微小RNA-21在順鉑聯(lián)合5-氟尿嘧啶抑制肺癌細胞株作用中的表達變化.pdf

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1、實用老年醫(yī)學(xué)2014年2月第28卷第2期PractGeriatr，F(xiàn)eb．2014，Vo1．28，No．2121微小RNA一21在順鉑聯(lián)合5一氟尿嘧啶抑制肺癌細胞株作用中的表達變化肖霞李樹春吳建中馬蓉曹海霞馮繼鋒【摘要】目的探討順鉑和5一氟尿嘧啶在體外聯(lián)合用藥對肺癌細胞株A549細胞存活率、細胞周期的影響以及在這過程中微小RNA一21(microRNA一21，miR一21)表達水平的變化。方法順鉑和5一氟尿嘧啶單藥或聯(lián)合用藥處理肺癌A549細胞后，采用CCK．8法檢測細胞存活率；倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)變化；流式細胞儀技術(shù)檢測細胞周期；實

2、時熒光定量PCR檢測miR．21的表達變化。結(jié)果順鉑和5一氟尿嘧啶單藥對A549細胞的抑制作用都具有濃度依賴性，兩者聯(lián)合用藥48h后細胞的存活率明顯低于單藥組(P<0．05)，并且細胞形態(tài)改變更加明顯，懸浮、變圓的細胞也更多；順鉑處理A549細胞后，將細胞阻滯于S期和G：期，5一氟尿嘧啶阻滯A549細胞于S期，聯(lián)合用藥后細胞阻滯于s期和G，期；隨著順鉑和5一氟尿嘧啶作用濃度的增加，miR一21的表達水平上調(diào)，聯(lián)合用藥后miR．21的表達亦上調(diào)，但趨勢沒有順鉑組明顯(P

3、有協(xié)同作用，同時可以上調(diào)細胞內(nèi)miR一21表達水平。【關(guān)鍵詞】順鉑；5-氟尿嘧啶；微小RNA一21；非小細胞肺癌；A549細胞[中圖分類號]R734．2[文獻標(biāo)識碼]Adoi：10．3969／j．issn．1003—9198．2014．02．009DiferentialexpressionofmiR-21inthesuppressionofA549cellswithcisplatinand5-fluorouracilX1AOXia．Jian—zhong，MARong，CAOHai—xia，F(xiàn)ENGJi-feng．NanjingMedic

4、alUniversityAffiliatedCancerHospital，Nanjiag210009，China；LIShu—chun．NanjingUniversityofTechnology，Nanjing210009，China【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectofcisplatinincombinationwith5-fluorouracilinvitroontheviabili—ty．cellcycleandmiR一21expressionlevelofA549cells．Met

5、hodsTheinhibitoryeffectofcisplatin，5一fluorouracil，cis—platinincombinationwith5-fluorouracilontheviabilityofA549cellsweretestedbyCCK一8assayinvitro．Thechangeofcellmorphologywasobservedwithinve~edmicroscope，whilecellcyclewasassayedbyflowcytometry．TheexpressionofmiR一21wasmea

6、suredbyreal-timequantitativePCR．ResultsThegrowthofA549cellswasinhibitedbycisplatininadose—dependentmanner，aswellas5-fluorouracil．Thesuppressionratioofthecombinedgrouptreatedwithcisplatincon—binedwith5-fluorouracilwashigherthanthatofthesingledruggroup(P<0．05)；Thechangeofc

7、ellmorphologyofcombi—nationgroupwasmoreapparentthanthatofthemonotherapygroup，andmoresuspensionandroundcellswereobserved．CisplatinarrestedA549cellcycleatSandG2phase．In5-fluorouracilgroup，cellswerearestedatSphase．Incombinationgroup，GlphasecellsdecreasedwhileS／G2phasecellsi

8、ncreased．Withtheincreaseoftheconcentrationofcisplatinand5一flaorouracil，theexpressionlevelofmiR一21wasinc