinaryFaculty,HunanAgriculturalUniversity,Changsha410128,China)Abstract:Inthispaper,PCRdiagnosis,rabbitinoculationtest,andvirusisolationandidentificationtestwereusedtofigureoutthedeathreasonofsucklingpigletsinalarg
3、escalepigfarm.Theresultsshowedthatthedeathcasesofsucklingpigletswereconsideredasbeinginfectedwithwildporcinepseudorabiesvirus.Thepreventionandcontrolofthediseasewasdiscussedaswel1.Keywords:PorcinePseudorabies;PCR;Animalinoculationtest;viresisolation豬偽狂犬病是由偽狂犬病毒(PRV)引起的一齡以下的發(fā)病小豬5頭。剖
4、檢發(fā)現(xiàn)7.15日齡小豬病變種急性傳染病。感染豬的臨床特征為體溫升高,新不明顯,但7日齡以下小豬均表現(xiàn)腦膜有明顯出血點(diǎn),生仔豬主要表現(xiàn)神經(jīng)癥狀,還可侵害消化系統(tǒng)。成肝、脾有白色壞死點(diǎn),腎有針尖狀出血點(diǎn),肺有出血點(diǎn)。年豬呈隱性感染,妊娠母豬感染后可表現(xiàn)流產(chǎn)、死2實(shí)驗(yàn)室診斷胎及呼吸癥狀。公豬表現(xiàn)為繁殖障礙和呼吸系統(tǒng)癥2.1引物的設(shè)計(jì)與合成狀?。本病的傳染源主要是帶毒豬和其它帶毒動(dòng)根據(jù)GenBank登錄的PRVgE基因序列(基物,病豬可通過分泌物排出病毒,污染豬舍,使健因登錄號(hào):M14336),應(yīng)用計(jì)算機(jī)Primer軟件設(shè)康豬群感染。本病也可以發(fā)生于其他家畜和野生計(jì)
5、了擴(kuò)增gE基因的特異性引物,目的片段大小動(dòng)物,在自然條件下能感染豬、牛、羊、犬、貓、兔、為363bp。引物由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有鼠、野豬、貂、熊、狐等動(dòng)物J。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中家兔、限公司合成,引物序列為:上游引物(gI/Efp):豚鼠、小鼠都易感,其中以家兔最為敏感。TTGTGGGTGGCGTTT1ATCTCCGTC;下游引物1病例介紹(gUErp):AAGTTGGCGCCCTCGGACACGTTC。2012年6月,湖南岳陽某500頭母豬的規(guī)模豬場(chǎng),2.2病料樣品DNA的提取7.15日齡哺乳仔豬發(fā)病,體溫達(dá)41℃以上,皮膚略顯從5頭7日齡以下發(fā)病小豬病料中隨
6、機(jī)選出4紅黃色。2天后2.7日齡小豬也出現(xiàn)發(fā)病癥狀,少數(shù)病份,進(jìn)行PRV檢測(cè),樣品DNA的提取參照文獻(xiàn)進(jìn)行。豬有腹瀉癥狀,病豬均表現(xiàn)出明顯的神經(jīng)癥狀、昏睡、2.3PRV的PCR擴(kuò)增嗚叫、嘔吐、拉稀,最后死亡;少數(shù)懷孕母豬出現(xiàn)體取設(shè)計(jì)的引物,以提取的基因組DNA為模板溫升高,食欲下降,至送檢當(dāng)天有6頭母豬出現(xiàn)了流進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR體系為:基因組模板0.5pL,產(chǎn)現(xiàn)象。豬場(chǎng)送檢了7.15日齡的發(fā)病小豬4頭,7日dNTP(2.5retool/L)O.5uL,上游和下游引物(10umol/■