淀粉的國標(biāo)測(cè)定方法.doc

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1、淀粉的國標(biāo)測(cè)定方法測(cè)定食物中淀粉的方法有酶水解法、酸水解法、可消化淀粉和抗性淀粉的測(cè)定方法（酶-直接法）一、酶水解法1.原理樣品經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類后，其中淀粉用淀粉酶水解成雙糖，再用鹽酸將雙糖水解成單糖，最后按還原糖測(cè)定，并折算成淀粉。2.適用范圍GB5009.9-85，適用于所有含淀粉的食物。3.儀器（1）回流冷凝器（2）水浴鍋4.試劑除特殊說明外，實(shí)驗(yàn)用水為蒸餾水，試劑為分析純。（1）乙醚（2）0.5%淀粉酶溶液：稱取淀粉酶（Sigma公司，E.C3.2.1.1）0.5g，加100ml水溶解，加入數(shù)滴

2、甲苯或三氯甲烷，防止長霉，貯于冰箱中。（注：配成溶液的淀粉酶破壞很快，最好鄰用現(xiàn)配。）（3）碘溶液：稱取3.6g碘化鉀溶于20ml水中，加入1.3g碘，溶解后加水稀釋至100ml。（4）85%乙醇。（5）其余試劑同《蔗糖測(cè)定方法》5.操作方法5.1樣品處理稱取2～5g樣品，置于放有折疊濾紙的漏斗內(nèi)，先用50ml乙醚分5次洗除脂肪（注：如果脂肪含量少，此步驟可免），再用約100ml85%乙醇洗去可溶性糖類（注：此步驟目的是去除可溶性糖），將殘留物移入250ml燒杯內(nèi)，并用50ml水洗濾紙及漏斗，洗液并入燒杯內(nèi)，

3、將燒杯置沸水浴上加熱15min，使淀粉糊化，放冷至60℃以下，加20ml淀粉酶溶液，再55～60℃保溫1h，并時(shí)時(shí)攪拌（注：溫度過高，淀粉酶的活性破壞）。然后取1滴此液加1滴碘溶液，應(yīng)不現(xiàn)蘭色，若顯蘭色，再加熱糊化并加20ml淀粉酶溶液，繼續(xù)保溫，直至加碘不顯蘭色為止。加熱至沸，冷后移入250ml容量瓶中，并加水至刻度，混勻，過濾。（注：此時(shí)淀粉已水解成雙糖，過濾可去除殘?jiān)屠w維素）棄去初濾液，取50ml濾液，置于250ml錐形瓶中，加5ml6mol/L鹽酸，裝上回流冷凝器，在沸水浴中回流1h，冷后加2滴甲基

4、紅指示劑，用5mol/L氫氧化鈉溶液中和至中性，溶液轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中，洗滌錐形瓶，洗液并入100ml容量瓶中，加水至刻度，混勻備用。（淀粉在沸水浴條件下糊化是淀粉水解的第一步反應(yīng)，然后在淀粉酶的作用下，分解成短鏈淀粉、糊精、麥芽糖等低聚合的糖，所以在淀粉酶解后需用酸進(jìn)一步水解得到葡萄糖。）5.2測(cè)定按《還原糖的測(cè)定方法》操作。同時(shí)量取50ml水及與樣品處理時(shí)相同量的淀粉酶溶液，按同一方法做試劑空白試驗(yàn)。6.計(jì)算?　X1=??????????（A1-A2）×0.9???????????????×100??

5、……………（1）m1×?V1?×?V3?×1000V2100式中：X1--樣品中淀粉的含量，%；A1--測(cè)定用樣品中還原糖的含量。Mg；A2--試劑空白中還原糖的含量，mg；0.9--還原糖（以葡萄糖計(jì)）換算成淀粉的換算系數(shù)；m1--稱取樣品質(zhì)量，g；V1--水解用樣品溶液體積，ml；V2--樣品定容總體積，ml；V3--測(cè)定用樣品處理液的體積，ml。二、酸水解法1.原理樣品經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類后，其中淀粉用酸水解成具有還原性的單糖，然后按還原糖測(cè)定，折算成淀粉。2.適用范圍本法適用于含淀粉的食物3.儀器（

6、1）水浴鍋。（2）高速組織搗碎機(jī)：1200rpm。（3）皂化裝置并附250ml錐形瓶。4.試劑除特殊說明外，實(shí)驗(yàn)用水為蒸餾水，試劑為分析純。（1）乙醚。（2）85%乙醇溶液。（3）6mol/L鹽酸溶液。（4）10mol/L氫氧化鈉溶液。（5）2.5mol/L氫氧化鈉溶液。（6）甲基紅指示液：0.2%乙醇溶液。（7）精密pH試紙。（8）20%乙酸鉛溶液，（9）10%硫酸鈉溶液。（10）其余試劑同還原糖的測(cè)定。5.操作方法5.1樣品處理5.1.1糧食、豆類、糕點(diǎn)、餅干等較干燥的樣品：稱取2.0～5.0g磨碎過40

7、目篩的樣品，置于放有慢速濾紙的漏斗中，用30ml乙醚分三次洗去樣品中脂肪，棄去乙醚。再用150ml85%乙醇溶液分?jǐn)?shù)次洗滌殘?jiān)?，除去可溶性糖類物質(zhì)。并濾干乙醇溶液，以100ml水洗滌漏斗中殘?jiān)⑥D(zhuǎn)移至250ml錐形瓶中，加入30ml6mol/L鹽酸，接好冷凝管，置沸水浴中回流2h。回流完畢后，立即置流水中冷卻。待樣品水解冷卻后，加入2滴甲基紅指示劑，先以40%氫氧化鈉溶液調(diào)至黃色，再以6mol/L鹽酸校正至水解液剛變紅色為宜。若水解液顏色較深，可用精密pH試紙測(cè)試，使樣品水解液的pH約為7。然后加20ml20

8、%乙酸鉛溶液，搖勻，放置10min。再加20ml10%硫酸鈉溶液，以除去過量的鉛。搖勻后將全部溶液及殘?jiān)D(zhuǎn)入500ml容量瓶中，用水洗滌錐形瓶，洗液合并于容量瓶中，加水稀釋至刻度。過濾，棄去初濾液20ml，濾液供測(cè)定用。5.1.2蔬菜、水果、各種糧豆含水熟食制品：按1：1加水在組織搗碎機(jī)種搗成勻漿（蔬菜、水果需先洗凈、涼干，取可食部分）。稱取5～10g勻漿（液體樣品可直接量?。?50ml錐形瓶中