資源描述：
《響應(yīng)面法優(yōu)化堿性蛋白酶提取野生山核桃籽粕蛋白-論文.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、第39卷第3期糧食舯技鋸；i}Vo1．39．No．32014年6月Grain5cienceandITechnolo~yand~EconomyJun．2O14響應(yīng)面法優(yōu)化堿性蛋白酶提取野生山核桃籽粕蛋白馮妙，王玨，揭雅嬌，董曙，黃群(吉首大學(xué)食品科學(xué)研究所，湖南吉首416000)[摘要]為研究響應(yīng)面法優(yōu)化堿性蛋白酶提取野生山核桃籽粕蛋白質(zhì)的工藝，在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上考察了加酶量、pH值、提取溫度和提取時(shí)間等條件對蛋白質(zhì)提取率的影響。采用Box～BehnkenDesign試驗(yàn)設(shè)計(jì)，進(jìn)行四因素三水平的中心
2、組合試驗(yàn)，建立了蛋白質(zhì)提取率與各主效因子的二次回歸模型方程。結(jié)果表明，最佳提取條件為加酶量4．O％、pill2．0、溫度47℃、提取時(shí)間2．0h。在此條件下，蛋白質(zhì)提取率可達(dá)81．90％。[關(guān)鍵詞]野生山核桃；蛋白質(zhì)；堿性蛋白酶；提取率；響應(yīng)面法山核桃是一種壽命長、單株掛果率高的珍貴樹2AB型鼓風(fēng)恒溫干燥箱、高速萬能粉碎機(jī)：天津市泰種ⅢJ]，盛產(chǎn)于湖南、廣西、四JIf的交界地——湘西懷斯特儀器有限公司；電子天平、722型分光光度計(jì)：化靖州。山核桃脂肪含量豐富，山核桃油呈金黃色，上海舜宇恒平科學(xué)儀器有
3、限公司；HH—s2型恒溫水是防癌抗癌、抗衰老、提高記憶力的高級保健植物油。浴鍋：金壇市成輝儀器廠；PH一2型酸度計(jì)：上海精科核桃油具有潤膚、陰足肺氣的功能，中醫(yī)稱山核桃為儀器有限公司；KDN一04C型凱氏定氮儀：浙江托普長壽果，而湖南產(chǎn)山核桃果仁出油率在5個(gè)品種中儀器有限公司。最高]。不飽和脂肪酸含量是判別食用油品質(zhì)的重1．1．2原料與試劑要因素，彭湘蓮等測定湖南山核桃油中質(zhì)量分?jǐn)?shù)野生山核桃籽粕：安江市綠色食品有限公司；堿92．16％是不飽和脂肪酸，單不飽和脂肪酸油酸又占性蛋白酶(BR)：上海如吉生
4、物科技發(fā)展有限公司；其大宗，高達(dá)68．03％。野生山核桃蛋白營養(yǎng)價(jià)值可考馬斯亮藍(lán)G一250：Amreso公司；牛血清蛋白(優(yōu)級以與動(dòng)物蛋白相媲美，富含多種氨基酸，其中必需純)：Biosharp公司；硼酸、95％乙醇、NaOH、K2SO、無氨基酸含量相對于其他植物蛋白較高H]。野生山核水NaCO，、CuSO、H2SO等均為分析純。桃仁蛋白頗具營養(yǎng)保健功能，有降低血液膽固醇、潤1．2試驗(yàn)方法腸、開脾健胃等功效，在食療界引起了廣泛關(guān)注，極1．2．1樣品處理具開發(fā)利用價(jià)值。目前對山核桃的研究還注重于油將野生
5、山核桃籽粕用萬能粉碎機(jī)粉碎，置于恒脂方面，野生山核桃油、野生核桃仁、山核桃營養(yǎng)溫干燥箱中4O℃干燥24h，過80目篩。粉，但山核桃蛋白質(zhì)方面的研究動(dòng)態(tài)還比較少[。1．2．2野生山核桃籽粕蛋白含量測定核桃的深加工中，核桃仁籽粕被丟棄，沒有得到充采用微量凱氏定氮法(GB5009．5—2010)E8]，測得分利用，十分可惜]。投入對野生山核桃蛋白質(zhì)的研其蛋白質(zhì)含量為22．10％。究無疑對充分利用資源，提高其經(jīng)濟(jì)利用價(jià)值方面1．2．3提取工藝流程都有非常大的作用。為此，本試驗(yàn)立足于探索堿性蛋野生山核桃籽粕一
6、粉碎、過80目篩一加水配成白酶法對野生山核桃籽粕蛋白質(zhì)的提取，通過響應(yīng)l：12(g／mL)的固液比加入堿性蛋白酶一沸水浴15面法優(yōu)化提取工藝。min滅酶一離心分離(4500r／min，30min)取上清液1材料與方法一定容一稀釋一測定蛋白含量。1．2．4提取率計(jì)算1．1試驗(yàn)儀器和試劑考馬斯亮藍(lán)G一250法測定提取液蛋白質(zhì)含量，1．1．1試驗(yàn)儀器蛋白提取率按下式計(jì)算。LXJ—IIB型離心機(jī)：上海安亭科學(xué)儀器廠；101一收稿日期：2014—03—24y=一山核桃籽粕蛋白質(zhì)含量×100％基金項(xiàng)目：2013
7、年生物食品類專業(yè)學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練中心創(chuàng)新項(xiàng)目(JDCX2013—04)。1．2．5單因素試驗(yàn)作者簡介：馮妙，女，本科，研究方向?yàn)槭称房茖W(xué)。通信作者：黃群，男，博士，副教授，研究方向?yàn)槭称房茖W(xué)。在料液比1：12、pH為9．O、提取時(shí)間2．0h、溫度S7第39卷2014年第3期馮妙等：響應(yīng)面法優(yōu)化堿性蛋白酶提取野生山核桃籽粕蛋白55℃不變的條件下，控制加酶量分別為1．O％、2．0％、提取率下降。因此堿性蛋白酶添加量為4．0％～6．0％3．0％、4．O％、5．0％、6．0％，進(jìn)行單因素試驗(yàn)，考察加酶較適宜。量
8、對野生山核桃籽粕蛋白質(zhì)提取率的影響。2．3pI-I值對提取率的影響在料液比1：12、加酶量3．0％、提取時(shí)問2．0h、溫由圖2可以看出，當(dāng)pH在7．0～11．0時(shí)，野生山度55c【=不變的條件下，調(diào)整pH為7．0?809．0、10．0、核桃籽粕蛋白質(zhì)的提取率增高趨勢隨pH的增加越11．0、12．0，分別進(jìn)行單因素試驗(yàn)，考察pH對野生來越明顯，顯然，這是因?yàn)閜H會(huì)改變堿性蛋白酶活山核桃籽粕蛋白質(zhì)提取率的影響。性中心的空間構(gòu)象，使酶蛋白中心活性部位的結(jié)合保持料液比1：12
