流感嗜血桿菌課件.ppt

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1、腸道桿菌(entericbacilli)※一大群居住在人和動(dòng)物腸道中生物學(xué)性狀近似的Ｇ－桿菌,廣泛分布于水、土壤或腐物中?！诸悓W(xué)上的地位:《伯杰氏系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊》(第９版)的第Ⅰ大類的兼性厭氧Ｇ－桿菌?！鄶?shù)是腸道的正常菌群,少數(shù)為致病菌※至少有30個(gè)菌屬，120多個(gè)菌種腸道桿菌共同特點(diǎn)形態(tài)結(jié)構(gòu)G—中小桿菌，無芽孢，多數(shù)有周鞭毛（除志賀菌屬、克雷伯菌屬、鼠疫耶爾森菌和EIEC），無芽胞，少數(shù)菌屬細(xì)菌可形成莢膜。及菌毛培養(yǎng)特性需氧或兼性厭氧營養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基可生長，菌落相似，形成灰白色中等大小S型菌落。生化反應(yīng)發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸、或產(chǎn)酸產(chǎn)氣；乳

2、糖發(fā)酵試驗(yàn)：非致病菌+，致病菌-（除外變形桿菌）。觸酶陽性；氧化酶陰性；硝酸鹽還原為亞硝酸鹽。EMB（伊紅——美蘭培養(yǎng)基），乳糖、伊紅、美蘭選擇作用（弱選）大腸埃希菌（非致病菌）乳糖發(fā)酵產(chǎn)酸伊紅結(jié)合美蘭形成紫黑色金屬光澤化合物有色的乳糖發(fā)酵菌落傷寒沙門菌等（致病菌）乳糖不發(fā)酵伊紅美蘭不能結(jié)合無色的乳糖不發(fā)酵菌落EMB平板上的E.coliSS培養(yǎng)基（沙門志賀培養(yǎng)基）乳糖、中性紅指示劑、膽鹽、煌綠等抑制劑選擇抑制作用（強(qiáng)選）大腸埃希菌產(chǎn)酸桃紅色乳糖發(fā)酵菌落傷寒沙門菌無色乳糖不發(fā)酵菌落膽鹽、煌綠：抑制大腸埃希菌及G+菌，提高腸道致病菌檢出率乳糖發(fā)酵中性

3、紅呈紅色乳糖不發(fā)酵微生物檢驗(yàn)1.分離培養(yǎng)2.鑒定（1）初步鑒定：①確定腸桿菌科的細(xì)菌，應(yīng)采用葡萄糖氧化-發(fā)酵試驗(yàn)及氧化酶試驗(yàn)與弧菌科和非發(fā)酵菌加以鑒別；②腸桿菌科細(xì)菌的分群，多采用苯丙氨酸脫氨酶和葡萄糖酸鹽試驗(yàn)，將腸桿菌科的細(xì)菌分為三個(gè)類群；③選擇生化反應(yīng)進(jìn)行屬種鑒別。KIA和MIU將細(xì)菌初步定屬。（2）最后鑒定：根據(jù)生化反應(yīng)的結(jié)果初步定屬、種，再根據(jù)血清凝集反應(yīng)才能作出最后判斷。甲基紅試驗(yàn)原理：細(xì)菌分解糖，產(chǎn)生丙酮酸，進(jìn)一步生成大量混合酸，使培養(yǎng)基pH維持在4.4以下，加入甲基紅后，使甲基紅呈現(xiàn)紅色反應(yīng)。此為甲基紅試驗(yàn)陽性。培養(yǎng)基：葡萄糖蛋白胨

4、水試劑：甲基紅試劑結(jié)果：加入試劑后，培養(yǎng)基呈現(xiàn)紅色：+培養(yǎng)基不變色：－應(yīng)用：是腸道桿菌常用的生化反應(yīng)試驗(yàn)，主要用于區(qū)別大腸肝菌和產(chǎn)氣腸桿菌葡萄糖丙酮酸大量混合酸pH降至4.4以下甲基紅試劑培養(yǎng)基變紅甲基紅試驗(yàn)甲基紅試驗(yàn)V-P試驗(yàn)原理：細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖，產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸脫羧生成乙酰甲基甲醇，在堿性環(huán)境中乙酰甲基甲醇被氧化為二乙酰，二乙酰與蛋白胨中的精氨酸所含的胍基結(jié)合，生成紅色化合物。培養(yǎng)基：葡萄糖蛋白胨水結(jié)果：加入試劑后，培養(yǎng)基呈現(xiàn)紅色：+培養(yǎng)基不變色：－應(yīng)用：是腸道桿菌常用的生化反應(yīng)試驗(yàn)，主要用于區(qū)別大腸肝菌和產(chǎn)氣腸桿菌葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇

