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《實驗四 斐林試劑法法測定還原糖含量(1).doc》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、實驗四斐林試劑法測定果品蔬菜中還原糖含量一、實驗?zāi)康模赫莆請@藝產(chǎn)品中糖的測定方法。二、實驗原理利用糖的還原性,與斐林試劑(氧化劑)中的二價銅離子還原為一價銅,進行氧化還原反應(yīng),而進行測定。非還原糖必須轉(zhuǎn)化為還原糖,再進行測定。斐林試劑中酒石酸鉀鈉銅是一種氧化劑,反應(yīng)的終點可用次甲基藍作指示劑,在堿性、沸騰環(huán)境下還原呈無色。根據(jù)斐林試劑完全還原所需的還原糖量,計算出樣品還原糖量。三、試劑與材料1、斐林試劑甲:69.3gCuSO4.5H2O加水溶解并定容至1000ml;乙:346g酒石酸鉀鈉+100gNaOH加水溶解并定容至1000ml;2、1%次甲基藍,1g次甲基藍
2、加水溶解并定容至100ml,棕色瓶保存;3、0.2%標準葡萄糖,2g105℃烘干到恒重的葡萄糖加水定容到1000ml;4、堿式滴定管;5、電爐,各種玻璃器皿。四、操作方法1、斐林試劑標定取甲液5ml加入5ml乙液中,置于250ml三角瓶中,加入水10ml,從滴定管中加入0.2%的標準葡萄糖若干毫升(約23ml)。(量控制在后滴定時消耗葡萄糖在0.5-1.0ml)。電爐上加熱至沸,并保持微沸2分鐘,加2滴1%次甲基藍溶液,趁沸以每兩秒1滴的速度繼續(xù)滴加葡萄糖標準溶液,用0.2%標準葡萄糖滴定至藍色消失,有紅棕色沉淀,溶液清亮為終點止。記錄耗用的葡萄糖量為V0,必須在
3、1min內(nèi)完成。(注意:還原的次甲基藍易被空氣中的氧氧化,恢復成原來的藍色,所以滴定過程中必須保持溶液成沸騰狀態(tài),并且避免滴定時間過長。)2、樣品滴定預(yù)備試驗同上法取斐林試劑,加10ml樣品液,搖勻于電爐上加熱至沸,保持微沸2分鐘,加2滴1%次甲基藍,用0.2%葡萄糖滴定至藍色消失。記錄耗用的葡萄糖量為V1。3、樣品滴定同上法吸取斐林試劑加10ml樣品液(預(yù)先稀釋),補加(V0-V1)ml水,并從滴定管中預(yù)先加入(V1-1)ml0.2%葡萄糖,搖勻至電爐上加熱至沸,保持2min微沸,加入2滴1%次甲基藍,繼續(xù)用葡萄糖滴定至藍色消失。記錄消耗的標準葡萄糖體積為V毫升
4、。五、結(jié)果計算還原糖含量(以葡萄糖計)(g/ml)=(Vo-V)×0.002×1/10×n式中:Vo--------斐林試劑標定值,mlV---------樣品糖液測定值,ml0.002-----標準葡萄糖溶液濃度,g/ml10--------樣品糖液體積,mln---------樣品稀釋倍數(shù)六、思考題:1、還原糖測定方法有哪些?2、總結(jié)本實驗方法測定還原糖應(yīng)注意哪些事項?親愛的用戶:煙雨江南,畫屏如展。在那桃花盛開的地方,在這醉人芬芳的季節(jié),愿你生活像春天一樣陽光,心情像桃花一樣美麗,感謝你的閱讀。1、最困難的事就是認識自己。21.7.317.31.202103
5、:0203:02:23七月-2103:022、自知之明是最難得的知識。二〇二一年七月三十一日2021年7月31日星期六3、越是無能的人,越喜歡挑剔別人。03:027.31.202103:027.31.202103:0203:02:237.31.202103:027.31.20214、與肝膽人共事,無字句處讀書。7.31.20217.31.202103:0203:0203:02:2303:02:235、三軍可奪帥也。星期六,七月31,2021七月21星期六,七月31,20217/31/20216、最大的驕傲于最大的自卑都表示心靈的最軟弱無力。3時2分3時2分31-七
6、月-217.31.20217、人生就是學校。21.7.3121.7.3121.7.31。2021年7月31日星期六二〇二一年七月三十一日8、你讓愛生命嗎,那么不要浪費時間。03:0203:02:237.31.2021星期六,七月31,2021