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《長穗偃麥草中AP2EREBP類轉錄因子基因的克隆與功能驗證.pdf》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內容在工程資料-天天文庫。
1、分類號:S512:!密級:公壓單位代碼:學號:100862008294長穗偃麥草中AP2/EREBP類轉錄因子基因的克隆與功能驗證CloningandCharacterizationofAP2/EREBPFamilyTranscriptionFactorGenesfromElytrigiaelongata學位申請人:默韶京指導教師:劉桂茹教授郎明林副研究員學科專業(yè):作物遺傳育種學位類別:農學碩士授予單位:河北農業(yè)大學答辯日期:二。一一年五月二十九日獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取
2、得的研究成果。據我所知,除了文中特別加以標注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得塑i墾盔些盤堂或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名:歇玄己嗜\簽字同期:伽/f年∥月∥同學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解塑皇墾盔些盤堂有關保留、使用學位論文的規(guī)定,有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱。本人授權塑i墾盔些盤鱟可以將學位論文的全部或部分內
3、容編入有關數據庫進行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。(保密的學位論文在解密后適用本授權書)學位論文作者簽名:涿秀己吻、導師簽名:簽字日期:仍7/年廠月萬日簽字日期:勿//年/月/日學位論文作者畢業(yè)后去向:工作單位:通訊地址:電話:郵編:AmpBLASTcDNACefCmDEPClPTGKanLBMSNAANCBIORFOD260OD280PCRRT.PCRRifrmpTaqTBEX—gal6.BA本文所用縮略詞及中文對照AmpicillinBasiclocalalignmentsearch
4、toolComplementaryDNACefotaximeCetyltriethyminetetradeticacidDiethylpyrocarbonateIsopropyl-p-D-thiogalactopyranosideKanamycinLuria—bertanimediumMurashigeandSkoogmedium1-naphthlceticacidNationalCenterforBiotechnologyInformationOpenreadingframeAbsorbanteat260nmAbs
5、orbanceat280nmPolymerasechainreactionReversetranscription-polymerasechainreactionRifampicinRevolutionperminuteThermusaquaticusDNApolymeraseTris.Boricacid.ED弱buffer5-bromo-4-chloro-3-indolyl-B—D—galactoside6-Benzylaminopurine氨芐青霉素基本的局部序列聯(lián)配搜索I:具互補DNA頭孢噻肟十八烷基三乙基溴化
6、銨焦碳酸二乙酯異丙基一B.D硫代j},.乳糖苛卡那霉素LB培養(yǎng)基MS培養(yǎng)基a.荼乙酸美國國家生物信息中心開放閱讀框260nm處的吸光值280nm處的吸光值聚合酶鏈式反應反轉錄聚合酶鏈式反應利福平每分鐘轉速棲熱水生菌DNA聚合酶Tris.硼酸緩沖液5一溴4.氯.3.吲哚.B.D.j卜乳糖苷6.芐氨基腺嘌呤惴4㈣2㈣乃㈣9㈣8腳1冊Y摘要干旱、鹽堿、低溫等非生物逆境脅迫對植物的生長發(fā)育有重大的影響,是造成農作物減產的直接原因。這些逆境因子會引起植物體內產生一系列生理生化變化以響應外界環(huán)境的變化。轉錄因子是能夠與真核基因啟
7、動子區(qū)域中順式作用元件發(fā)生特異性作用的DNA結合蛋白,通過它們與順式元件及其它相關蛋白之間的相互作用,可激活或抑制下游一系列功能基因的轉錄。植物中的AP2/EREBP類轉錄因子基因受到干旱、高鹽、低溫等逆境因子誘導會啟動下游一系列抗逆功能基因的表達,對提高植物的綜合抗逆性具有重要科學意義和應用價值。本研究利用同源序列克隆方法,結合RACE(rapidamplificationofcDNAends)和GenomeWalking技術,從抗逆性優(yōu)良的野生十倍體長穗偃麥草(Elytrigiae腸ngam,2n=70)中克隆了
8、AP2/EREBP家族的兩個逆境高豐度表達基因的全長cDNA,分別命名為EeAP2.j.J和EeAP2.2。序列分析表明,EeAP2.J.J具有一個1179bp的丌放閱讀框,編碼392個氨基酸殘基,含有一個保守的AP2結構域,屬于EREBP亞家族中的一個ERF轉錄因子基因。該基因編碼的氨基酸序列與大麥基因HvERFl(GenBank登錄號為AD