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1、細(xì)胞化學(xué)染色Cytochemicalstain成都市第六人民醫(yī)院檢驗(yàn)科李色概念細(xì)胞化學(xué)染色是以細(xì)胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，結(jié)合運(yùn)用化學(xué)反應(yīng)的原理對(duì)血細(xì)胞內(nèi)的各種化學(xué)物質(zhì)（糖類(lèi)、蛋白質(zhì)、脂類(lèi)、酶類(lèi)、鐵、核酸等）作定性、定位、半定量分析的方法。細(xì)胞原位的化學(xué)反應(yīng)臨床應(yīng)用輔助判斷急性白血病的細(xì)胞類(lèi)型輔助血液系統(tǒng)等疾病的診斷和鑒別診斷（Fe、NAP等）FABALL（急性淋巴細(xì)胞白血?。㎜1、L2、L3AML（急性髓細(xì)胞白血病）M0急性粒細(xì)胞白血?。ㄎ⒎只停㎝1急性粒細(xì)胞白血?。ㄎ闯墒煨停㎝2急性粒細(xì)胞白血?。ú糠殖墒煨停㎝3急性早幼粒細(xì)胞白血病M4急性粒－單核細(xì)胞白血病M5急性單核細(xì)
2、胞白血病M6急性紅白血病M7急性巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞化學(xué)染色的基本步驟固定顯示復(fù)染保持細(xì)胞結(jié)構(gòu)及化學(xué)成分不變，并使血膜在染色、沖洗過(guò)程中不易脫落損壞形成穩(wěn)定的有色沉淀，顯示出被檢測(cè)的化學(xué)物質(zhì)既能顯示細(xì)胞結(jié)構(gòu)又能清楚地看出細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果細(xì)胞化學(xué)染色的種類(lèi)過(guò)氧化物酶染色（POX)、蘇丹黑染色（SBB)過(guò)碘酸-雪夫反應(yīng)（PAS）又稱(chēng)糖原染色酯酶染色酸性磷酸酶染色（ACP)鐵染色中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色（NAP）過(guò)氧化物酶染色Peroxidasestain,POX染色原理（四甲基聯(lián)苯胺法）H2O2溶酶體顆粒中的ＰＯＸH2O＋O2四甲基聯(lián)苯胺O2聯(lián)苯胺藍(lán)聯(lián)苯胺藍(lán)＋亞硝基鐵氰化鈉
3、O2藍(lán)色物質(zhì)（沉淀）正常血細(xì)胞的染色反應(yīng)粒細(xì)胞系統(tǒng)原粒（可為陰性） 分葉（陽(yáng)性程度逐漸增強(qiáng)）嗜酸陽(yáng)性最強(qiáng)嗜堿陰性單核細(xì)胞系統(tǒng)陰性或弱陽(yáng)性（顆粒少而細(xì)）其他血細(xì)胞陰性臨床意義1.ALL：原始細(xì)胞的POX陽(yáng)性＜3%2.AML：原始細(xì)胞的陽(yáng)性≥3%在多數(shù)的M1、絕大部分M2和M3中，原始細(xì)胞的陽(yáng)性率大于85%，M3呈強(qiáng)陽(yáng)性；M4和M5時(shí)，原單有時(shí)可呈弱陽(yáng)性，但絕大多數(shù)的原單是POX陰性。M6，原粒和幼稚粒細(xì)胞是POX陽(yáng)性，幼紅細(xì)胞是POX陰性。M7，血小板POX的活性只能在超微結(jié)構(gòu)上證實(shí)。POX染色的臨床應(yīng)用◆POX染色是輔助診斷急性白血病細(xì)胞類(lèi)型首選、最重要的細(xì)胞化學(xué)染