5、二乙酰V-P試劑培養(yǎng)基變紅V－P試驗(yàn)脫酸葡萄糖發(fā)酵形成丙酮酸后的不同代謝途徑葡萄糖丙酮酸大量混合酸pH降至4.4以下甲基紅試劑培養(yǎng)基變紅乙酰甲基甲醇二乙酰V-P試劑培養(yǎng)基變紅脫酸靛基質(zhì)試驗(yàn)原理：細(xì)菌產(chǎn)生色氨酸酶，可分解蛋白胨中的色氨酸，生成靛基質(zhì)（吲哚），靛基質(zhì)與試劑對(duì)二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰靛基質(zhì)。培養(yǎng)基：蛋白胨水試劑：靛基質(zhì)試劑（含對(duì)二甲基氨基苯甲醛）結(jié)果：加入試劑后，培養(yǎng)基出現(xiàn)紅色液面：+培養(yǎng)基液面為黃色：－應(yīng)用：用于腸道桿菌的鑒定靛基質(zhì)試驗(yàn)原理色氨酸酶色氨酸靛基質(zhì)（吲哚）玫瑰靛基質(zhì)（玫瑰吲哚）對(duì)二甲基氨基苯甲醛靛基質(zhì)試驗(yàn)?zāi)蛩孛冈囼?yàn)原

6、理：產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌，能水解尿素生成氨和CO2，氨使培養(yǎng)基呈堿性變色。培養(yǎng)基：尿素培養(yǎng)基試劑：酚紅指示劑結(jié)果：培養(yǎng)基變紅：+培養(yǎng)基不變色：-應(yīng)用：腸桿菌科屬間鑒定尿素酶試驗(yàn)原理尿素尿素酶氨+CO2培養(yǎng)基pH升高酚紅呈堿性變色枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)原理：某些細(xì)菌能力利用培養(yǎng)基中的枸櫞酸鹽作為唯一的碳源，也能利用其中的銨鹽作為唯一碳源，細(xì)菌生長過程中分解枸櫞酸鹽產(chǎn)生碳酸鹽和分解銨鹽生成的氨，使培養(yǎng)基變堿，是指示劑呈堿性反應(yīng)。培養(yǎng)基：枸鹽酸鹽培養(yǎng)基試劑：溴麝香草酚藍(lán)（pH6.0以下呈黃色，pH7.6以上呈藍(lán)色）結(jié)果：培養(yǎng)基變藍(lán)：+培養(yǎng)基不變色：－應(yīng)用：腸桿菌科

7、屬間鑒別枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)原理枸櫞酸鹽銨鹽碳酸鹽氨培養(yǎng)基pH下降溴麝香草酚藍(lán)呈堿性變色培養(yǎng)基變藍(lán)培養(yǎng)基埃希菌屬埃希菌屬（Escherichia）有6個(gè)種，只有大腸埃希菌（E.coli）是臨床最常見、最重要的一個(gè)菌種。①大腸埃希菌是腸道中重要的正常菌群；②在宿主免疫力下降或細(xì)菌侵入腸外組織器官后即可成為機(jī)會(huì)致病菌，引起腸道外感染；③一些血清型的大腸埃希菌具有致病性，能導(dǎo)致人類胃腸炎；④在環(huán)境衛(wèi)生和食品衛(wèi)生學(xué)中常被用作糞便污染的衛(wèi)生學(xué)檢測指標(biāo)。22生物學(xué)性狀中等大小的G-桿菌、無芽胞、有周鞭毛、菌毛營養(yǎng)要求不高。腸道鑒別培養(yǎng)基形成有色菌落，SS平板上呈

8、紅色大菌落發(fā)酵葡萄糖、乳糖、麥芽糖和甘露醇產(chǎn)酸產(chǎn)氣，分解蔗糖因菌株而異，尿素酶試驗(yàn)陰性。吲哚、甲基紅、V-P、枸櫞酸鹽試驗(yàn)（IMViC