leica tcs sp5激光共聚焦顯微鏡系統(tǒng)軟件操作手冊

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1、LeicaTCSSP5激光共聚焦顯微鏡系統(tǒng)軟件操作手冊打開軟件后，默認在Acquire面板的acquisition中，acquisitionmode為xyz，F(xiàn)ormat掃描像素為512x512，averagelineandframeaverage為1。根據(jù)需要選擇掃描模式，常用的有以下幾種：xyz層面掃描；xyt時間掃描；xyλ光譜掃描。掃描像素一般選1024×1024設置平均一般選擇lineaverage2-3次保存圖像方法注意：一般在掃描結束后統(tǒng)一保存，為免數(shù)據(jù)丟失，可以從獲取第一張圖片后就要開始保存，以后每獲

2、取一張圖片保存一次。1、保存Leica.lif文件進入Acquire面板的Experiment中，右鍵點擊Experiment，從彈出菜單中選中“SaveExperiment“Experiment”as…”，保存lif文件到自己的文件夾中并取名。2、導出lif文件右鍵點擊Experiment，從彈出菜單中選中“ExportExperimentastiff”，選擇目標文件夾，選中rawdata導出單通道圖片。如需導出overlay圖片，則再次右鍵點擊Experiment，從彈出菜單中選中“ExportExperimen

3、tastiff”，選擇目標文件夾，選中overlay導出多通道合成圖片。一、獲取單一熒光圖像1、在beampathsetting中的load/savesinglesetting中選擇所標記熒光的光路設置方法。2、點擊live開始連續(xù)掃描，優(yōu)化圖像質量。調節(jié)zposition選擇需掃描層面，調節(jié)gain和offset使圖像亮度和背景到達到合適的狀態(tài)，Zoom調節(jié)電子放大倍率。點擊stop，停止掃描。3、選擇像素1024×10244、點擊captureimage獲取圖像。5、保存圖像。二、獲取多熒光圖像1、點擊seq，出

4、現(xiàn)sequentialscan面板。2、在sequentialscan面板中點擊scan1，在beampathsetting中選擇所標記的一種熒光的光路設置方法。點擊live開始連續(xù)掃描，優(yōu)化圖像質量。調節(jié)zposition選擇需掃描層面，調節(jié)gain和offset使圖像亮度和背景到達到合適的狀態(tài)，Zoom調節(jié)電子放大倍率。點擊stop，停止掃描。在sequentialscan面板中點擊“+”，點擊scan2，在beampathsetting中選擇所標記的另一種熒光的光路設置方法，點擊live開始連續(xù)掃描，優(yōu)化圖像質

5、量。標記了幾種熒光就添加幾種方法。選擇“betweenframes”模式。3、選擇像素1024×1024，點擊Start獲取圖像。4、保存圖像。三、獲取多層熒光圖像1、在beampathsetting中選擇所標記熒光的光路設置方法。2、打開Z-stack面板。3、點擊live開始連續(xù)掃描，優(yōu)化圖像質量。調節(jié)zposition選擇需掃描層面，設置begin和end，調節(jié)gain和offset使圖像亮度和背景到達到合適的狀態(tài)，Zoom調節(jié)電子放大倍率。點擊stop，停止掃描。在Z-stack面板中確定Nr.Ofsteps

6、（在選擇層面中確定需掃描張數(shù)）4、點擊start獲取圖像。5、如需將掃描圖像疊加，選擇Process面板，選擇visualization3Dprojection，點擊apply，即可生成疊加圖像。6、保存圖像。四、獲取時間序列圖像1、Acquisitionmode改為xyt。2、根據(jù)需要拍攝圖像的時間間隔和圖像質量調整fomat和lineaverage值。3、在beampathsetting中的load/savesinglesetting中選擇所標記熒光的光路設置方法。如是多種熒光則選擇點擊seq，設置序列掃描。4、

7、點擊live開始連續(xù)掃描，優(yōu)化圖像質量。調節(jié)zposition選擇需掃描層面，調節(jié)gain和offset使圖像亮度和背景到達到合適的狀態(tài)，Zoom調節(jié)電子放大倍率。點擊stop，停止掃描。5、點擊start獲取圖像。6、保存圖像。