4、色，主要用于急性白血病的鑒別診斷。◆急性粒細(xì)胞白血病時(shí)，其原、幼細(xì)胞呈陽(yáng)性反應(yīng)，以APL反應(yīng)最強(qiáng);急性單核細(xì)胞白血病時(shí)，原幼細(xì)胞呈弱陽(yáng)性反應(yīng)◆ALL時(shí)呈陰性反應(yīng)用途：鑒別急性淋巴系與非淋巴系白血病結(jié)果：粒系(+)；單核系(±)；淋巴系(–)原粒單核淋巴早幼晚幼中幼過(guò)氧化物酶染色(peroxidase，POX)蘇丹黑染色Sudanblack,SBB蘇丹黑染色◆原理：SBB能溶解于細(xì)胞內(nèi)的含脂結(jié)構(gòu)，使脂類(lèi)物質(zhì)顯示出來(lái)，呈棕黑色或深黑色?！粽＜?xì)胞的染色反應(yīng) 同POX染色。◆臨床評(píng)價(jià)POX染色特異性高于SBB染色SBB染色敏感性高于POX染色過(guò)碘酸-雪夫反應(yīng)(糖原染色）Pe
5、riodicacid-Schiffreaction,PAS染色原理（PAS）乙二醇基（多糖類(lèi)物質(zhì)中）過(guò)碘酸雙醛基＋無(wú)色品紅紫紅色化合物正常血細(xì)胞的染色反應(yīng)粒細(xì)胞系統(tǒng)原粒（可為陰性） 分葉（陽(yáng)性程度逐漸增強(qiáng)）嗜酸胞質(zhì)呈紅色，顆粒不著色嗜堿反之紅細(xì)胞系統(tǒng)陰性單核細(xì)胞系統(tǒng)原單（可為陰性），其他陽(yáng)性正常血細(xì)胞的染色反應(yīng)淋巴細(xì)胞系統(tǒng)大多數(shù)陰性，少數(shù)陽(yáng)性。巨核細(xì)胞系統(tǒng)巨核細(xì)胞和血小板陽(yáng)性，陽(yáng)性反應(yīng)的程度隨細(xì)胞的發(fā)育成熟而增強(qiáng)。臨床意義◆紅細(xì)胞系統(tǒng)疾病紅血病、紅白血病、骨髓增生異常綜合征中幼紅細(xì)胞可陽(yáng)性（均勻紅色或塊狀）；某些紅系良性疾病如缺鐵貧、巨幼貧等陰性?！舭准?xì)胞系統(tǒng)疾病A
6、LL：（原幼淋細(xì)胞陽(yáng)性率升高，呈粗顆粒或塊狀）急粒：少數(shù)原粒呈陽(yáng)性，陽(yáng)性細(xì)顆粒狀急單：可呈陽(yáng)性，陽(yáng)性細(xì)顆粒狀PAS臨床意義AML-M6幼紅細(xì)胞呈陽(yáng)性反應(yīng)MA幼紅細(xì)胞呈陰性反應(yīng)ALLAML-M6AML-M6PAS(+)AML-M5M5PAS(+)AML-M7M7PAS(+)PAS染色的應(yīng)用◆鑒別淋巴系統(tǒng)增生的性質(zhì)：凡惡性增生時(shí)PAS反應(yīng)多呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)，見(jiàn)于急、慢性淋巴細(xì)胞白血病、淋巴瘤等?！翳b別紅系增生的性質(zhì)：凡惡性增生者，如紅血病、紅白血病其原、幼紅細(xì)胞多呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)；增生性貧血、巨幼貧，PAS多為陰性?！粲兄诰藓思?xì)胞白血病的診斷酯酶染色α-醋酸萘酚酯酶染色(α-N
7、AE)原理α-醋酸萘酚PH中性α-醋酸萘酚酯酶α-萘酚+重氮鹽(堅(jiān)牢藍(lán)B)(黑色或灰黑色)正常血細(xì)胞的染色反應(yīng)◆單核細(xì)胞、粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞（均可+）◆僅單核細(xì)胞的陽(yáng)性可被氟化鈉抑制(NaF抑制率>50%)。NaF抑制率=抑制前的陽(yáng)性率/積分-抑制后的抑制前的陽(yáng)性率/積分×100%α-NAE對(duì)診斷急性白血病的作用酸性磷酸酶染色Acidphosphatase,ACPACP染色的臨床意義鐵染色Ferricstain染色原理（Fe染色）鐵+亞鐵氰化鉀酸性環(huán)境亞鐵氰化鐵（藍(lán)色）正常血細(xì)胞的染色反應(yīng)◆正常人骨髓中的鐵主要存在于骨髓小粒及幼紅細(xì)胞中，分為細(xì)胞外鐵和
