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《榿葉唐棣組培快繁生產(chǎn)技術(shù)分析.doc》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、學(xué)無止境榿葉唐棣組培快繁生產(chǎn)技術(shù)分析榿葉唐棣是薔薇科唐棣屬一種落葉小喬木或灌木，原產(chǎn)于北美洲從阿拉斯加中部到科羅拉多的落基山脈地區(qū)。其果實為漿果狀梨果，含有多種營養(yǎng)成分，可稱之為高鈣植物。果實可加工或鮮食，主要用于釀酒、食品、藥品等。其樹型美觀大方，花、果頗為俏麗，具有一定的觀賞價值，可作為園林綠化樹種栽培。研究以榿葉唐棣腋芽為外植體，通過組織培養(yǎng)快繁技術(shù)，在較短時間內(nèi)達到了高效誘導(dǎo)外植體分化增殖和高質(zhì)量保證幼苗成活的目的，并且保存了母體的全部優(yōu)良性狀，遺傳性狀穩(wěn)定。１試驗材料與方法１．１無菌體系建立。以７０％乙醇（消毒時間為２０ｓ與３０ｓ）為表面消毒劑，
2、分別加入５％次氯酸鈉（滅菌時間為１５ｍｉｎ與３０ｍｉｎ）、１０％次氯酸鈉（滅菌時間為１０ｍｉｎ與２０ｍｉｎ）和０．１％升汞（滅菌時間為６ｍｉｎ與１０ｍｉｎ）為浸泡消毒劑，接種１００瓶，共設(shè)１２個處理（見表１）。采用ＭＳ培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，附加少量植物生長調(diào)節(jié)劑ＩＢＡ、６－ＢＡ，培養(yǎng)條件為蔗糖３％，瓊脂０．６５％，溫度２２～２５℃，光強２０００ｌｘ，光照１４ｈ／ｄ。定期觀察結(jié)果。１．２試管苗初代培養(yǎng)。將切取帶腋芽的莖段在無菌條件下接種到以ＭＳ為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，附加０．１～１．０ｍｇ／Ｌ濃度的６－ＢＡ和０．０５ｍｇ／Ｌ濃度的ＩＢＡ的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，重復(fù)１００次隨機取
3、５０次未污染的莖段，共１０個處理（見表２），培養(yǎng)條件為蔗糖３％，瓊脂０．６５％，溫度２２～２５℃，光強２０００ｌｘ，光照１４ｈ／ｄ，定期觀察腋芽分化狀況。１．３試管苗繼代培養(yǎng)。選取腋芽培養(yǎng)分化后的試管苗，在無菌環(huán)境下接種到以ＭＳ為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，附加０．２～１．０ｍｇ／Ｌ濃度的６－ＢＡ和０．０５～０．１ｍｇ／Ｌ濃度的ＩＢＡ的繼代培養(yǎng)基中。每種培養(yǎng)基設(shè)計接種１０瓶，每瓶接種３株試管苗。共１０個處理（見表３），培養(yǎng)條件為蔗糖３％，瓊脂０．６５％，溫度２２～２５℃3學(xué)無止境，光強２０００ｌｘ，光照１４ｈ／ｄ，定期觀察腋芽分化狀況。１．４試管苗生根培養(yǎng)。選取繼代培養(yǎng)中
4、生長健壯芽，在超凈臺上分離成單芽后，轉(zhuǎn)接到以１／２ＭＳ為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，附加植物激素ＩＢＡ不同濃度的６種培養(yǎng)基中（見表４）。培養(yǎng)條件為蔗糖２％，瓊脂０．６５％，溫度２２～２５℃，光強２０００ｌｘ，光照１４ｈ／ｄ。每種培養(yǎng)基接種３０個莖段，定期統(tǒng)計試管苗生根情況。２試驗結(jié)果與分析２．１無菌系建立中各消毒劑的用量分析。試驗結(jié)果表明，７０％乙醇處理的時間在２０ｓ即可取得較好效果，時間過長則會出現(xiàn)脫水現(xiàn)象。用５％～１０％次氯酸鈉處理２０ｍｉｎ以上才能達到消毒目的，但外植體多數(shù)出現(xiàn)褐變現(xiàn)象，而使用０．１％升汞處理榿葉唐棣莖段，只需浸泡６ｍｉｎ就可能達到消毒目的，但為避免
5、升汞的殘留對植物組織造成傷害必須用無菌水清洗５～６次，并用無菌濾紙吸干水分。２．２不同處理對試管苗腋芽萌發(fā)的影響。研究表明，０．５ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋０．０５ｍｇ／ＬＩＢＡ濃度的培養(yǎng)基誘導(dǎo)出的腋芽普遍生長健壯，葉片嫩綠，腋芽萌發(fā)數(shù)量和萌發(fā)率較高，為最適合的初代培養(yǎng)基（見表２）。２．３不同處理對試管苗繼代增殖的影響。當(dāng)培養(yǎng)基為ＭＳ＋０．６ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＩＢＡ?xí)r，每個芽新增芽數(shù)為６．５，芽多，葉片大，生長快，能更好的保持芽增殖數(shù)量與生長速度之間的平衡化（見表３）。２．４不同處理對試管苗生根的影響當(dāng)培養(yǎng)基不加激素ＩＢＡ?xí)r，榿葉唐棣試管苗也能生根，
6、但生根率較低僅為５５％，生根數(shù)量較少且根纖細易斷。當(dāng)ＩＢＡ濃度為０．１ｍｇ／Ｌ時，生根率提高到了９８％，每株生根數(shù)達到５．５條，平均根長２．３ｃｍ，所生根較粗堅韌質(zhì)量好。當(dāng)ＩＢＡ濃度增大到０．２～０．４ｍｇ／Ｌ時，雖然生根率達到了８０～９５％，但每株生根數(shù)下降到２．８～４．２條，根長度１．６～２．０ｃｍ，并且根基部愈傷組織較多。因此，生根培養(yǎng)基中ＩＢＡ較合適的濃度應(yīng)為０．１ｍｇ／Ｌ（見表４）。３結(jié)論榿葉唐棣的外植體先用７０％乙醇處理２０ｓ，再使用０．１％升汞浸泡６ｍｉｎ可取得較好的消毒效果；初代培養(yǎng)中，添加０．５ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋０．０５ｍｇ／ＬＩＢＡ的Ｍ
7、Ｓ培養(yǎng)基誘導(dǎo)腋芽萌發(fā)效果最好；繼代培養(yǎng)中，添加０．６ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＩＢＡ的ＭＳ培養(yǎng)基能更好的保持了芽增殖與生長之間的平衡；在生根試驗中，添加０．１ｍｇ／ＬＩＢＡ的１／２ＭＳ培養(yǎng)基，生根效果最好。3學(xué)無止境3
