獸用疫苗保護劑和佐劑.ppt

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1、獸用疫苗凍干保護劑和佐劑凍干保護劑（穩(wěn)定劑）保護劑：又稱穩(wěn)定劑（stabilizer），是指一類能防止生物活性物質(zhì)在冷凍真空干燥時受到破壞的物質(zhì)。（指對疫苗生產(chǎn)、血清制備等）保護劑用途（不同用途加不同保護劑,主要針對活的微生物或細(xì)胞）①菌種或毒種保存：常用甘油作保護劑②細(xì)胞株保存：常用二甲基亞砜(DMSO)DMSO:二甲基亞砜，一種細(xì)胞的保護劑③疫苗冷凍真空干燥制備時：加脫脂乳（或二甲基亞砜）和蔗糖等（不同國家有不同配方）④干擾素類生物活性物質(zhì)的保存：加葡聚糖保護劑（protector）的分類分類：（根據(jù)其作用機理）——滲透劑：如二甲基亞砜（DMSO

2、）、甘油和蔗糖等——非滲透劑：如聚乙烯吡咯啶酮(PVP)和蛋白質(zhì)等（根據(jù)其分子量大小）——高分子物質(zhì)、低分子物質(zhì)。（按其化學(xué)性質(zhì)）——復(fù)合物、糖類、鹽類、醇類、酸類和聚合物復(fù)合物脫脂乳、明膠、蛋白質(zhì)、蛋白胨、糊精、血清、甲基纖維素等糖類蔗糖、乳糖、麥芽糖、葡萄糖、果糖等鹽類乳酸鈣、谷氨酸鈉、氯化鈉、氯化鉀、醋酸銨、硫代硫酸鈉等醇類山梨醇、甘油、甘露醇、肌醇、木糖醇等酸類檸檬酸、酒石酸、氨基酸等聚合物葡聚糖、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等一些常用的冷凍干燥保護劑分類保護劑疫苗凍干保護劑組成1.營養(yǎng)液：可修復(fù)因凍干而受損的細(xì)胞，使凍干制品含有一定量

3、水分；可促進高分子物質(zhì)形成骨架，使凍干制品呈多孔的海綿狀，增加溶解度2.賦形劑：防止低分子物質(zhì)的碳化和氧化，保護活性物質(zhì)不受加熱影響使凍干制品形成多孔性、疏松的海綿狀物，增加溶解度3.抗氧化劑：抑制凍干制品中的酶作用，增加生物活性物質(zhì)在凍干后貯存期間的穩(wěn)定性，如維生素C、維生素E和硫代硫酸鈉等。①防止活性物質(zhì)失去結(jié)構(gòu)水及阻止結(jié)構(gòu)水形成結(jié)晶而導(dǎo)致生物活性物質(zhì)的損傷；②降低細(xì)胞內(nèi)外的滲透壓差、防止細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)水結(jié)晶，以保持細(xì)胞的活力；③保護或提供細(xì)胞復(fù)蘇所需的營養(yǎng)物質(zhì)，有利于生活力的復(fù)蘇和迅速修復(fù)自身。凍干保護劑作用機制二、影響保護劑效能的因素1、保護劑種

4、類:根據(jù)微生物種類或者用途來添加不同種類保護劑。２、保護劑濃度：嚴(yán)格按照配方執(zhí)行。３、保護劑配制方法：糖類不能用121℃高壓滅菌處理。４、保護劑酸堿度（PH值）：主要對M的影響。三、常用的凍干保護劑（穩(wěn)定劑）明確不同種類微生物需要添加不同保護劑（一）細(xì)菌的保護劑①需氧或兼氧厭氧菌：５％蔗糖脫脂乳或５％蔗糖、1.5％明膠；②厭氧性細(xì)菌：含1.5％谷氨酸鈉的１％乳糖或10％脫脂乳或7.5％葡糖血清。注：脫脂乳：20％脫脂奶粉溶于水配制而成。（二）病毒的保護劑①5%蔗糖脫脂乳；②馬立克814活細(xì)胞疫苗:保存液氮.穩(wěn)定劑為10%二甲基亞砜和50%犢牛血清的1

5、99液。注意:微生物保護劑緩沖液的組成比例，不同廠家有不同的配方。1．5%蔗糖（乳糖）脫脂乳保護劑蔗糖（或乳糖）5g，加脫脂乳至100ml，充分溶解后，110~116℃高壓滅菌30~40min。2．明膠蔗糖保護劑明膠2%~3%（g/m1）、蔗糖5%（g/m1）、硫脲1%~2%（g/m1）。先將12%~18%明膠液、30%蔗糖液和6%~12%硫脲液加熱溶解，116℃高壓滅菌30~40min；3．SPGA保護劑獸醫(yī)生物制品常用的保護劑蔗糖76.62g、磷酸二氫鉀0.52g、磷酸氫二鉀1.64g、谷氨酸鈉0.83g、牛血清白蛋白10g、加去離子水至1000

6、ml，混合溶解，過濾除菌。免疫佐劑一、佐劑概念與作用機理1.佐劑（新概念）：凡是可以增強抗原特異性免疫應(yīng)答的物質(zhì)稱為佐劑。佐劑（舊概念）：當(dāng)一種物質(zhì)先于抗原或與抗原混合或同時注射于動物體內(nèi)，能非特異性地改變或增強機體對該抗原的特異性免疫應(yīng)答,發(fā)揮其輔佐作用的物質(zhì).以前作為佐劑使用時沒有免疫原性，但現(xiàn)在有所改變，如IL-2是佐劑和IL-8一類細(xì)胞因子佐劑卻不一樣,具有免疫調(diào)節(jié)和免疫增強作用,單獨使用時卻具有免疫原性。注意:佐劑和免疫增強劑的關(guān)系?有時佐劑也是免疫增強劑.作用特點：①明顯增強抗原性微弱的物質(zhì)誘導(dǎo)機體產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答。②用最少的抗原和最少

7、的接種次數(shù)，產(chǎn)生足夠的免疫應(yīng)答。免疫佐劑作用機理①改變正常免疫機能，吸引大量巨噬細(xì)胞以吞噬抗原；②改變抗原的構(gòu)型，使抗原物質(zhì)降解，并加強其免疫原性；③延長抗原在組織內(nèi)的貯存時間，使抗原緩慢降解和緩釋，并發(fā)揮免疫系統(tǒng)的細(xì)胞間協(xié)同作用（巨噬細(xì)胞與T細(xì)胞，T細(xì)胞與B細(xì)胞）。作用方式①抗原遞呈（antigenpresentation）②抗原尋的（antigentargeting）③免疫調(diào)節(jié)（immunemodulation）作用機理①抗原遞呈：指抗原分子遞呈給T細(xì)胞的方法。佐劑與疫苗聯(lián)合使用，有助于抗原性物質(zhì)在胞內(nèi)被加工，被MHC分子特異性的結(jié)合、保護、運輸

8、并遞呈給效應(yīng)細(xì)胞。②抗原尋的（antigentargeting）指抗原傳遞給免疫系統(tǒng)中適當(dāng)效應(yīng)細(xì)胞的效率。包