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1、合歡花多糖提取工藝和其抗氧化活性探究 摘要：采用熱水浸提法提取合歡花中的多糖，通過單因素試驗和正交試驗考察了浸提溫度、浸提時間、水料質(zhì)量比、浸提次數(shù)對多糖提取率的影響，并且探討了合歡花多糖對羥基自由基、亞硝酸根離子的清除作用。結(jié)果表明，各因素對合歡花多糖提取率的影響由大到小依次為浸提溫度、浸提時間、水料質(zhì)量比；最佳提取工藝條件為浸提溫度90℃、浸提時間4h、水料質(zhì)量比30∶1、提取2次，在此條件下合歡花多糖的提取率為5.72%。合歡花多糖對羥基自由基和亞硝酸根離子有較強(qiáng)的清除能力。關(guān)鍵詞：合歡花；多糖；提取工藝；抗氧化活性中圖分類號：R284.2文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：0439-8
2、114（2013）11-2625-04合歡花（FlosAlbiziae）為豆科植物合歡（Albiziajulibrissin7Durazz.）的干燥花序，具有安神解郁、活血、消癰腫等作用，適用于郁結(jié)胸悶、忿怒憂郁、虛煩不安、健忘失眠等癥[1，2]。大量的藥理和臨床研究表明，多糖類化合物是一類免疫調(diào)節(jié)劑，它能激活免疫細(xì)胞，提高機(jī)體的免疫功能，而且對正常細(xì)胞沒有毒副作用，已逐漸發(fā)展為一種免疫療法[3-5]。從植物中，尤其是從中草藥中提取的水溶性多糖沒有細(xì)胞毒性，除了參與生物體的免疫調(diào)節(jié)功能，還具有降血糖、降血脂、抗炎、抗腫瘤、抗疲勞、抗衰老等功能[6，7]，其藥物質(zhì)量通過化學(xué)手段容易控制
3、，已成為當(dāng)今新藥的發(fā)展方向之一。本研究采用熱水浸提法[8]提取合歡花中多糖，利用正交試驗[9]對提取條件進(jìn)行優(yōu)化，并探討了合歡花多糖對羥基自由基（·OH）及亞硝酸根離子（NO2-）的清除作用，為深入了解合歡花的藥用和保健功能，促進(jìn)合歡花資源的開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。1材料與方法1.1材料與儀器1.1.1材料和試劑合歡花購買于新鄉(xiāng)市張仲景大藥房；主要試劑無水乙醇、苯酚、葡萄糖、維生素C、亞硝酸鈉、對氨基苯磺酸、鹽酸萘基乙二胺、水楊酸、硫酸亞鐵、過氧化氫等為國產(chǎn)分析純。1.1.2主要儀器752型紫外可見分光光度計（上海菁華科技儀器有限公司）、CH1015超級恒溫水槽（上海衡平儀器儀表廠）、
4、SBH-II循環(huán)水式真空泵（鄭州長城科工貿(mào)有限公司）、BS244電子分析天平（德國Sartourus公司），R206D旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海申生科技有限公司）。1.2方法2結(jié)果與分析2.1單因素試驗結(jié)果2.1.1浸提溫度對合歡花多糖提取率的影響7準(zhǔn)確稱取3.0g脫脂的合歡花粉末5份，加入60mL去離子水，分別在60、70、80、90、100℃水浴中浸提2h，所得合歡花多糖提取率結(jié)果如圖1所示。由圖1可知，浸提溫度小于90℃時，提取率隨著溫度的升高而升高，浸提溫度為90℃時多糖提取率最大，之后再升高浸提溫度，提取率略有下降，可能是溫度太高破壞了多糖的結(jié)構(gòu)，而且使提取成本增加。因此，浸提溫度宜
5、選擇90℃。2.1.2水料質(zhì)量比對合歡花多糖提取率的影響準(zhǔn)確稱取3.0g脫脂的合歡花粉末5份，分別加入30、45、60、75、90mL去離子水，即水料質(zhì)量比分別為10∶1、15∶1、20∶1、25∶1、30∶1，在90℃水浴中浸提2h，所得合歡花多糖提取率結(jié)果如圖2所示。由圖2可知，合歡花多糖提取率隨水料質(zhì)量比的增大而升高，水料質(zhì)量比達(dá)到25∶1后再繼續(xù)增大則其提取率增加速度緩慢，說明合歡花中多糖基本提取完全?？紤]到去離子水用量過大會導(dǎo)致濃縮工藝能耗增加，所以選擇水料質(zhì)量比20∶1～30∶1為進(jìn)一步優(yōu)化的范圍。2.1.3浸提時間對合歡花多糖提取率的影響準(zhǔn)確稱取3.0g脫脂的合歡花粉末
6、5份，用75mL去離子水在90℃水浴中分別浸提0.5、1.0、2.0、3.0、4.0h，所得合歡花多糖提取率結(jié)果如圖3所示。由圖3可知，多糖提取率隨著浸提時間的延長而升高，當(dāng)浸提時間超過37h后多糖提取率增加不明顯，趨于穩(wěn)定，說明浸提3h時原料中的多糖已幾乎完全溶出。2.1.4浸提次數(shù)對合歡花多糖提取率的影響準(zhǔn)確稱取3.0g脫脂的合歡花粉末，用75mL去離子水在90℃水浴中浸提3h，抽濾，將濾渣再按上述條件浸提2次，每次所得濾液按“1.2.2”測定多糖提取率，結(jié)果見圖4。由圖4可知，經(jīng)過2次提取，合歡花中多糖基本提取完全，因此，浸提次數(shù)選擇2次。2.2正交試驗結(jié)果在單因素試驗的基礎(chǔ)上
7、，采用去離子水為浸提劑，將浸提次數(shù)確定為2次，以浸提溫度、浸提時間、水料質(zhì)量比為因素，多糖提取率為指標(biāo)進(jìn)行L9（34）正交試驗，結(jié)果見表2。由表2可知，3個因素對合歡花多糖提取率影響的主次順序為浸提溫度、浸提時間、水料質(zhì)量比；各因素的最優(yōu)組合為A2B3C3，即浸提溫度90℃、浸提時間4h、水料質(zhì)量比30∶1。為了驗證正交試驗的最優(yōu)提取條件，在此條件下進(jìn)行3次平行試驗，合歡花多糖的提取率分別為5.72%、5.75%、5.69%，平均值為5.72%，高于正交試
