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1、第五章菌種的制備和保藏授課教師賀立虎1第一節(jié)微生物的生長繁殖2生長——微生物細(xì)胞吸收營養(yǎng)物質(zhì)，進(jìn)行新陳代謝，當(dāng)同化作用>異化作用時，生命個體的重量和體積不斷增大的過程。繁殖——生命個體生長到一定階段，通過特定方式產(chǎn)生新的生命個體，即引起生命個體數(shù)量增加的生物學(xué)過程。發(fā)育——從生長到繁殖，是生物的構(gòu)造和機(jī)能從簡單到復(fù)雜、從量變到質(zhì)變的發(fā)展變化過程，這一過程稱為發(fā)育。個體生長——微生物細(xì)胞個體吸收營養(yǎng)物質(zhì)，進(jìn)行新陳代謝，原生質(zhì)與細(xì)胞組分的增加為個體生長。群體生長——群體中個體數(shù)目的增加?？梢杂弥亓?、體積、密度或濃度來衡量。（由于微生物的個
2、體極小，所以常用群體生長來反映個體生長的狀況）個體生長?個體繁殖?群體生長群體生長=個體生長+個體繁殖一、生長與繁殖的概念3二、細(xì)菌的繁殖一般為無性繁殖，二分裂法。同形裂殖：裂殖后形成的子細(xì)胞大小相等。異形裂殖：分裂產(chǎn)生兩個大小不等的子細(xì)胞。細(xì)菌分裂過程：①菌體伸長，核質(zhì)體分裂②形成橫隔壁③子細(xì)胞分離無性繁殖有性繁殖☆少數(shù)有菌毛的菌可進(jìn)行有性繁殖方式4三、放線菌的生長繁殖5★由分枝狀菌絲組成。菌絲無隔膜，仍屬單細(xì)胞。菌絲直徑與桿菌相似（1?m左右）；細(xì)胞壁含磷壁酸、二氨基庚二酸，不含幾丁質(zhì)、纖維素；革蘭氏陰性。1、放線菌的形態(tài)構(gòu)造★菌
3、絲根據(jù)形態(tài)和功能不同可分為：基內(nèi)菌絲(Substratemycelium）氣生菌絲(Aerialmycelium)孢子絲(Reproductivemycelium)62、放線菌的繁殖方式7四 霉菌的繁殖方式8)：1.孢囊孢子（sporangiospore）形成特征：形成于菌絲的特化結(jié)構(gòu)——孢子囊內(nèi)。孢子形態(tài)：近圓形。舉例：根霉、毛霉。92.分生孢子(Canidinm):形成特征：由分生孢子梗頂端細(xì)胞特化而成的單個或簇生的孢子。孢子形態(tài)：極多樣。舉例：曲霉、青霉。103.節(jié)孢子(arthrospore，又稱粉孢子)形成特征：由菌絲斷裂而
4、成。孢子形態(tài)：常呈成串短柱狀。舉例：白地霉。11厚垣孢子4.厚垣孢子（Chlamydospore)形成特征：部分菌絲細(xì)胞質(zhì)濃縮、變圓，周圍生出厚壁而成。孢子形態(tài)：圓形、柱形等。舉例：總狀毛霉。12有性結(jié)構(gòu)及其形態(tài)特征：由大小不同的配子囊結(jié)合后發(fā)育而成。小配子囊稱雄器；大配子囊稱藏卵器。所屬分類地位：卵菌綱。1.卵孢子（oospore)132.接合孢子（zygospore):有性結(jié)構(gòu)及其形態(tài)特征：是由菌絲生出的結(jié)構(gòu)大小相似、形態(tài)相同或略有不同兩個配子囊接合后發(fā)育而成。所屬分類地位：接合菌綱接合孢子形成過程:143.子囊孢子（ascosp
5、ore):有性結(jié)構(gòu)及其形態(tài)特征：在子囊中形成。子囊：兩性細(xì)胞接觸以后形成的囊狀結(jié)構(gòu)。子囊的形成有兩種方式：①兩個營養(yǎng)細(xì)胞直接交配而成，其外面無菌絲包裹；②從一個特殊的、來自產(chǎn)囊體菌絲（稱為產(chǎn)囊絲）的結(jié)構(gòu)上產(chǎn)生子囊，多個子囊外面被菌絲包圍形成子實(shí)體，稱為子囊果。所屬分類地位：子囊菌綱154.擔(dān)孢子(basidiospore)有性結(jié)構(gòu)及其形態(tài)特征：擔(dān)子菌所特有，經(jīng)兩性細(xì)胞核配合后產(chǎn)生的外生孢子。因著生在擔(dān)子上而得名。所屬分類地位：擔(dān)子菌綱16五、微生物生長的測定方法描述不同種類、不同生長狀態(tài)的微生物生長情況，需選用不同的測定指標(biāo)。（一）微
6、生物細(xì)胞數(shù)目的檢測法直接法（血球計數(shù)板、比例計數(shù)法）間接法（活菌計數(shù)法、液體稀釋法、膜過濾法）（二）微生物生長量和生理指標(biāo)測定法直接法(干重法，堆體積法)間接法（比濁法，碳、氮含量法，其它生理指標(biāo)）171.涂片染色法應(yīng)用：可同時計數(shù)不同微生物的菌數(shù)，適 于土壤、牛奶中細(xì)菌計數(shù)。方法：用鏡臺測微尺計算出視野面積；取 0.01ml菌液涂于1cm2面積上，計數(shù)后代 入公式：每ml原菌液含菌數(shù)=視野中平均菌數(shù)×涂布面積/視野面積×100×稀釋倍數(shù)18原理：將1cm2×0.1mm的薄層空間劃分為400小格，從中均勻分布地選取80或100小格，計
7、數(shù)其中的細(xì)胞數(shù)目，換算成單位體積中的細(xì)胞數(shù)。適用范圍：個體較大細(xì)胞或顆粒，如血球、酵母菌等。不適用于細(xì)菌等個體較小的細(xì)胞，因為（1）細(xì)菌細(xì)胞太小，不易沉降；（2）在油鏡下看不清網(wǎng)格線，超出油鏡工作距離。特點(diǎn)：快速，準(zhǔn)確，對酵母菌可同時測定出芽率，或在菌懸液中加入少量美藍(lán)可以區(qū)分死活細(xì)胞。2.血球計數(shù)板法192.血球計數(shù)板法203.比濁法原理是在一定范圍內(nèi)，菌懸液中的細(xì)胞濃度與混濁度成正比，即與光密度成正比，菌數(shù)越多，光密度越大。因此，借助于分光光度計，在一定波長下測定菌懸液的光密度，就可反應(yīng)出菌液的濃度。特點(diǎn)：快速、簡便；但易受干擾。
8、214.平板菌落計數(shù)法★技術(shù)要求：樣品充分混勻，操作熟練快速（15~20min完成操作），嚴(yán)格無菌操作；★注意事項：每一支吸管只能用于一個稀釋度，樣品混勻處理，傾注平板時的培養(yǎng)基溫度；★適用范圍：中溫、好氧和兼性厭氧、能
