離子交換層析分離純化漆酶 畢業(yè)論文

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1、學院本科生畢業(yè)設計（論文）學院本科生畢業(yè)設計（論文）題目離子交換層析分離純化漆酶姓名學號系別生命科學系專業(yè)生物工程指導教師職稱教授年月日學院教務處制7學院本科生畢業(yè)設計（論文）目錄摘要……………………………………………………………………………………1關(guān)鍵詞…………………………………………………………………………………1Abstract………………………………………………………………………………1Keywords……………………………………………………………………………1引言………………………………………………………………………………

2、11材料與方法………………………………………………………………………11.1材料來源……………………………………………………………………21.2方法…………………………………………………………………………21.2.1硫酸銨鹽析………………………………………………………………21.2.2離心……………………………………………………………………21.2.3透析…………………………………………………………………21.2.4酶活力和蛋白含量的測定………………………………………………21.2.4.1酶活力的測定…………………………………………

3、………………21.2.4.2蛋白含量的測定………………………………………………………21.2.5酶液濃縮……………………………………………………………21.2.6離子交換柱層析…………………………………………………………21.2.7酶活力和蛋白含量測定…………………………………………………31.2.8酶回收率和純化度的計算………………………………………………32分析和討論…………………………………………………………………………32.1牛血清蛋白標準曲線……………………………………………………32.2離子交換層析柱結(jié)果……………………

4、………………………………32.3酶的純化度和回收率………………………………………………………42.4討論…………………………………………………………………………5參考文獻………………………………………………………………………………5致謝……………………………………………………………………………………67學院本科生畢業(yè)設計（論文）離子交換層析分離純化漆酶生物工程專業(yè)學生指導教師摘要：粗酶液經(jīng)鹽析、離心、透析和濃縮后，上樣于Q-SepharoseF.F.層析柱，獲得具有漆酶活性的組分。關(guān)鍵詞：粗毛栓菌，漆酶，離子交換層析Seperati

5、onandPurificationofLaccasesinTrametesgallicaStudentmajoringinBiotechnologyDingJijinTutorSunXunAbstract:Thecrudeenzymewasultrafiltrated,saltedout,dialyzedconcentrateandap-pliedtoQ-Sepharoseionexchangecolumn.Thecompositionwithlaccaseactivitywasabtained.Keywords:Trametesg

6、allicaFr.,laccase,ionexchangechromatography引言漆酶是一種含銅的多酚氧化酶，最早是從日本的漆樹汁中發(fā)現(xiàn)的，是人類最早發(fā)現(xiàn)的酶之一，但直到現(xiàn)在，人們對它的認識還不完整[1]。近年來，隨著漆酶功能的逐步發(fā)現(xiàn)，有關(guān)漆酶的研究受到普遍的重視。由于在降解木質(zhì)素方面的功能，使之在制漿造紙工業(yè)，特別是紙漿生物漂白領(lǐng)域得到深入的研究和開發(fā)[2，3]，在環(huán)保方面也有很大的潛力，如它可與有毒的酚類作用，使含苯氧基類的除草劑、石油化工廢物的物質(zhì)解去毒性等[4]。隨著應用的不斷加深，漆酶的研究和開發(fā)越來越受到人們的

7、關(guān)注[5]。對白腐真菌粗毛栓菌(TrametesgallicaFr.)的前期研究顯示,該菌能產(chǎn)生3種主要的木質(zhì)素降解酶:木質(zhì)素過氧化物酶(LigninPeroxidase),錳過氧化物酶(ManganesePeroxidase)以及漆酶,且具有較好的木質(zhì)素降解能力[6]。通過對測定真菌漆酶酶活的各種不同的分光光度法進行了綜述和比較分析,認為采用ABTS法作為測定漆酶酶活的方法較具合理性和科學性,建議作為漆酶酶活測定7學院本科生畢業(yè)設計（論文）的統(tǒng)一方法[7]。本文就以漆酶的分離、純化及其部分性質(zhì)進行初步研究。并測定其純化度和回收率。

8、1材料與方法1.1材料來源粗酶液是由老師提供。該酶液來自粗毛栓菌TrametesgallicaFr.在麥草粉中的培養(yǎng)物[8]。1.2方法1.2.1硫酸銨鹽析首先在粗酶液中添加固體（NH4）2SO4粉末至30%飽和度，過夜離心（7,00