最新Feulgen反應(yīng)和Brachet反應(yīng)PPT課件.ppt

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1、進(jìn)入夏天,少不了一個(gè)熱字當(dāng)頭,電扇空調(diào)陸續(xù)登場(chǎng),每逢此時(shí),總會(huì)想起那一把蒲扇。蒲扇,是記憶中的農(nóng)村,夏季經(jīng)常用的一件物品?! ∮洃浿械墓枢l(xiāng),每逢進(jìn)入夏天,集市上最常見的便是蒲扇、涼席,不論男女老少,個(gè)個(gè)手持一把,忽閃忽閃個(gè)不停,嘴里叨叨著“怎么這么熱”,于是三五成群,聚在大樹下,或站著,或隨即坐在石頭上,手持那把扇子,邊嘮嗑邊乘涼。孩子們卻在周圍跑跑跳跳,熱得滿頭大汗,不時(shí)聽到“強(qiáng)子,別跑了,快來我給你扇扇”。孩子們才不聽這一套,跑個(gè)沒完,直到累氣喘吁吁,這才一跑一踮地圍過了,這時(shí)母親總是,好似生氣的樣子,邊扇邊訓(xùn),“你看熱的,跑什么?”此時(shí)這把蒲扇,是那么涼快,那么的溫

2、馨幸福,有母親的味道!  蒲扇是中國(guó)傳統(tǒng)工藝品,在我國(guó)已有三千年多年的歷史。取材于棕櫚樹,制作簡(jiǎn)單,方便攜帶,且蒲扇的表面光滑,因而,古人常會(huì)在上面作畫。古有棕扇、葵扇、蒲扇、蕉扇諸名,實(shí)即今日的蒲扇,江浙稱之為芭蕉扇。六七十年代,人們最常用的就是這種,似圓非圓,輕巧又便宜的蒲扇?! ∑焉攘鱾髦两瘢业挠洃浿?,它跨越了半個(gè)世紀(jì),也走過了我們的半個(gè)人生的軌跡,攜帶著特有的念想,一年年,一天天,流向長(zhǎng)長(zhǎng)的時(shí)間隧道,裊Feulgen反應(yīng)和Brachet反應(yīng)鏡頭編號(hào)ABCDEF標(biāo)本明暗背景明暗圖象清晰否鏡頭類型(明反差、暗反差和普通物鏡三種)40×20×NH20×10×40×NH

3、40×PL負(fù)相差物鏡(Negative contrast)用縮寫字母“N”表示,正相差物鏡(Positive?contrast)用縮寫字母“P”表示,由于吸收膜對(duì)通過它的光線的透過率不同,可分為高、中、低及低低,如Olympus光的透過率分為:7%、15%、20%、40%四個(gè)等級(jí),因此分為高(High略寫為H),中(Medium略寫為M),低(Low略寫為L(zhǎng))及低低(Low—Low略寫成LL)四類,構(gòu)成了負(fù)高(NH)、負(fù)中(NM)、正低(PL)和正低低(PLL)四種類型相差物鏡,這些字母符號(hào)都寫在相差物鏡的外殼上。可根據(jù)被檢物體的特性來選擇使用不同類型的相差物鏡。實(shí)驗(yàn)二細(xì)

4、胞化學(xué)多糖的顯示——PAS反應(yīng)核酸(DNA及RNA)的顯示法細(xì)胞化學(xué)是利用特殊的試劑與細(xì)胞的特定成分其化學(xué)變化引起顏色反應(yīng),并用顯微鏡鑒別所示物質(zhì)成分的性質(zhì)和位置的方法。(三)實(shí)驗(yàn)操作1、取馬鈴薯塊莖切成薄片,浸入過碘酸溶液10分鐘;2、用70%的酒精沖洗1次;3、將薄片放入Schiffer試劑中20-25分鐘;4、取出放入還原液1分鐘;5、70%的酒精沖洗1次;6、將薄片放在載玻片上吸去酒精,加上蓋玻片,鏡下觀察。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:塊莖組織細(xì)胞內(nèi)可見到紫紅色或深紅色淀粉顆粒。(四)作業(yè)1、寫出PAS反應(yīng)的試驗(yàn)原理,繪制實(shí)驗(yàn)結(jié)果,并描述。2、對(duì)于PAS反應(yīng)的對(duì)照實(shí)驗(yàn),你認(rèn)為應(yīng)該怎

5、樣設(shè)計(jì),請(qǐng)寫出完整的實(shí)驗(yàn)步驟。二、核酸(DNA及RNA)的顯示法(一)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模ǘ?shí)驗(yàn)原理(三)實(shí)驗(yàn)操作(四)作業(yè)(二)實(shí)驗(yàn)原理1、Feulgen反應(yīng)的原理根據(jù)DNA經(jīng)弱酸水解后,打開了嘌呤堿基和脫氧核糖連接的鍵,在脫氧核糖的一端形成游離的醛基。這些醛基就在原位與Schiff試劑結(jié)合,形成紫紅色的化合物。所以凡有DNA的部位,就呈現(xiàn)為紫紅色。2、Brachet反應(yīng)的原理利用核酸分子上的磷酸根和堿性染料形成鹽鍵而在原位沉淀顯色的原理,根據(jù)DNA和RNA對(duì)堿性染料的親合力有差別,用Unna試劑進(jìn)行選擇性染色是顯示核酸的方法之一。在Unna試劑中甲基綠與空間構(gòu)型完整的DNA親

6、和力高,并且甲基綠分子中的兩個(gè)含N基團(tuán)帶正電荷正好與DNA分子的負(fù)電基團(tuán)相結(jié)合,這樣DNA被Unna試劑中的甲基綠染成綠色或藍(lán)綠色。而RNA則被Unna試劑中的派咯寧(PyroninG)染成紅色。甲基綠派洛寧(三)實(shí)驗(yàn)操作①取小麥根尖、蠶豆根尖和洋蔥內(nèi)表皮于浸入預(yù)熱至60℃的1NHcl中水解,時(shí)間分別為8分鐘、2分鐘、10min。②轉(zhuǎn)入Schiff液中染20—25min,待根尖變?yōu)樯罴t色;③在新配亞硫酸水中洗兩次,每次1min;④水洗2min,在載玻片上切下深紅色根尖備用;⑤加一滴45%HAc于載片上,將根尖放入,加上蓋玻片壓片,輕輕敲打,鏡下觀察。1、Feu1gen反應(yīng)

7、2、Brachet反應(yīng)撕取洋蔥鱗莖內(nèi)表皮一塊置載玻片上;加一滴Unna試劑,染30min;用自來水沖洗1次,加上蓋玻片,用濾紙吸干水分,鏡下觀察。在顯微鏡下可觀察到DNA所在的核和染色體染成綠色或藍(lán)綠色,含有大量RNA的核仁呈鮮紅色,含有RNA的細(xì)胞質(zhì)呈淡紅色。(四)作業(yè)分別寫出Feulgen反應(yīng)和Brachet反應(yīng)的原理,并分別繪圖描述所觀察到的試驗(yàn)結(jié)果。比較洋蔥表皮細(xì)胞經(jīng)Feulgen反應(yīng)和Brachet反應(yīng)后顯色的差異,說明產(chǎn)生差異的原因。蠶豆根尖細(xì)胞Feulgen反應(yīng)細(xì)胞核(紫紅色)核仁(無色)小麥根尖細(xì)胞Feulge

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