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《熒光原位雜交技術(shù)在臨床病埋中的應(yīng)用.ppt》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、熒光原位雜交技術(shù)(FISH)在臨床病理中的應(yīng)用與質(zhì)控廣西至科大學(xué)一附院病理科王華熒光原位雜交技術(shù)(FISH):用帶有熒光素標(biāo)記的核酸探針與組織細(xì)胞中待測(cè)的核酸(DNA、RNA)按堿基配對(duì)的原則進(jìn)行特異性結(jié)合,在熒光顯微鏡下顯示細(xì)胞基因狀態(tài)的方法。FISH在臨床病理中的應(yīng)用輔助病理診斷、判斷預(yù)后、指導(dǎo)臨床治療一、常用熒光素及濾光片類型熒光素顏色激發(fā)波長(zhǎng)發(fā)射波長(zhǎng)常用濾光片Red(紅色)592612Red單通道Orange(橙色)559588Orange單通道G/O雙通道Green(綠色)497524Green單通道G/O雙通道Aqu
2、a(青藍(lán)色)433480Aqua單通道DAPI(藍(lán)色)367452Blue單通道二、常用探針?lè)N類單色探針(singlecolorprobe,SC)雙色探針(dualcolorprobe,DC)三色探針(triplecolorprobe,TC)雙色分離探針(dualcolor,breakapartprobe.DC,BCR)雙色單融合探針(dualcolor,singlefusion.DC,SFTrans)額外信號(hào)探針(extrasignal.ES)雙色雙融合探針(dualcolor,dualfusionprobe.DC,DFTran
3、s)單色探針(SC)正常異常CEP8雙色探針(DC)正常異常HER2CEP17三色探針(TC)正常異常XYCEP18雙色分離探針(DC,BCR)正常異常MYCMYC14181418雙色單融合探針(DC,SFTrans)正常異常ABLABL922922BCRBCR額外信號(hào)探針(ES)正常異常ABLABL922922BCRBCR雙色雙融合探針(DC,DFTrans)正常異常IGHIGH14181418BCL2BCL2三、FISH檢測(cè)在常見(jiàn)腫瘤中的應(yīng)用與意義乳腺癌探針:HER2/CSP17(雙色探針)HER2基因檢測(cè)意義:HER2基目
4、擴(kuò)增的患者預(yù)后差:無(wú)病生存和總生存期縮短,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移幾率高,復(fù)發(fā)鳳險(xiǎn)高。指導(dǎo)內(nèi)分泌冶療:HER2基因擴(kuò)增患者對(duì)內(nèi)分泌治療產(chǎn)生耐藥。指導(dǎo)合理選擇輔助化療方案:HER2基因擴(kuò)增患者宜采用紫杉醇化療和高強(qiáng)度的蒽環(huán)類藥物方案。篩選分子靶向藥物的適用者:HER2基因擴(kuò)增患者適合使用曲妥珠單抗藥物。Her2(-)2G+2RRatio:1/1<2.2/1,Her2FISH(-)Her2(+++)Ratio:>2.2/1,Her2FISH(+)探針:TOP2A/CSP17(雙色探針)TOP2A基因兩種異常:擴(kuò)增和缺失。TOP2A基因檢測(cè)的意義:存
5、在TOP2A基因異常的患者預(yù)后差,尤其是基因缺失的患者預(yù)后更差。TOP2A基因異?;颊邔?duì)于含蒽環(huán)類藥物的治療方案更敏感。非小細(xì)胞肺癌探針:EGFR/CSP7(雙色探針)EGFR基因異常:擴(kuò)增和拷貝數(shù)增加。EGFR基因檢測(cè)的意義:30%~40%非小細(xì)胞肺癌存在EGFR基因異常.篩選酪氨酸激酶抑制劑適用者:EGFR基因增多的患者,應(yīng)用Iressa/Tarceva治療的有效率為35%,疾病控制率高達(dá)70%。EGFR(-)2G+2RRatio:<2.0,EGFRFISH(-)EGFR(+)Ratio:>2.0,EGFRFISH(+)濾泡性
6、淋巴瘤探針:BCL2/IGH(雙色雙融合探針)BCL2基因位于18q21,IGH基因位于14q32.BCL2/IGH融合基因?qū)е翨CL2蛋白的過(guò)度表達(dá),從而抑制B細(xì)胞凋亡,使B細(xì)胞持續(xù)增殖引發(fā)腫瘤。BCL2/IGH融合基因檢測(cè)意義:輔助診斷FL:BCL2/IGH重排發(fā)生在約80%-85%的FL患者中。BCL2/IGH持續(xù)陰性的FL患者3年生存率為100%,而陽(yáng)性者3年生存率只有54%;陰性者3年疾病無(wú)進(jìn)展的患者87.5%,而陽(yáng)性者只有13%。BCL2/IGH正常BCL2/IGH斷裂、平衡易位彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤探針:BCL6(雙色
7、分離探針)BCL6基因位于3q27,主要有t(3;14),t(3;22)和t(2;3)3種易位,分別是BCL6與免疫球蛋白Ig的重鏈(IGH)、λ輕鏈(IGL)、κ輕鏈(IGK)區(qū)域易位。BCL6基因斷裂檢測(cè)意義目前研究確定至少40%的DLBCL涉及3q27染色體易位或者BCL6基因重排。BCL6陽(yáng)性患者診斷治療36個(gè)月后,疾病停止發(fā)展的比率為82%,攜帶有BCL6重排的病例預(yù)后較好。BCL6斷裂BCL6正常套細(xì)胞淋巴瘤探針:CCND1/IGH(雙色雙分離探針)CCND1基因位于11q13,IGH基因位于14q32。CCND1/I
8、GH融合基因?qū)е翪CND1蛋白過(guò)度表達(dá),可促進(jìn)細(xì)胞增生。CCND1/IGH融合基因檢測(cè)意義CCND1基因重排和(或)高表達(dá)是MCL的特征,F(xiàn)ISH探針檢測(cè)CCND1/IGH的陽(yáng)性率可以達(dá)到96%。CCND1/IGH正常CCND1/IGH斷裂易位伯基