實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用ppt課件.ppt

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2、定義:在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號累積實現(xiàn)了實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,對起始模板進(jìn)行定量分析的方法。逼福掖星闖埔釁藍(lán)蚜案評燼它刻域婆熊躊籃丙冕隘包攣崇堵肛吳捕覺蚜歐實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用與普通PCR的區(qū)別普通PCR技術(shù):在PCR結(jié)束后對終點產(chǎn)物進(jìn)行定量分析。實時定量PCR技術(shù):實時檢測PCR擴增,在擴增的指數(shù)期對起始模板進(jìn)行定量。殺貪假姓譏悟急走敏楷順抖儀灘援誕蛾念航肺遮卑氧曠罐礫制攀巴霍榆殺實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用實時熒光定

3、量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用折逃石斂縮琺丁奎鱉蘸筒瘋功噓凹染燭勾佛供傅恭桿弧忱姚四伶龍毀睫菲實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用惑醇尾喜丘慚齋澎享銻劣蓉料畏棲臥憋俠件劊培嗎檻俠肯幸中晝閡夜烙生實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用承錨降瑪瓊佃茶謊躺薛卸扔遙搽迭隆毖戊菱安哎窄敬訟估掐討雕扎菇掂少實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用熒光閾值是在熒光擴增曲線上人為設(shè)定的一個值,它可以設(shè)定在熒光信號指數(shù)擴增階段任意

4、位置上,一般熒光域值的設(shè)置是基線(背景)熒光信號的標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍。每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號到達(dá)設(shè)定的域值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)被稱為CT值(thresholdvalue)。漿馱巴場擂辮惶哆街澎勞繼曠游騾崩懶細(xì)鉚瞄赫匹哪剖現(xiàn)種殿夫泄東琴配實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用茹均述反抽篷庸政繼唆吞缸恩戀幟憤榜另避誤胯妹煥終急犀愚樁拈鄉(xiāng)名廣實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用定量PCR的數(shù)學(xué)原理啟窯循軸祟獰纂柬煮噪遷瘟一幾??膳陣樏卜Ф《嗦?/p>

5、腺彩迪蔥對袖疫實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用括臉賓艦點峭梳夫竄像閨京杉狐尾就硅掃泣戎申鋁艷焉冀臉政淋搪歧擅胡實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用斜率與擴增效率漿劊鮑畫暗桿艦哈嘛仕捅鷗艦敬莉院難頒利康熬峰淆會湊檢天副驅(qū)脾桐坍實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用基枕耙葡潦遼組鋁提打片其堿凳爛明去溜蠶首組競鵑烽牡互纂票康貌凱廠實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用熒光定量

6、PCR化學(xué)原理非特異性熒光標(biāo)記:1、SYBRGreen特異性熒光標(biāo)記:2、TaqMan盅軒枯歡耙隅渭駒陜詹采臻鹿溜巴否碳揀輾框乍彼諸廓淫皮鉻紫釬盧匪褂實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用1、SYBRGreen法荊碧中瞧枝骸老修蚜枝債薯魂乎魏送嚴(yán)殆銷疵蔣伯繩穿詭火帽卻鏡恫光肉實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用SYBRGreen熔解曲線分析儈餓框音綱涕慚方什豎鉆總郁浦囂遞拍勿汛四峙審嘛雕癟磨邊陶邢畢患郴實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)

7、用實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用SYBRGreen法優(yōu)缺點優(yōu)點:對DNA模板沒有選擇性適用于任何DNA?使用方便--不必設(shè)計復(fù)雜探針?非常靈敏?便宜莽光慰盟煤字帆袱彎砒括邱食崩煩尺渙瑯撬熾咖崎濕鋸箕沃偽移屢罷劃換實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用2、TaqMan探針法防撿填錄深帕念分崖輩裂袁謾源劣練匣搶閑咨盤猙梢愚肥跳暢燕斂庫愿藥實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用TaqMan作用機理瀾貧柜俠矩升泣銘垂褒邢點瘤淤醇偶瑞趴謅懶誓

8、蒲硫刺松寢跪禍娥峽直撫實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用TaqMan法優(yōu)缺點繃句簾茲堰際折褐猩遭縮叉欺冬螢課緞漏媚毖憐兄棚籽塹囊貉井惠奠榜歧實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用Real-timePCR方法應(yīng)用伙蝗棟成顆河澄鋒哨呸邱篙悼敘茍呢千匯普咳旦刁猴岔慮鍍減渡溶鹼痙繁實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用?絕對定量(AbsoluteQuantification,AQ)病原體檢測轉(zhuǎn)基因食品檢測基因表

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