LeicaTCSSP5激光共聚焦顯微鏡系統(tǒng)軟件操作手冊

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1、LeicaTCSSP5激光共聚焦顯微鏡系統(tǒng)軟件操作手冊打開軟件后，默認(rèn)在Acquire面板的acquisition中，acquisitionmode為xyz，F(xiàn)ormat掃描像素為512x512，averagelineandframeaverage為1。選擇掃描模式，xyz層面掃描xyt時間掃描xyλ光譜掃描掃描像素一般選1024×1024設(shè)置平均一般選擇lineaverage4-8次保存圖像方法注意：從獲取第一張圖片后就要開始保存，以后每獲取一張圖片都要保存一次，以免數(shù)據(jù)丟失。1、保存Leica.lif文件進入Acquire

2、面板的Experiment中，右鍵點擊Experiment，從彈出菜單中選中“SaveExperiment“Experiment”as…”，保存lif文件到自己的文件夾中并取名。2、導(dǎo)出lif文件右鍵點擊Experiment，從彈出菜單中選中“ExportExperimentastiff”，選擇目標(biāo)文件夾，選中rawdata導(dǎo)出單通道圖片。如需導(dǎo)出overlay圖片，則再次右鍵點擊Experiment，從彈出菜單中選中“ExportExperimentastiff”，選擇目標(biāo)文件夾，選中overlay導(dǎo)出多通道合成圖片。一、獲

3、取單一熒光圖像1、在beampathsetting中的load/savesinglesetting中選擇所標(biāo)記熒光的光路設(shè)置方法。2、點擊live開始連續(xù)掃描，優(yōu)化圖像質(zhì)量。調(diào)節(jié)zposition選擇需掃描層面，調(diào)節(jié)gain和offset使圖像亮度和背景到達到合適的狀態(tài)，Zoom調(diào)節(jié)電子放大倍率。點擊stop，停止掃描。3、點擊captureimage獲取圖像。4、保存圖像。二、獲取多熒光圖像1、點擊seq，出現(xiàn)sequentialscan面板。2、在sequentialscan面板中點擊scan1，在beampathsett

4、ing中選擇所標(biāo)記的一種熒光的光路設(shè)置方法。點擊live開始連續(xù)掃描，優(yōu)化圖像質(zhì)量。調(diào)節(jié)zposition選擇需掃描層面，調(diào)節(jié)gain和offset使圖像亮度和背景到達到合適的狀態(tài)，Zoom調(diào)節(jié)電子放大倍率。點擊stop，停止掃描。在sequentialscan面板中點擊“+”，點擊scan2，在beampathsetting中選擇所標(biāo)記的另一種熒光的光路設(shè)置方法，點擊live開始連續(xù)掃描，優(yōu)化圖像質(zhì)量。標(biāo)記了幾種熒光就添加幾種方法。選擇“betweenframes”模式。3、點擊Start獲取圖像。4、保存圖像。三、獲取多層

5、熒光圖像1、在beampathsetting中選擇所標(biāo)記熒光的光路設(shè)置方法。2、打開Z-stack面板。3、點擊live開始連續(xù)掃描，優(yōu)化圖像質(zhì)量。調(diào)節(jié)zposition選擇需掃描層面，設(shè)置begin和end，調(diào)節(jié)gain和offset使圖像亮度和背景到達到合適的狀態(tài)，Zoom調(diào)節(jié)電子放大倍率。點擊stop，停止掃描。在Z-stack面板中確定Nr.Ofsteps（在選擇層面中確定需掃描張數(shù)）4、點擊start獲取圖像。5、如需將掃描圖像疊加，選擇Process面板，選擇visualization3Dprojection，點擊

6、apply，即可生成疊加圖像。6、保存圖像。四、獲取時間序列圖像1、Acquisitionmode改為xyt。2、根據(jù)需要拍攝圖像的時間間隔和圖像質(zhì)量調(diào)整fomat和lineaverage值。3、在beampathsetting中的load/savesinglesetting中選擇所標(biāo)記熒光的光路設(shè)置方法。如是多種熒光則選擇點擊seq，設(shè)置序列掃描。4、點擊live開始連續(xù)掃描，優(yōu)化圖像質(zhì)量。調(diào)節(jié)zposition選擇需掃描層面，調(diào)節(jié)gain和offset使圖像亮度和背景到達到合適的狀態(tài)，Zoom調(diào)節(jié)電子放大倍率。點擊stop

7、，停止掃描。5、點擊start獲取圖像。6、保存圖像。